摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
目录 | 第9-11页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
·薯蓣皂甙元(Diosgenin)简介 | 第11-12页 |
·盾叶薯蓣简介 | 第12页 |
·盾叶薯蓣研究进展 | 第12-15页 |
·栽培技术 | 第12-13页 |
·繁殖技术 | 第13-14页 |
·盾叶薯蓣的遗传改良 | 第14-15页 |
·薯蓣皂甙元生物合成途径研究 | 第15-22页 |
·盾叶薯蓣皂素生物合成途径(MVA途径)关键酶研究 | 第16-18页 |
·MEP途径及关键酶研究 | 第18-21页 |
·植物MVA途径和MEP途径之间中间产物的交流 | 第21-22页 |
·本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
第二章 盾叶薯蓣DXR和MDS基因克隆及序列分析 | 第23-46页 |
·试验材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌株与载体 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·培养基 | 第23-24页 |
·溶液 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-32页 |
·盾叶薯蓣总RNA的提取 | 第24-25页 |
·mRNA的反转录 | 第25-26页 |
·dzDXR和dzMDS简并引物设计及合成 | 第26页 |
·盾叶薯蓣DXR和MDS基因cDNA核心片段的克隆和测序 | 第26-29页 |
·dzDXR和dzMDS基因特异引物(Gene-Specific Primer)的设计及合成 | 第29页 |
·快速扩增dzDXR和dzMDS基因的cDNA末端(RACE) | 第29-31页 |
·dzDXR和dzMDS生物信息学分析 | 第31-32页 |
·结果与分析 | 第32-44页 |
·盾叶薯蓣嫩叶总RNA的提取与检测 | 第32页 |
·DXR和MDS的cDNA核心片段的扩增 | 第32-33页 |
·DXR和MDS基因cDNA末端的扩增 | 第33-36页 |
·dzDXR和dzMDS生物信息学分析 | 第36-44页 |
·小结 | 第44-46页 |
第三章 盾叶薯蓣DXR基因和MDS基因在大肠杆菌的表达鉴定 | 第46-54页 |
·引言 | 第46页 |
·实验材料 | 第46-48页 |
·菌株与质粒 | 第46-48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要培养基 | 第48页 |
·工具酶 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-50页 |
·dzDXR和dzMDS编码序列的克隆 | 第48-49页 |
·目的基因原核表达载体pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS的构建 | 第49-50页 |
·pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS在大肠杆菌中的表达 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-53页 |
·dzDXR和dzMDS编码序列的克隆 | 第50-51页 |
·pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS原核表达载体的构建与验证 | 第51-52页 |
·pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS在大肠杆菌中的表达鉴定 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第四章 讨论与展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-65页 |
致谢 | 第65页 |