| 摘要 | 第2-3页 |
| Summary | 第3页 |
| 缩略词表 | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-19页 |
| 1.1 大麦再生体系的研究 | 第8-12页 |
| 1.1.1 研究进展 | 第8页 |
| 1.1.2 幼胚培养 | 第8-9页 |
| 1.1.3 幼穗培养 | 第9页 |
| 1.1.4 花药及小孢子培养 | 第9-10页 |
| 1.1.5 原生质体培养 | 第10页 |
| 1.1.6 成熟胚培养 | 第10-11页 |
| 1.1.7 叶基培养 | 第11页 |
| 1.1.8 茎尖培养 | 第11-12页 |
| 1.2 大麦遗传转化研究 | 第12-14页 |
| 1.2.1 研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 遗传转化方法 | 第13-14页 |
| 1.3 植物抗旱耐盐的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3.1 土壤盐碱化 | 第14页 |
| 1.3.2 盐胁迫对植物的危害 | 第14-15页 |
| 1.4 Na~+/H~+逆向转运蛋白的研究 | 第15-16页 |
| 1.4.1 NHX | 第15-16页 |
| 1.4.2 HgNHX1 | 第16页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 1.6 技术路线 | 第18-19页 |
| 第二章 大麦茎尖愈伤组织的诱导和植株高频再生 | 第19-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要器材 | 第19页 |
| 2.1.3 主要试剂及培养基配方 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 种子处理 | 第20页 |
| 2.2.2 种子灭菌 | 第20-21页 |
| 2.2.3 茎尖外植体准备 | 第21页 |
| 2.2.4 茎尖外植体愈伤组织诱导、继代培养以及植株再生 | 第21页 |
| 2.2.5 不同苗龄对茎尖培养的效果 | 第21-22页 |
| 2.2.6 愈伤诱导培养基中 2, 4-D浓度梯度设置 | 第22页 |
| 2.2.7 植株生根、移栽 | 第22页 |
| 2.2.8 数据处理分析 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-28页 |
| 2.3.1 大麦种子不同去壳方式的效果 | 第22-23页 |
| 2.3.2 种子最佳灭菌组合的分析 | 第23-25页 |
| 2.3.3 大麦茎尖的培养效果分析 | 第25-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-29页 |
| 2.4.1 大麦种子无菌苗的培养 | 第28页 |
| 2.4.2 大麦愈伤组织培养 | 第28-29页 |
| 2.5 结论 | 第29-30页 |
| 第三章 耐盐HgNHX1基因对大麦的遗传转化 | 第30-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 材料 | 第30页 |
| 3.1.2 质粒载体 | 第30页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 3.1.4 主要试剂、常用酶及培养基配方 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-36页 |
| 3.2.1 菌液PCR检测 | 第31页 |
| 3.2.2 工程菌的活化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 大麦茎尖愈伤的侵染 | 第32页 |
| 3.2.4 农杆菌侵染时间对转化效率的影响 | 第32页 |
| 3.2.5 超声波处理时间对转化效率的影响 | 第32页 |
| 3.2.6 真空渗透时间对转化效率的影响 | 第32页 |
| 3.2.7 超声波结合真空渗透对转化效率的影响 | 第32页 |
| 3.2.8 GUS组织化学分析 | 第32-33页 |
| 3.2.9 培养阶段 | 第33-35页 |
| 3.2.10 转基因大麦植株RT-PCR分析 | 第35-36页 |
| 3.2.11 目的基因的生物信息学分析 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-43页 |
| 3.3.1 菌液PCR检测 | 第36-37页 |
| 3.3.2 农杆菌介导的大麦茎尖愈伤的转化及转基因植株的获得 | 第37-38页 |
| 3.3.3 茎尖愈伤的农杆菌转化过程中参数的优化 | 第38-39页 |
| 3.3.4 HgNHX1编码蛋白的生物信息学分析 | 第39-41页 |
| 3.3.5 转基因大麦植株PCR检测 | 第41-42页 |
| 3.3.6 转基因大麦植株RT-PCR分析 | 第42-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.4.1 大麦茎尖愈伤的转化 | 第43页 |
| 3.4.2 农杆菌转化过程中部分参数对转化效率的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.3 抗性植株的获得与初步检测 | 第44页 |
| 3.5 结论 | 第44-45页 |
| 第四章 盐胁迫下HgNHX1基因在啤酒大麦中的表达与作用研究 | 第45-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第45页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 4.2.1 大麦材料培养与处理 | 第45-46页 |
| 4.2.2 盐处理过程中的表型观察 | 第46页 |
| 4.2.3 总RNA的提取、质量检测及定量 | 第46-47页 |
| 4.2.4 基因表达分析 | 第47-48页 |
| 4.2.5 各生理指标测定 | 第48-49页 |
| 4.3 结果与分析 | 第49-53页 |
| 4.3.1 盐处理过程中的表型观察 | 第49-50页 |
| 4.3.2 转基因T_1代大麦盐胁迫前后生理指标分析 | 第50-52页 |
| 4.3.3 盐胁迫下HgNHX1基因的转录表达特性 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53页 |
| 4.5 结论 | 第53-54页 |
| 第五章 干旱胁迫下HgNHX1基因在啤酒大麦中的表达与作用研究 | 第54-60页 |
| 5.1 实验材料 | 第54页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第54页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第54页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第54页 |
| 5.2 实验方法 | 第54-55页 |
| 5.2.1 大麦材料培养与处理 | 第54页 |
| 5.2.2 干旱胁迫下的表型观察 | 第54页 |
| 5.2.3 总RNA的提取、质量检测及定量 | 第54-55页 |
| 5.2.4 基因表达分析 | 第55页 |
| 5.2.5 各指标测定方法 | 第55页 |
| 5.3 结果分析 | 第55-58页 |
| 5.3.1 干旱处理过程中的表型观察 | 第55页 |
| 5.3.2 转基因大麦T_1代株系干旱复水前后的生理指标分析 | 第55-57页 |
| 5.3.3 干旱胁迫下HgNHX1基因的转录表达特性 | 第57-58页 |
| 5.4 讨论 | 第58-59页 |
| 5.5 结论 | 第59-60页 |
| 第六章 全文总结 | 第60-62页 |
| 6.1 大麦茎尖愈伤组织诱导及植株高频再生 | 第60页 |
| 6.2 HgNHX1基因在大麦中的遗传转化 | 第60页 |
| 6.3 转HgNHX1基因大麦的抗旱耐盐性研究 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76-77页 |
| 导师简介 | 第77-78页 |
