| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 胶原蛋白 | 第9-10页 |
| 1.1.1 胶原蛋白概述 | 第9页 |
| 1.1.2 胶原蛋白的应用 | 第9-10页 |
| 1.1.3 类人胶原蛋白的优越性 | 第10页 |
| 1.2 磷酸烯醇式丙酮酸：糖磷酸转移酶系统(PTS)概述 | 第10-11页 |
| 1.3 代谢工程概述 | 第11-13页 |
| 1.4 高密度发酵 | 第13-14页 |
| 1.4.1 高密度发酵概述 | 第13页 |
| 1.4.2 高密度发酵的影响因素 | 第13-14页 |
| 1.5 荧光定量PCR | 第14-18页 |
| 1.5.1 荧光定量PCR的主要概念 | 第14-15页 |
| 1.5.2 荧光定量PCR的方法 | 第15-16页 |
| 1.5.3 SYBR Green Ⅰ染料法 | 第16页 |
| 1.5.4 TaqMan水解探针法 | 第16-17页 |
| 1.5.5 荧光定量PCR的应用前景展望 | 第17-18页 |
| 1.6 本文研究的目的、内容和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第20-42页 |
| 2.1 实验菌种 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.2.1 实验仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 培养基组成 | 第22-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.3.1 菌种活化 | 第24页 |
| 2.3.2 种子培养 | 第24页 |
| 2.3.3 摇瓶培养 | 第24-25页 |
| 2.3.4 菌体收集 | 第25页 |
| 2.3.5 引物设计与合成 | 第25-26页 |
| 2.3.6 大肠杆菌总RNA提取及反转录 | 第26-28页 |
| 2.3.7 荧光定量PCR反应 | 第28-29页 |
| 2.4 分析方法 | 第29-42页 |
| 2.4.1 菌体浓度测定 | 第29页 |
| 2.4.2 发酵液残留葡萄糖含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.4.3 发酵液残留木糖含量的测定 | 第30-31页 |
| 2.4.4 发酵液残留无机氮含量的测定 | 第31-33页 |
| 2.4.5 荧光定量PCR数据分析 | 第33-34页 |
| 2.4.6 酶活力测定 | 第34-37页 |
| 2.4.7 类人胶原蛋白含量的测定 | 第37-42页 |
| 第三章 代谢关键节点酶的基因水平与酶活水平分析 | 第42-49页 |
| 3.1 引言 | 第42-43页 |
| 3.2 ptsG敲除对葡萄糖代谢的影响 | 第43-45页 |
| 3.3 ptsG敲除对氮代谢的影响 | 第45-48页 |
| 3.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 多碳源培养 | 第49-61页 |
| 4.0 引言 | 第49-50页 |
| 4.1 ptsG敲除菌在以葡萄糖为唯一碳源的M9改良培养基中生长特性 | 第50-55页 |
| 4.1.1 ptsG敲除对细胞生长和乙酸积累的影响 | 第50-52页 |
| 4.1.2 ptsG敲除对葡萄糖利用和氮源利用的影响 | 第52-53页 |
| 4.1.3 ptsG敲除对HLC产量的影响 | 第53-55页 |
| 4.2 ptsG敲除菌在以木糖为唯一碳源的M9改良培养基生长特性 | 第55-57页 |
| 4.3 ptsG敲除菌在葡萄糖木糖混合糖为碳源的M9改良培养基生长特性 | 第57-60页 |
| 4.3.1 ptsG敲除对细胞生长、混合碳源利用的影响 | 第57-59页 |
| 4.3.2 ptsG敲除对氮源利用和HLC产量的影响 | 第59-60页 |
| 4.4 本章小结 | 第60-61页 |
| 总结与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
