| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 肝细胞的体外培养和增殖 | 第10-12页 |
| ·原代肝细胞的分离和培养 | 第10-11页 |
| ·肝细胞的增殖与衰老 | 第11-12页 |
| 2 促进肝细胞体外增殖的策略 | 第12-19页 |
| ·培养基添加剂 | 第12-15页 |
| ·特殊的培养基质 | 第15页 |
| ·与其它细胞共培养 | 第15-16页 |
| ·转染外源基因 | 第16-19页 |
| 3 FoxA3 和 Hnf4α研究进展 | 第19-24页 |
| ·FoxA3 研究进展 | 第19-20页 |
| ·Hnf4α研究进展 | 第20-23页 |
| ·FoxA3 和 Hnf4α与细胞转分化 | 第23-24页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| ·研究目的 | 第24页 |
| ·研究意义 | 第24-26页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第26-46页 |
| 1 材料 | 第26-28页 |
| ·实验动物、细胞及质粒 | 第26页 |
| ·主要试剂与溶液的配置 | 第26-28页 |
| ·实验室仪器设备 | 第28页 |
| ·主要耗材 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-46页 |
| ·鼠尾胶原蛋白的制备 | 第28-29页 |
| ·原代大鼠肝细胞的分离和培养 | 第29-30页 |
| ·重组慢病毒载体构建 | 第30-35页 |
| ·HEK293T 细胞的复苏及培养 | 第35-36页 |
| ·慢病毒载体的病毒包装与侵染能力检测 | 第36-38页 |
| ·大鼠肝细胞的诱导及诱导细胞的培养 | 第38-39页 |
| ·增殖肝细胞的检测 | 第39-46页 |
| 第三部分 结果和讨论 | 第46-56页 |
| 1 鼠尾胶原蛋白的制备 | 第46页 |
| 2 原代大鼠肝细胞的分离和培养 | 第46-47页 |
| 3 重组慢病毒载体的构建和鉴定结果 | 第47页 |
| 4 重组慢病毒的制备结果 | 第47-48页 |
| 5 重组慢病毒侵染细胞能力检测 | 第48-49页 |
| 6 FoxA3 和 Hnf4α 病毒侵染大鼠肝细胞结果 | 第49页 |
| 7 增殖肝细胞外源基因及肝特异基因表达情况检测结果 | 第49-50页 |
| 8 PAS 染色结果 | 第50页 |
| 9 ICG 摄取和排泌结果 | 第50-51页 |
| 10 小结 | 第51页 |
| 11 讨论 | 第51-56页 |
| 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表论文 | 第72-73页 |