| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 英文缩略语表 | 第18-20页 |
| 前言:灵芝药理活性及药代动力学研究进展 | 第20-32页 |
| 1 灵芝药理活性研究进展 | 第20-28页 |
| 1.1 免疫调节作用 | 第20-22页 |
| 1.2 抗肿瘤作用 | 第22-23页 |
| 1.3 中枢神经保护作用 | 第23-26页 |
| 1.4 保肝护肝作用 | 第26页 |
| 1.5 抗糖尿病作用 | 第26-27页 |
| 1.6 抗氧化作用 | 第27-28页 |
| 1.7 其他作用 | 第28页 |
| 2 灵芝药代动力学研究进展 | 第28-30页 |
| 2.1 灵芝三萜的体内吸收与分布 | 第28-29页 |
| 2.2 灵芝三萜的体内代谢与排泄 | 第29-30页 |
| 研究目的和主要内容 | 第30-32页 |
| 第一章 GAA代谢产物研究 | 第32-57页 |
| 第一节 GAA代谢产物的鉴定 | 第33-51页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第33页 |
| 1.2 仪器 | 第33页 |
| 1.3 实验动物 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-36页 |
| 2.1 大鼠体内代谢产物鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2 体外代谢产物鉴定 | 第35页 |
| 2.3 HPLC-DAD-MS/MS条件 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-50页 |
| 3.1 大鼠体内代谢产物鉴定 | 第36-41页 |
| 3.2 体外代谢产物鉴定 | 第41-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 第二节 GAA代谢物酶代谢动力学研究 | 第51-57页 |
| 1 材料 | 第51页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第51页 |
| 1.2 仪器 | 第51页 |
| 2 方法 | 第51-53页 |
| 2.1 代谢物M2和M4的酶动力学 | 第51-52页 |
| 2.2 参与代谢物M2和M4形成的CYP酶亚型的鉴定 | 第52页 |
| 2.3 代谢物M2和M4的UFLC-MS/MS分析条件 | 第52页 |
| 2.4 数据分析 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-56页 |
| 3.1 代谢物M2和M4的酶动力学 | 第53-55页 |
| 3.2 参与代谢物M2和M4形成的CYP酶 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第二章 GAA及其代谢物大鼠血浆及脑脊液药代动力学研究 | 第57-88页 |
| 第一节 大鼠血浆及脑微透析液中GAA测定方法的建立 | 第59-71页 |
| 1 材料 | 第59-60页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第59页 |
| 1.2 仪器 | 第59页 |
| 1.3 实验动物 | 第59-60页 |
| 2 方法 | 第60-63页 |
| 2.1 标准溶液和内标溶液的配制 | 第60页 |
| 2.2 人工脑脊液的配制 | 第60页 |
| 2.3 标准样品和质控样品的配制 | 第60-61页 |
| 2.4 生物样品处理 | 第61页 |
| 2.5 UFLC-MS/MS 条件 | 第61-62页 |
| 2.6 方法学验证 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-69页 |
| 3.1 方法专属性 | 第63页 |
| 3.2 线性、最低定量限和最低检测限 | 第63-64页 |
| 3.3 精密度、准确度和提取回收率 | 第64-68页 |
| 3.4 稳定性 | 第68页 |
| 3.5 基质效应 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-71页 |
| 4.1 UFLC-MS/MS检测条件的优化 | 第69-70页 |
| 4.2 血浆样品处理方法的优化 | 第70页 |
| 4.3 方法学验证 | 第70-71页 |
| 第二节 GAA及其代谢物大鼠血浆及脑脊液药代动力学研究 | 第71-88页 |
| 1 材料 | 第71-72页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第71页 |
| 1.2 仪器 | 第71-72页 |
| 1.3 动物 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-76页 |
| 2.1 脑微透析探针套管侧脑室植入手术 | 第72页 |
| 2.2 颈静脉插管手术 | 第72-73页 |
| 2.3 人工脑脊液的配制 | 第73页 |
| 2.4 探针的使用 | 第73-74页 |
| 2.5 探针回收率的测定 | 第74页 |
| 2.6 给药和样品采集 | 第74-75页 |
| 2.7 生物样品的处理 | 第75页 |
| 2.8 UFLC-MS/MS条件 | 第75-76页 |
| 2.9 数据处理 | 第76页 |
| 3 结果 | 第76-85页 |
| 3.1 探针回收率 | 第76页 |
| 3.2 静脉给药后GAA及其代谢物血浆药代动力学特性 | 第76-77页 |
| 3.3 口服给药后GAA及其代谢物血浆药代动力学特性 | 第77页 |
| 3.4 静脉给药后GAA脑脊液药代动力学特性 | 第77-85页 |
| 4 讨论 | 第85-88页 |
| 4.1 静脉给药后GAA及其代谢物血浆药代动力学特性 | 第85-86页 |
| 4.2 口服给药后GAA及其代谢物血浆药代动力学特性 | 第86页 |
| 4.3 静脉给药后GAA脑脊液药代动力学特性 | 第86-88页 |
| 第三章 GAA及其代谢物在大鼠体内排泄途径研究 | 第88-106页 |
| 第一节 大鼠胆汁和尿液中GAA测定方法的建立 | 第88-97页 |
| 1 材料 | 第88-89页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第88页 |
| 1.2 仪器 | 第88-89页 |
| 1.3 实验动物 | 第89页 |
| 2 方法 | 第89-91页 |
| 2.1 标准溶液和内标溶液的配制 | 第89页 |
| 2.2 标准样品和质控样品的配制 | 第89页 |
| 2.3 生物样品处理 | 第89-90页 |
| 2.4 UFLC-MS/MS条件 | 第90页 |
| 2.5 方法学验证 | 第90-91页 |
| 3 结果 | 第91-96页 |
| 3.1 专属性 | 第91页 |
| 3.2 线性、最低定量限和最低检测限 | 第91-94页 |
| 3.3 精密度和准确度 | 第94页 |
| 3.4 稳定性 | 第94-96页 |
| 3.5 基质效应 | 第96页 |
| 4 小结 | 第96-97页 |
| 第二节 GAA及其代谢物在大鼠体内排泄途径研究 | 第97-106页 |
| 1 材料 | 第97页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第97页 |
| 1.2 仪器 | 第97页 |
| 1.3 动物 | 第97页 |
| 2 方法 | 第97-98页 |
| 2.1 颈静脉插管手术和胆管插管手术 | 第97-98页 |
| 2.3 给药和样品采集 | 第98页 |
| 2.4 样品处理 | 第98页 |
| 2.5 UFLC-MS/MS条件 | 第98页 |
| 2.6 数据处理 | 第98页 |
| 3 结果 | 第98-104页 |
| 3.1 GAA及其代谢物在大鼠胆汁中的排泄率 | 第98-99页 |
| 3.2 GAA及其代谢物在大鼠尿液中的排泄率 | 第99-104页 |
| 4 讨论 | 第104-106页 |
| 第四章 GAA肠道吸收转运机制研究 | 第106-122页 |
| 1 材料 | 第106-107页 |
| 1.1 药品和试剂 | 第106-107页 |
| 1.2 仪器 | 第107页 |
| 2. 方法 | 第107-113页 |
| 2.1 细胞培养 | 第107-108页 |
| 2.2 GAA对Caco-2细胞存活率的影响 | 第108页 |
| 2.3 Caco-2细胞模型的建立 | 第108-110页 |
| 2.4 GAA在Caco-2细胞模型上转运机制研究 | 第110-112页 |
| 2.5 细胞透过液样品分析方法 | 第112页 |
| 2.6 数据处理 | 第112-113页 |
| 3 结果 | 第113-120页 |
| 3.1 GAA对Caco-2细胞存活率的影响 | 第113-114页 |
| 3.2 细胞模型的建立 | 第114-116页 |
| 3.3 GAA在Caco-2细胞模型上的转运机制研究 | 第116-120页 |
| 4 讨论 | 第120-122页 |
| 第五章 基于外排转运体的灵芝潜在药物相互作用研究 | 第122-147页 |
| 第一节 灵芝对外排转运体功能的影响 | 第122-134页 |
| 1 材料 | 第122-123页 |
| 1.1 药品和试剂 | 第122-123页 |
| 1.2 仪器 | 第123页 |
| 2 方法 | 第123-128页 |
| 2.1 灵芝提取物的制备 | 第123页 |
| 2.2 药品溶液的配制 | 第123-125页 |
| 2.3 细胞培养 | 第125页 |
| 2.4 细胞毒性实验 | 第125页 |
| 2.5 灵芝提取物对外排转运体功能的影响 | 第125-127页 |
| 2.6 GAA对外排转运体功能的影响 | 第127页 |
| 2.7 数据处理 | 第127-128页 |
| 3 结果 | 第128-132页 |
| 3.1 细胞毒性实验 | 第128-129页 |
| 3.2 灵芝提取物对P-gp功能的影响 | 第129-130页 |
| 3.3 灵芝提取物对MRP功能的影响 | 第130-131页 |
| 3.4 灵芝提取物对BCRP功能的影响 | 第131-132页 |
| 3.5 GAA对外排转运体功能的影响 | 第132页 |
| 4 讨论 | 第132-134页 |
| 第二节 灵芝提取物对外排转运体底物跨膜转运的影响 | 第134-147页 |
| 1 材料 | 第134页 |
| 1.1 药品和试剂 | 第134页 |
| 1.2 仪器 | 第134页 |
| 2 方法 | 第134-137页 |
| 2.1 药品溶液的制备 | 第134页 |
| 2.2 细胞培养 | 第134页 |
| 2.3 细胞毒性实验 | 第134页 |
| 2.4 Caco-2细胞模型的建立 | 第134-135页 |
| 2.5 灵芝提取物对P-gp底物跨膜转运的影响 | 第135-136页 |
| 2.6 灵芝提取物对MRP底物跨膜外排的影响 | 第136-137页 |
| 2.7 样品分析 | 第137页 |
| 2.8 数据处理 | 第137页 |
| 3 结果 | 第137-144页 |
| 3.1 灵芝提取物对P-gp底物跨膜转运的影响 | 第137-142页 |
| 3.2 灵芝提取物对MRP底物跨膜外排的影响 | 第142-144页 |
| 4 讨论 | 第144-147页 |
| 第六章 基于CYP450酶的灵芝潜在药物相互作用研究 | 第147-169页 |
| 1 材料 | 第147-148页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第147-148页 |
| 1.2 仪器 | 第148页 |
| 2 方法 | 第148-152页 |
| 2.1 灵芝提取物的制备 | 第148页 |
| 2.2 溶液配制 | 第148-150页 |
| 2.3 肝微粒体酶孵育体系 | 第150页 |
| 2.4 代谢产物的UFLC-MS/MS分析方法 | 第150页 |
| 2.5 方法学验证 | 第150-152页 |
| 2.6 数据分析 | 第152页 |
| 3 结果 | 第152-167页 |
| 3.1 方法学验证 | 第152-154页 |
| 3.2 阳性抑制剂对CYP450酶活性的影响 | 第154-158页 |
| 3.3 灵芝提取物对CYP450酶活性的影响 | 第158-166页 |
| 3.4 GAA对CYP450酶活性的影响 | 第166-167页 |
| 4 讨论 | 第167-169页 |
| 结语 | 第169-171页 |
| 参考文献 | 第171-185页 |
| 致谢 | 第185-187页 |
| 作者简介 | 第187-191页 |
