| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第16-32页 |
| 1.1 课题背景 | 第16-17页 |
| 1.2 中东呼吸综合征冠状病毒 | 第17-27页 |
| 1.2.1 中东呼吸综合征 | 第17-18页 |
| 1.2.2 病毒的结构蛋白与功能 | 第18-20页 |
| 1.2.3 病毒的受体与作用机制 | 第20页 |
| 1.2.4 病毒溯源 | 第20-21页 |
| 1.2.5 临床症状 | 第21-22页 |
| 1.2.6 动物模型 | 第22-23页 |
| 1.2.7 MERS疫苗 | 第23-25页 |
| 1.2.8 MERS治疗 | 第25-26页 |
| 1.2.9 未来方向 | 第26-27页 |
| 1.3 病毒样颗粒研究进展 | 第27-32页 |
| 1.3.1 病毒样颗粒 | 第27-28页 |
| 1.3.2 病毒样颗粒的表达系统 | 第28-29页 |
| 1.3.3 病毒样颗粒疫苗 | 第29页 |
| 1.3.4 嵌合病毒样颗粒 | 第29-30页 |
| 1.3.5 病毒样颗粒应用中的挑战 | 第30-32页 |
| 2 中东呼吸综合冠状病毒病毒样颗粒的构建与制备 | 第32-49页 |
| 2.1 材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 细菌与菌种 | 第32页 |
| 2.1.2 载体、质粒与抗体 | 第32-33页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第33页 |
| 2.1.4 试剂与培养基 | 第33页 |
| 2.1.5 培养基配制 | 第33页 |
| 2.2 方法 | 第33-39页 |
| 2.2.1 重组质粒的构建与鉴定 | 第33-35页 |
| 2.2.2 重组杆粒的制备与鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2.3 重组杆状病毒的拯救 | 第36页 |
| 2.2.4 重组杆状病毒的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.5 重组杆状病毒滴度的测定 | 第37页 |
| 2.2.6 中东呼吸综合征冠状病毒病毒样颗粒的装配 | 第37-38页 |
| 2.2.7 中东呼吸综合征冠状病毒病毒样颗粒的鉴定 | 第38-39页 |
| 2.3 结果 | 第39-47页 |
| 2.3.1 S、M和E基因 | 第39页 |
| 2.3.2 S、M和E基因重组质粒的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.3 荧光蛋白报告基因的扩增 | 第40页 |
| 2.3.4 表达荧光蛋白报告基因重组质粒的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.5 共表达S、M、E基因重组质粒的鉴定 | 第41页 |
| 2.3.6 重组杆状病毒质粒的鉴定 | 第41-43页 |
| 2.3.7 重组杆状病毒的鉴定 | 第43-46页 |
| 2.3.8 中东呼吸综合征冠状病毒病毒样颗粒的鉴定 | 第46-47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-48页 |
| 2.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 3 中东呼吸综合征冠状病毒病毒样颗粒免疫原性评价 | 第49-59页 |
| 3.1 材料 | 第49页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第49页 |
| 3.1.2 试剂 | 第49页 |
| 3.1.3 溶液配制 | 第49页 |
| 3.2 方法 | 第49-53页 |
| 3.2.1 免疫原 | 第49-50页 |
| 3.2.2 受体结合区蛋白的制备 | 第50页 |
| 3.2.3 中东呼吸综合征假病毒包装 | 第50-51页 |
| 3.2.4 假病毒感染力测定 | 第51页 |
| 3.2.5 小鼠免疫 | 第51-52页 |
| 3.2.6 猴免疫 | 第52-53页 |
| 3.3 结果 | 第53-57页 |
| 3.3.1 受体结合区蛋白的制备 | 第53-55页 |
| 3.3.2 小鼠免疫效果 | 第55-56页 |
| 3.3.3 猴免疫效果 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 4 马抗中东呼吸综合征冠状病毒高免血清的制备与保护性评价 | 第59-64页 |
| 4.1 材料 | 第59页 |
| 4.1.1 实验动物 | 第59页 |
| 4.1.2 试剂 | 第59页 |
| 4.2 方法 | 第59-60页 |
| 4.2.1 免疫原 | 第59页 |
| 4.2.2 马免疫程序 | 第59-60页 |
| 4.2.3 马血清IgG抗体检测 | 第60页 |
| 4.2.4 抗体的体内与体外评价 | 第60页 |
| 4.3 结果 | 第60-62页 |
| 4.3.1 马血清抗体IgG效价 | 第60-61页 |
| 4.3.2 中和抗体滴度 | 第61页 |
| 4.3.3 马抗对小鼠模型的保护效果评价 | 第61-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 4.5 小结 | 第63-64页 |
| 5 中东呼吸综合征冠状病毒嵌合病毒样颗粒的构建与免疫原性评价 | 第64-76页 |
| 5.1 材料 | 第64-65页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第64页 |
| 5.1.2 载体 | 第64页 |
| 5.1.3 试剂 | 第64页 |
| 5.1.4 溶液配制 | 第64-65页 |
| 5.2 方法 | 第65-68页 |
| 5.2.1 融合基因的设计 | 第65页 |
| 5.2.2 重组质粒的构建与鉴定 | 第65页 |
| 5.2.3 重组杆状病毒质粒的生产与鉴定 | 第65-66页 |
| 5.2.4 重组杆状病毒的拯救 | 第66页 |
| 5.2.5 重组杆状病毒的鉴定 | 第66页 |
| 5.2.6 重组杆状病毒滴度测定 | 第66页 |
| 5.2.7 重组杆状病毒感染Sf9细胞 | 第66页 |
| 5.2.8 嵌合病毒样颗粒的制备 | 第66-67页 |
| 5.2.9 嵌合病毒样颗粒的鉴定 | 第67页 |
| 5.2.10 嵌合病毒样颗粒的免疫原性 | 第67-68页 |
| 5.3 结果 | 第68-74页 |
| 5.3.1 重组质粒的构建 | 第68-69页 |
| 5.3.2 重组杆状病毒质粒的鉴定 | 第69页 |
| 5.3.3 重组杆状病毒的鉴定 | 第69-70页 |
| 5.3.4 嵌合型中东呼吸综合征病毒样颗粒的鉴定 | 第70-71页 |
| 5.3.5 小鼠免疫实验结果 | 第71-74页 |
| 5.4 讨论 | 第74-75页 |
| 5.5 小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 附件 | 第94-95页 |
