摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
英文缩写词 | 第6-9页 |
1 前言 | 第9-11页 |
2 材料与方法 | 第11-26页 |
2.1 主要设备 | 第11页 |
2.2 试剂与用品 | 第11-13页 |
2.3 细胞模型 | 第13页 |
2.4 试验方法 | 第13-25页 |
2.4.1 猪Lgr5基因cDNA的克隆 | 第13-20页 |
2.4.2 Lgr5 过表达载体的构建 | 第20-21页 |
2.4.3 肠上皮细胞系IPEC-J2的培养 | 第21页 |
2.4.4 转染和筛选阳性细胞株 | 第21-22页 |
2.4.5 Real-time PCR | 第22-23页 |
2.4.6 Western blot | 第23-24页 |
2.4.7 细胞增殖的检测 | 第24-25页 |
2.4.8 激活或抑制Wnt信号通路 | 第25页 |
2.5 数据处理 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-35页 |
3.1 猪Lgr5基因cDNA序列的克隆 | 第26页 |
3.2 猪Lgr5过表达载体的构建 | 第26页 |
3.3 猪Lgr5基因的生物信息学分析 | 第26-31页 |
3.4 稳定转染IPEC-J2细胞的筛选 | 第31页 |
3.5 Lgr5在IPEC-J2细胞中过表达的鉴定 | 第31-32页 |
3.6 Lgr5过表达促进IPEC-J2细胞增殖 | 第32页 |
3.7 Lgr5过表达激活Wnt/β-catenin信号通路 | 第32-33页 |
3.8 Lgr5可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进IPEC-J2细胞增殖 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-39页 |
4.1 猪Lgr5 cDNA的克隆 | 第35-36页 |
4.2 Lgr5过表达的IPEC-J2细胞的获得 | 第36页 |
4.3 Lgr5过表达促进IPEC-J2细胞增殖 | 第36-37页 |
4.4 Lgr5可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进IPEC-J2细胞增殖 | 第37-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
附录A:Lgr5 ORF的测序图谱 | 第45-50页 |
附录B:已克隆猪Lgr5和人Lgr5 CDS序列比对 | 第50-52页 |
附录C | 第52页 |