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林可霉素高产菌株的选育及代谢过程的调控

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第1章 前言第10-27页
   ·林可霉素介绍第10-11页
     ·林可霉素的分子结构第10-11页
     ·林可霉素的应用和抑菌原理第11页
   ·林可霉素的合成途径第11-13页
     ·氨基部分的合成步骤第12页
     ·糖基部分的合成步骤第12-13页
     ·基团间的缩合和最后的修饰第13页
   ·林可霉素的代谢调控研究第13-18页
     ·微生物的基础代谢体系第13-14页
     ·碳源对林可霉素发酵的影响第14-15页
     ·氮源对林可霉素发酵的影响第15页
     ·铵根离子对林可霉素发酵的影响第15-16页
     ·磷酸根离子对林可霉素发酵的影响第16-17页
     ·金属离子对林可霉素发酵的影响第17页
     ·生物素和氨基酸对林可霉素发酵的影响第17页
     ·前体物质对林可霉素发酵的影响第17页
     ·溶氧和搅拌对林可霉素发酵的影响第17-18页
     ·pH对林可霉素发酵的影响第18页
     ·其他因素对林可霉素发酵的影响第18页
   ·林可霉素合成过程中的关键酶系第18-20页
     ·6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PDH)第18页
     ·磷酸果糖激酶(PFK)第18-19页
     ·酪氨酸酶(tyrosinase)第19页
     ·3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合酶(DAHPS)第19-20页
     ·氨同化途径酶系第20页
   ·林可霉素高产菌株的筛选第20-24页
     ·自然选育第21页
     ·诱变育种第21-24页
     ·诱变后的筛选方法第24页
   ·有关学科的国内外研究状况第24-26页
     ·国内研究状况第24-25页
     ·国外研究状况第25-26页
   ·本课题的研究意义、目的及主要内容第26-27页
第2章 实验材料和方法第27-38页
   ·实验材料第27-29页
     ·菌种第27页
     ·试剂第27页
     ·实验仪器第27-28页
     ·培养基配方第28-29页
   ·培养方法第29页
     ·分离和斜面培养第29页
     ·种子培养第29页
     ·发酵培养第29页
     ·50L罐上培养第29页
   ·实验方法第29-38页
     ·发酵液中林可霉素含量的测定方法第29-30页
     ·菌体生长量的确定第30-32页
     ·Berthelot法测铵根离子的浓度第32-33页
     ·考马斯亮蓝法(Bradford法)测蛋白的浓度第33页
     ·发酵液中氨基氮的测定方法第33-34页
     ·发酵液中还原糖的测定方法第34-35页
     ·发酵液中谷氨酰胺和酪氨酸的测定方法第35-38页
第3章 诱变选育第38-58页
   ·引言第38页
   ·实验材料及分析方法第38-42页
     ·实验用菌种第38页
     ·实验用培养基第38-39页
     ·培养方法第39页
     ·谷氨酰胺合成酶(GS)酶活力的测定第39页
     ·二维电泳操作步骤第39-41页
     ·孢子悬浮液的制备第41页
     ·诱变和筛选方法第41-42页
   ·实验结果与分析第42-54页
     ·最优诱变条件的确定第42-44页
     ·林可霉素抗性菌株的筛选第44-45页
     ·丙基脯氨酸结构类似物抗性菌株的筛选第45页
     ·谷氨酰胺结构类似物抗性菌株的筛选第45-46页
     ·同时耐受两种结构类似物的突变株的筛选第46-47页
     ·丙基脯氨酸结构类似物和谷氨酰胺对林可霉素合成的影响第47-50页
     ·突变株(P2-A6-P10-10)高产的机理分析第50-54页
   ·小结第54-58页
第4章 添加丙氨酸和三甲胺对林可霉素产量的影响第58-70页
   ·引言第58-59页
   ·实验材料及分析方法第59-62页
     ·实验用菌种第59页
     ·实验用培养基第59页
     ·培养方法第59页
     ·丙酮酸激酶酶活力的测定第59页
     ·邻氨基苯甲酸合成酶酶活力的测定方法第59-60页
     ·发酵液中L-多巴含量的测定方法第60-61页
     ·发酵液中丙酮酸含量的测定方法第61-62页
   ·实验结果与分析第62-68页
     ·三甲胺对林可霉素合成的影响第62-63页
     ·丙氨酸与三甲胺联合使用对林可霉素合成代谢的影响第63-64页
     ·丙氨酸和三甲胺促进林可霉素合成的机理研究第64-68页
   ·小结第68-70页
第5章 突变株(P2-A6-P10-10)在50L罐上的放大第70-74页
   ·前言第70页
   ·实验材料及分析方法第70页
     ·实验用菌种第70页
     ·实验用培养基第70页
     ·培养方法第70页
   ·实验结果与分析第70-73页
     ·pH和还原糖在发酵过程中的变化第70-71页
     ·氨基氮在发酵过程中的变化第71-72页
     ·菌体生长量在发酵过程中的变化第72-73页
     ·林可霉素产量在发酵过程中的变化第73页
   ·小结第73-74页
第6章 结论与展望第74-76页
   ·结论第74页
   ·展望第74-76页
参考文献第76-79页
致谢第79页

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