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盾叶薯蓣DXR基因和MDS基因的克隆与功能验证

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
目录第9-11页
第一章 绪论第11-23页
   ·薯蓣皂甙元(Diosgenin)简介第11-12页
   ·盾叶薯蓣简介第12页
   ·盾叶薯蓣研究进展第12-15页
     ·栽培技术第12-13页
     ·繁殖技术第13-14页
     ·盾叶薯蓣的遗传改良第14-15页
   ·薯蓣皂甙元生物合成途径研究第15-22页
     ·盾叶薯蓣皂素生物合成途径(MVA途径)关键酶研究第16-18页
     ·MEP途径及关键酶研究第18-21页
     ·植物MVA途径和MEP途径之间中间产物的交流第21-22页
   ·本研究的目的与意义第22-23页
第二章 盾叶薯蓣DXR和MDS基因克隆及序列分析第23-46页
   ·试验材料第23-24页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与载体第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器设备第23页
     ·培养基第23-24页
     ·溶液第24页
   ·实验方法第24-32页
     ·盾叶薯蓣总RNA的提取第24-25页
     ·mRNA的反转录第25-26页
     ·dzDXR和dzMDS简并引物设计及合成第26页
     ·盾叶薯蓣DXR和MDS基因cDNA核心片段的克隆和测序第26-29页
     ·dzDXR和dzMDS基因特异引物(Gene-Specific Primer)的设计及合成第29页
     ·快速扩增dzDXR和dzMDS基因的cDNA末端(RACE)第29-31页
     ·dzDXR和dzMDS生物信息学分析第31-32页
   ·结果与分析第32-44页
     ·盾叶薯蓣嫩叶总RNA的提取与检测第32页
     ·DXR和MDS的cDNA核心片段的扩增第32-33页
     ·DXR和MDS基因cDNA末端的扩增第33-36页
     ·dzDXR和dzMDS生物信息学分析第36-44页
   ·小结第44-46页
第三章 盾叶薯蓣DXR基因和MDS基因在大肠杆菌的表达鉴定第46-54页
   ·引言第46页
   ·实验材料第46-48页
     ·菌株与质粒第46-48页
     ·主要试剂第48页
     ·主要培养基第48页
     ·工具酶第48页
     ·主要仪器第48页
   ·实验方法第48-50页
     ·dzDXR和dzMDS编码序列的克隆第48-49页
     ·目的基因原核表达载体pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS的构建第49-50页
     ·pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS在大肠杆菌中的表达第50页
   ·结果与分析第50-53页
     ·dzDXR和dzMDS编码序列的克隆第50-51页
     ·pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS原核表达载体的构建与验证第51-52页
     ·pTrc-dzDXR和pTrc-dzMDS在大肠杆菌中的表达鉴定第52-53页
   ·小结第53-54页
第四章 讨论与展望第54-56页
参考文献第56-65页
致谢第65页

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