| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| ·泛素化修饰 | 第15-22页 |
| ·泛素化过程 | 第15-17页 |
| ·泛素化修饰过程中的蛋白组分与功能 | 第17-19页 |
| ·泛素链类型及其功能 | 第19-20页 |
| ·泛素蛋白酶体系统 | 第20-21页 |
| ·泛素化修饰研究进展 | 第21-22页 |
| ·泛素连接酶LRSAM1 | 第22-29页 |
| ·RING型泛素连接酶的结构特征 | 第22-23页 |
| ·LRSAM1研究进展 | 第23-29页 |
| 第二章 引言 | 第29-31页 |
| ·选题背景 | 第29页 |
| ·研究目的与意义 | 第29-31页 |
| 第三章 LRSAM1原核表达体系的构建和纯化 | 第31-43页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第31-32页 |
| ·实验材料和试剂 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31-32页 |
| ·试验方法 | 第32-36页 |
| ·cDNA获取 | 第32-33页 |
| ·原核重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的表达鉴定与纯化 | 第34-36页 |
| ·实验结果 | 第36-40页 |
| ·分析与讨论 | 第40-43页 |
| 第四章 LRSAM1 E3活性的优化 | 第43-53页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第43页 |
| ·实验材料和试剂 | 第43页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-47页 |
| ·去Sumo化酶Ulp1和E1泛素活化酶的纯化 | 第43-45页 |
| ·PreScission蛋白水解酶和E2泛素结合酶的纯化和活性鉴定 | 第45页 |
| ·泛素分子的构建和纯化 | 第45-46页 |
| ·E1泛素连接酶和E2泛素结合酶活性的鉴定 | 第46页 |
| ·LRSAM1的活性优化与体外活性检测 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-51页 |
| ·分析与讨论 | 第51-53页 |
| 第五章 LRSAM1活性位点的鉴定 | 第53-59页 |
| ·前言 | 第53页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第53页 |
| ·实验材料和试剂 | 第53页 |
| ·实验仪器 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-55页 |
| ·实验结果 | 第55-57页 |
| ·讨论与分析 | 第57-59页 |
| 第六章 LRSAM1介导的自泛素化链型的鉴定 | 第59-65页 |
| ·前言 | 第59页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第59-60页 |
| ·实验材料和试剂 | 第59页 |
| ·实验仪器 | 第59-60页 |
| ·试验方法 | 第60-61页 |
| ·实验结果 | 第61-63页 |
| ·讨论与分析 | 第63-65页 |
| 第七章 介导LRSAM1分子活性的E2的鉴定 | 第65-69页 |
| ·前言 | 第65页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第65页 |
| ·实验材料和试剂 | 第65页 |
| ·实验仪器 | 第65页 |
| ·试验方法 | 第65-66页 |
| ·实验结果 | 第66-67页 |
| ·分析与讨论 | 第67-69页 |
| 第八章 LRSAM1自泛素化位点和去泛素化研究 | 第69-77页 |
| ·前言 | 第69页 |
| ·实验材料、试剂与仪器 | 第69-70页 |
| ·实验材料和试剂 | 第69-70页 |
| ·实验仪器 | 第70页 |
| ·试验方法 | 第70-71页 |
| ·实验结果 | 第71-75页 |
| ·讨论与分析 | 第75-77页 |
| 第九章 结论与展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 附录 | 第89-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |
| 在校期间发表论文 | 第93页 |