摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-20页 |
引言 | 第20-22页 |
第一章 聚乙烯亚胺、普朗尼克P123 和功能肽在基因载体中的应用 | 第22-28页 |
1. PEI基因载体的应用研究 | 第22-23页 |
2. P123 基因载体的应用 | 第23-24页 |
3.功能肽在基因载体的应用 | 第24-26页 |
4.结语 | 第26-28页 |
第二章 P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的合成和表征 | 第28-39页 |
1 材料与仪器 | 第28-29页 |
·材料 | 第28-29页 |
·仪器 | 第29页 |
2 方法 | 第29-31页 |
·功能肽的构建 | 第29-30页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的合成 | 第30-31页 |
·活化普朗尼克P123 羟基 | 第30页 |
·修饰低分子量聚乙烯亚胺 | 第30页 |
·合成聚合物P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 | 第30-31页 |
·制备maleimided P123-PEI | 第30页 |
·maleimided P123-PEI偶联功能肽R4、R11 和R18 | 第30页 |
·聚合物的 1H-NMR表征 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-37页 |
·功能肽的合成 | 第31-35页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的分析 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第三章 P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的理化性质 | 第39-54页 |
1 试剂与仪器 | 第39-40页 |
·试剂 | 第39页 |
·仪器 | 第39-40页 |
2 实验方法 | 第40-44页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 缓冲能力的考查 | 第40页 |
·电泳阻滞分析 | 第40-41页 |
·复合物形态观察 | 第41页 |
·粒径测量 | 第41页 |
·Zeta电位的考查 | 第41-42页 |
·抗DNA酶降解的能力 | 第42页 |
·抗血清能力 | 第42-43页 |
·细胞毒性 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-51页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的缓冲能力 | 第44页 |
·凝胶电泳阻滞分析 | 第44-46页 |
·复合物形态观察 | 第46页 |
·复合物粒径测定 | 第46-48页 |
·复合物Zeta电位的测定 | 第48-49页 |
·抗DNA酶降解的能力 | 第49-50页 |
·抗血清能力 | 第50-51页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的细胞毒性 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
第四章 P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的细胞转染 | 第54-64页 |
1 材料与仪器 | 第54-55页 |
·材料 | 第54-55页 |
·仪器 | 第55页 |
2 方法 | 第55-57页 |
·质粒的抽提与纯化 | 第55-56页 |
·培养基的配制 | 第55页 |
·重组质粒的转化 | 第55页 |
·质粒DNA的抽提 | 第55-56页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 的细胞转染 | 第56-57页 |
·复合物制备 | 第56页 |
·细胞培养 | 第56页 |
·细胞转染 | 第56页 |
·绿色荧光蛋白报告基因的评价 | 第56页 |
·荧光素酶报告基因的评价 | 第56-57页 |
·测定荧光素酶报告基因的表达 | 第57页 |
·BCA法测定蛋白含量 | 第57页 |
3 结果 | 第57-62页 |
·质粒的抽提与纯化 | 第57页 |
·绿色荧光蛋白报告基因评价B16 细胞转染 | 第57-58页 |
·荧光酶报告基因的评价B16 细胞转染 | 第58-62页 |
·BCA法测定蛋白标准曲线 | 第58-61页 |
·P123-PEI-R4、P123-PEI-R11 和P123-PEI-R18 对B16 细胞的转染 | 第61-62页 |
4 结论 | 第62-64页 |
第五章 全文总结和展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
致谢 | 第71页 |