| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-16页 |
| ·嗜水气单胞菌研究进展 | 第11-12页 |
| ·病原菌在吞噬细胞内存活研究进展 | 第12-14页 |
| ·胞内存活体外模型的建立 | 第12-13页 |
| ·胞内存活的机制 | 第13-14页 |
| ·转座子与转座诱变机制 | 第14页 |
| ·转座子 | 第14页 |
| ·Mini-Tn10研究现状 | 第14页 |
| ·Mini-Tn10转座子的诱变机制 | 第14页 |
| ·本研究的内容和意义 | 第14-16页 |
| ·病原性嗜水气单胞菌体外感染模型的建立 | 第14-15页 |
| ·胞内存活能力明显下降的突变株的构建、筛选和鉴定 | 第15页 |
| ·胞内存活相关功能基因的克隆和分析 | 第15页 |
| ·胞内存活相关功能基因的生物学功能研究 | 第15页 |
| ·研究的意义 | 第15-16页 |
| 第2章 病原性嗜水气单胞菌体外感染数量模型的建立 | 第16-24页 |
| ·实验材料与方法 | 第16-18页 |
| ·实验用菌及其培养 | 第16页 |
| ·实验用鱼及吞噬细胞分离 | 第16-17页 |
| ·不同感染复数下胞内存活的测定 | 第17页 |
| ·不同感染时间下胞内存活的测定 | 第17页 |
| ·吞噬速率和杀菌速率的测定 | 第17页 |
| ·胞内存活的电镜观察 | 第17-18页 |
| ·数据处理 | 第18页 |
| ·结果与分析 | 第18-22页 |
| ·外周血吞噬细胞的分离 | 第18-19页 |
| ·电镜观察鳗鲡外周血白细胞对嗜水气单胞菌的吞噬 | 第19页 |
| ·不同感染复数下外周血白细胞吞噬的细菌数量及感染后细胞的存活率 | 第19-21页 |
| ·不同感染时间下外周血白细胞吞噬的细菌数量及感染后细胞的存活率 | 第21-22页 |
| ·鳗鲡外周血白细胞对细菌的吞噬速率和杀菌速率 | 第22页 |
| ·讨论 | 第22-24页 |
| 第3章 胞内存活缺陷突变株的构建、筛选和鉴定 | 第24-33页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·实验用菌和实验用鱼 | 第24页 |
| ·实验所需主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第25页 |
| ·实验方法与步骤 | 第25-29页 |
| ·突变文库的构建 | 第25-27页 |
| ·突变株的筛选 | 第27页 |
| ·突变株的鉴定 | 第27-29页 |
| ·实验结果和分析 | 第29-31页 |
| ·质粒pLOF/Km的提取及转化 | 第29页 |
| ·胞内存活能力缺陷突变株的筛选 | 第29-30页 |
| ·突变株的PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第4章 嗜水气单胞菌胞内存活相关基因的鉴定 | 第33-48页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验用菌和载体 | 第33页 |
| ·主要实验试剂和仪器 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-36页 |
| ·基因组DNA提取 | 第34页 |
| ·热不对称PCR克隆侧翼序列 | 第34-36页 |
| ·PCR产物的回收，连接，转化和测序 | 第36页 |
| ·序列分析 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-46页 |
| ·热不对称PCR结果 | 第36-38页 |
| ·基因序列结果和分析 | 第38-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第5章 嗜水气单胞菌胞内存活缺陷突变株的生物学特性研究 | 第48-54页 |
| ·实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验用菌和用鱼 | 第48页 |
| ·实验所需试剂和仪器 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·生长曲线的测定 | 第49页 |
| ·运动能力的测定 | 第49页 |
| ·体外粘附能力的测定 | 第49-50页 |
| ·实验结果 | 第50-52页 |
| ·生长曲线测定结果 | 第50页 |
| ·运动能力测定结果 | 第50-51页 |
| ·体外粘附能力测定结果 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第6章 总结和展望 | 第54-55页 |
| ·总结 | 第54页 |
| ·展望 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第63页 |
