| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 羊奶脂肪酸组成及其营养价值 | 第13页 |
| 1.2 硬脂酰辅酶A去饱和酶与乳脂代谢 | 第13-15页 |
| 1.2.1 硬脂酰辅酶A去饱和酶的结构 | 第13-14页 |
| 1.2.2 硬脂酰辅酶A去饱和酶在反刍动物乳腺中的功能 | 第14-15页 |
| 1.3 硬脂酰辅酶A去饱和酶基因表达调控的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 常用蛋白质分离纯化方法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 根据蛋白质溶解度不同的分离方法 | 第16-17页 |
| 1.4.2 根据蛋白质分子大小的差别的分离方法 | 第17页 |
| 1.4.3 根据蛋白质带电性质进行分离 | 第17-18页 |
| 1.4.4 根据配体特异性的分离方法一亲和层析法 | 第18页 |
| 1.5 单克隆抗体技术 | 第18-23页 |
| 1.5.1 单克隆抗体研究概况 | 第18-19页 |
| 1.5.2 单克隆抗体的制备 | 第19-22页 |
| 1.5.3 单克隆抗体的优点局限 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 SCD基因的原核表达和亲和纯化 | 第24-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 主要仪器和试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第24页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第24-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 SCD基因的生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.2 原核表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.3 重组蛋白的表达及鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 融合蛋白表达的优化及纯化 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.3.1 SCD基因的生物信息学分析 | 第30-32页 |
| 2.3.2 重组原核表达载体p ET32a(+)-SCD的构建 | 第32页 |
| 2.3.3 重组蛋白的诱导表达及鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.4 融合蛋白表达的优化及纯化 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.4.1 融合蛋白表达序列的选择 | 第34页 |
| 2.4.2 表达载体及菌株的选择 | 第34页 |
| 2.4.3 重组蛋白表达条件的优化 | 第34-35页 |
| 2.4.4 重组蛋白的亲和纯化 | 第35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 SCD蛋白单克隆抗体的制备及纯化 | 第36-46页 |
| 3.1 试验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 主要仪器和试剂 | 第36页 |
| 3.1.2 细胞和试验动物 | 第36页 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 小鼠免疫试验 | 第37页 |
| 3.2.2 间接ELISA检测免疫血清的效价 | 第37-38页 |
| 3.2.3 细胞融合 | 第38页 |
| 3.2.4 细胞融合 | 第38-39页 |
| 3.2.5 杂交瘤细胞的筛选、培养和鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.6 腹水的制备及纯化 | 第40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 免疫小鼠的血清效价 | 第40-41页 |
| 3.3.2 细胞融合及杂交瘤细胞系的建立 | 第41-43页 |
| 3.3.3 腹水的制备及纯化 | 第43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-45页 |
| 3.4.1 动物免疫 | 第43-44页 |
| 3.4.2 细胞融合 | 第44页 |
| 3.4.3 阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第44-45页 |
| 3.4.4 单克隆抗体的大量制备和纯化 | 第45页 |
| 3.5 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 SCD单克隆抗体生物学特性的鉴定 | 第46-52页 |
| 4.1 材料 | 第46页 |
| 4.1.1 试剂和仪器 | 第46页 |
| 4.1.2 细胞 | 第46页 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 | 第46页 |
| 4.2 方法 | 第46-47页 |
| 4.2.1 单克隆抗体效价及类型的鉴定 | 第46-47页 |
| 4.2.2 腹水单克隆抗体的Western Blot鉴定 | 第47页 |
| 4.2.3 免疫荧光试验 | 第47页 |
| 4.2.4 利用同源建模分析单抗的抗原表位 | 第47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-50页 |
| 4.3.1 单抗效价及类型的鉴定 | 第47-48页 |
| 4.3.2 Western blot鉴定 | 第48页 |
| 4.3.3 免疫荧光试验 | 第48-49页 |
| 4.3.4 利用同源建模分析单抗识别的抗原表位 | 第49-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-51页 |
| 4.4.1 关于SCD单克隆抗体的生物学特性 | 第50页 |
| 4.4.2 利用同源建模分析单抗识别的抗原表位 | 第50-51页 |
| 4.5 小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 缩略词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
