中文摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第9-17页 |
1.1 小麦赤霉病简介 | 第9-10页 |
1.2 小麦赤霉病的防治 | 第10-11页 |
1.3 小麦赤霉菌简介 | 第11-12页 |
1.4 小麦赤霉菌次级代谢产物的危害 | 第12-13页 |
1.5 小麦赤霉菌研究进展 | 第13-15页 |
1.6 FGSG_09297 基因研究背景 | 第15页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
2 小麦赤霉菌FGSG_09297 基因敲除盒的构建 | 第17-31页 |
2.1 试验材料、试剂和仪器 | 第17-19页 |
2.1.1 材料 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂及培养基配方 | 第17-19页 |
2.1.3 试验器材 | 第19页 |
2.2 试验方法及步骤 | 第19-25页 |
2.2.1 野生型小麦赤霉菌菌株PH-1 基因组DNA的提取 | 第19-20页 |
2.2.2 质粒pCB1003 DNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.3 FGSG_09297 基因敲除盒的构建 | 第21-25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-29页 |
2.3.1 野生型小麦赤霉菌PH-1 基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
2.3.2 pCB1003质粒DNA的提取 | 第26页 |
2.3.3 FGSG_09297 基因上下游序列的PCR扩增 | 第26-27页 |
2.3.4 hph基因上下游序列的PCR扩增 | 第27-28页 |
2.3.5 Split-Marker重叠序列的PCR扩增 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
3 小麦赤霉菌FGSG_09297 基因的敲除及转化子的筛选鉴定 | 第31-43页 |
3.1 试验材料、试剂和仪器 | 第31-33页 |
3.1.1 材料 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂及培养基配方 | 第31-33页 |
3.1.3 试验器材 | 第33页 |
3.2 试验方法及步骤 | 第33-37页 |
3.2.1 原生质体的制备与转化 | 第33-34页 |
3.2.2 转化子的筛选及鉴定 | 第34-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
3.3.1 转化子的初筛 | 第37-38页 |
3.3.2 转化子DNA的提取 | 第38页 |
3.3.3 转化子的PCR正负筛选 | 第38-41页 |
3.4 讨论 | 第41-43页 |
4 小麦赤霉菌FGSG_09297 基因敲除突变体的表型分析及致病力检测 | 第43-52页 |
4.1 试验材料、试剂和仪器 | 第43页 |
4.1.1 材料 | 第43页 |
4.1.2 主要试剂及培养基配方 | 第43页 |
4.1.3 试验器材 | 第43页 |
4.2 实验方法 | 第43-46页 |
4.2.1 菌落形态的观察 | 第43页 |
4.2.2 菌落生长速度的测定 | 第43-44页 |
4.2.3 分生孢子形态观察 | 第44页 |
4.2.4 产孢量的测定 | 第44页 |
4.2.5 原生质体释放实验 | 第44-45页 |
4.2.6 菌株对温度敏感性测定 | 第45页 |
4.2.7 番茄侵染试验 | 第45页 |
4.2.8 菌株培养液颜色观察 | 第45-46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-50页 |
4.3.1 菌落形态 | 第46页 |
4.3.2 菌落生长速度 | 第46-47页 |
4.3.3 分生孢子形态观察 | 第47页 |
4.3.4 产孢量 | 第47-48页 |
4.3.5 原生质体释放情况 | 第48页 |
4.3.6 菌株对温度敏感性 | 第48-49页 |
4.3.7 番茄侵染 | 第49-50页 |
4.3.8 菌液颜色 | 第50页 |
4.4 讨论 | 第50-52页 |
5 全文总结 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录 1 | 第58-61页 |
附录 2 | 第61-62页 |
附录 3 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64页 |