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口服抑制素基因疫苗对大鼠精子发生的作用研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
第一章 前言第15-23页
    1 抑制素与精子发生第15-17页
        1.1 雄性动物精子发生第15页
        1.2 影响雄性动物精子发生的因素第15-16页
        1.3 抑制素在雄性动物的分布第16页
        1.4 抑制素对雄性精子发生的影响第16-17页
    2 抑制素免疫的研究进展第17-18页
        2.1 抑制素免疫原第17页
        2.2 抑制素免疫对雄性动物的研究进展第17-18页
    3 抑制素基因免疫的研究进展第18-21页
        3.1 抑制素抗性基因疫苗的研究进展第18-19页
            3.1.1 单拷贝抑制素基因免疫效果的影响第18页
            3.1.2 双拷贝抑制素基因免疫效果的影响第18-19页
            3.1.3 影响抑制素基因免疫效果因素第19页
        3.2 抑制素非抗性基因疫苗的研究进展第19-21页
            3.2.1 非抗性基因疫苗的优点第19-20页
            3.2.2 口服减毒沙门氏菌载体传递疫苗优点第20-21页
            3.2.3 非抗性抑制素基因疫苗免疫研究进展第21页
    4 研究目的与意义第21-23页
第二章 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠生殖器官发育的影响第23-39页
    1 材料与方法第23-28页
        1.1 实验菌种第23页
        1.2 实验动物第23页
        1.3 主要试剂和耗材第23页
        1.4 主要溶液和相关缓冲液第23-24页
        1.5 主要仪器设备第24页
        1.6 试验方法第24-27页
            1.6.1 细菌的活化与扩大培养第24-25页
            1.6.2 质粒的小提第25页
            1.6.3 质粒的酶切鉴定第25页
            1.6.4 实验分组及免疫程序第25-26页
            1.6.5 抗抑制素IgG抗体检测第26页
            1.6.6 脏器系数测定第26页
            1.6.7 精子悬液处理方法第26页
            1.6.8 大鼠睾丸组织切片制作第26-27页
        1.7 统计分析第27-28页
    2 结果第28-36页
        2.1 质粒鉴定结果第28页
        2.2 抑制素基因疫苗免疫后大鼠血清中抗体水平第28-30页
        2.3 抑制素基因疫苗免疫对大鼠体重的影响第30-31页
        2.4 抑制素基因疫苗免疫对大鼠脏器系数的影响第31-32页
        2.5 抑制素基因疫苗免疫对大鼠附睾尾精子数和畸形率的影响第32-34页
        2.6 抑制素基因疫苗免疫对大鼠睾丸组织形态结构学的影响第34-36页
    3 分析与讨论第36-37页
    4 小结第37-39页
第三章 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠内分泌激素水平的影响第39-49页
    1 材料与方法第39-41页
        1.1 实验动物与菌种第39页
        1.2 主要试剂与耗材第39页
        1.3 主要实验仪器设备第39-40页
        1.4 实验方法第40-41页
            1.4.1 血清抑制素B测定第40页
            1.4.2 血清FSH测定第40页
            1.4.3 血清LH测定第40页
            1.4.4 血清T测定第40-41页
        1.5 统计分析第41页
    2 结果第41-47页
        2.1 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠血清抑制素B水平的影响第41-42页
        2.2 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠血清FSH的影响第42-44页
        2.3 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠血清LH的影响第44-46页
        2.4 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠血清T的影响第46-47页
    3 分析与讨论第47-48页
    4 小结第48-49页
第四章 口服抑制素基因疫苗免疫对大鼠精子发生相关基因和蛋白的影响第49-67页
    1 材料与方法第49-55页
        1.1 实验动物与菌种第49页
        1.2 主要试剂第49-50页
        1.3 主要溶液和缓冲液第50页
        1.4 主要仪器设备第50页
        1.5 试验方法第50-55页
            1.5.1 引物的设计第50-51页
            1.5.2 总RNA提取第51-52页
            1.5.3 cDNA的合成第52页
            1.5.4 荧光定量检测基因mRNA水平表达水平第52-53页
            1.5.5 睾丸组织总蛋白提取第53页
            1.5.6 总蛋白含量测定第53-54页
            1.5.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第54页
            1.5.8 转膜第54页
            1.5.9 免疫杂交第54-55页
            1.5.10 ECL显色第55页
        1.6 统计分析第55页
    2 结果第55-63页
        2.1 睾丸组织总RNA提取第55-56页
        2.2 精子发生相关基因引物扩增特异性第56-57页
        2.3 精子发生相关基因mRNA表达的溶解曲线和基因相对定量图第57-59页
        2.4 抑制素基因疫苗免疫对大鼠精子发生相关基因mRNA表达变化的影响第59-60页
        2.5 抑制素基因疫苗免疫对大鼠睾丸组织INHβb亚基蛋白表达的影响第60-61页
        2.6 抑制素基因疫苗免疫对大鼠睾丸组织SMAD4蛋白表达的影响第61-62页
        2.7 抑制素基因疫苗免疫对大鼠睾丸组织Vimentin蛋白表达的影响第62-63页
    3 分析与讨论第63-65页
    4 小结第65-67页
第五章 结论与创新点第67-69页
    1.结论第67页
    2.创新点第67-69页
参考文献第69-77页
致谢第77-79页
作者简介第79页

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