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槐糖脂产生菌的筛选及槐糖脂抑菌和抗肿瘤作用的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
符号缩写说明第13-15页
第一章 前言第15-39页
   ·表面活性剂和生物表面活性剂概述第15-20页
     ·生物表面活性剂的主要特征第15-17页
       ·与化学法合成的表面活性剂相同的特性第15-16页
       ·微生物产生的生物表面活性剂的优点第16-17页
     ·微生物产生的表面活性剂种类及微生物来源第17-19页
     ·微生物产生的表面活性剂在工农业及医学上的应用第19-20页
   ·槐糖脂第20-33页
     ·槐糖脂的发现第20-21页
     ·产槐糖脂的微生物第21页
     ·槐糖脂的生理功能第21-22页
     ·槐糖脂的合成途径第22-26页
     ·槐糖脂的生产方法第26-28页
       ·微生物发酵法第26-27页
       ·酶催化法第27-28页
     ·槐糖脂的应用第28-33页
       ·在石油工业中的应用第28-29页
       ·在环境保护中的应用第29-31页
       ·在化妆品和洗涤剂中的应用第31-32页
       ·在医药中的应用第32-33页
   ·天然抗肿瘤药物的筛选第33-38页
     ·细胞凋亡与细胞坏死第34-35页
     ·诱导细胞凋亡的因素第35-36页
     ·细胞凋亡的机制第36-38页
       ·细胞凋亡的调控基因第36页
       ·细胞凋亡的主要信号传导通路第36-38页
     ·细胞凋亡与肿瘤的治疗第38页
   ·本论文研究的目的和意义第38-39页
第二章 槐糖脂产生菌的筛选、结构解析及菌种鉴定第39-56页
   ·材料和方法第39-44页
     ·仪器和试剂第39页
     ·样品第39-40页
     ·培养基第40页
     ·菌株分离第40页
     ·菌株初筛第40页
     ·菌株复筛和发酵产物分离鉴定第40-41页
     ·菌株的鉴定第41-44页
       ·酵母菌鉴定常规方法的内容第41-42页
       ·BIOLOG技术第42-44页
   ·结果与讨论第44-54页
     ·槐糖脂产生菌的筛选第44-53页
       ·排油活性和表面张力的测定第44-45页
       ·薄层层析分析第45-46页
       ·粗提样品的红外光谱分析第46-47页
       ·粗提样品的分离纯化与制备第47页
       ·化合物Ⅲ的核磁共振谱分析第47-52页
       ·化合物Ⅲ的质谱分析第52-53页
     ·菌株的鉴定第53-54页
       ·菌株Y_(2A)的形态和大小第53页
       ·BIOLOG技术鉴定结果第53-54页
   ·本章小结第54-56页
第三章 拟威克酵母产槐糖脂的培养基组成及发酵条件的研究第56-70页
   ·材料和方法第56-61页
     ·菌株第56页
     ·仪器和试剂第56页
     ·培养基第56-57页
       ·斜面及种子YEPD培养基第56-57页
       ·发酵基本培养基第57页
     ·培养方法第57页
       ·液体种子培养第57页
       ·摇瓶培养第57页
     ·检测方法第57-61页
       ·葡萄糖浓度的测定第57-59页
       ·槐糖脂含量的测定第59-61页
       ·菌体浓度的测定第61页
       ·pH值的测定第61页
   ·结果第61-68页
     ·产槐糖脂培养基的优化第61-66页
       ·葡萄糖初始浓度对槐糖脂产生的影响第61-62页
       ·不同碳源对槐糖脂产生的影响第62页
       ·不同氮源对槐糖脂产生的影响第62-63页
       ·酵母粉浓度对槐糖脂产生的影响第63-64页
       ·培养基组成正交实验第64-66页
     ·摇瓶发酵条件的优化第66-68页
       ·初始pH对槐糖脂产生的影响第66页
       ·接种量对槐糖脂产生的影响第66-68页
       ·发酵时间曲线第68页
   ·讨论第68-69页
   ·本章小结第69-70页
第四章 拟威克酵母发酵液的理化性质及其乳化活性第70-74页
   ·材料和方法第70-71页
     ·菌株第70页
     ·仪器和试剂第70页
     ·培养方法第70页
     ·表面张力测定第70-71页
   ·结果第71-73页
     ·发酵液临界胶束浓度的测定第71页
     ·不同因素对发酵液性能的影响第71-72页
       ·NaCl浓度对发酵液表面张力的影响第71-72页
       ·pH对发酵液表面张力的影响第72页
       ·温度对发酵液表面张力的影响第72页
     ·发酵液的乳化活性第72-73页
   ·讨论第73页
   ·本章小结第73-74页
第五章 槐糖脂药效学的初步研究第74-84页
   ·材料和方法第74-79页
     ·仪器和试剂第74页
     ·培养基第74页
     ·样品第74-75页
     ·抑菌试验菌株第75页
     ·抑菌圈直径的测定第75页
     ·抑菌率的测定第75页
     ·抗肿瘤活性研究所用器皿和仪器第75-76页
     ·细胞培养用培养基及试剂第76页
     ·培养基及培养用液的配制第76-78页
     ·抗肿瘤研究所用的肿瘤细胞株第78页
     ·细胞传代培养方法第78-79页
     ·样品的稀释第79页
     ·数据分析第79页
   ·结果与讨论第79-83页
     ·槐糖脂的抑菌作用第79-80页
       ·抑菌圈直径及抑菌率的测定第80页
       ·温度对内酯型双乙酰槐糖脂抑菌作用的影响第80页
     ·槐糖脂的抗肿瘤作用第80-83页
   ·本章小结第83-84页
第六章 槐糖脂诱导肝癌细胞H7402凋亡的研究第84-103页
   ·材料和方法第84-90页
     ·仪器和试剂第84-86页
     ·样品及样品的稀释第86页
     ·细胞株第86页
     ·细胞传代培养方法第86页
     ·细胞的爬片第86-87页
     ·阴性对照组和空白对照组的设立第87页
     ·MTT法分析细胞存活率第87页
     ·半数杀伤浓度IC50的计算第87页
     ·倒置相差显微镜观察样品作用后细胞形态的变化第87页
     ·Giemsa染色观察样品作用后细胞形态的变化第87页
     ·激光扫描共聚焦观察样品作用后细胞形态的变化第87-88页
     ·透射电镜观察样品作用后细胞核的变化第88页
     ·TUNEL检测细胞的凋亡第88-89页
     ·流式细胞技术检测细胞凋亡率及周期分布第89页
     ·Caspase-3活性分析第89页
     ·细胞内游离钙离子浓度检测第89-90页
     ·数据分析第90页
   ·结果第90-101页
     ·MTT法分析细胞存活率第90-91页
     ·倒置相差显微镜观察样品作用后细胞形态的变化第91-94页
     ·Giemsa染色观察样品作用后细胞形态的变化第94页
     ·吖啶橙染色观察样品作用后细胞形态的变化第94-95页
     ·透射电镜观察药物作用后细胞核的变化第95-96页
     ·TUNEL检测细胞的凋亡第96-97页
     ·流式细胞技术检测细胞凋亡率及周期分布第97-98页
     ·Caspase-3活性分析第98-99页
     ·细胞内游离钙离子浓度检测第99-101页
   ·讨论第101-102页
   ·本章小结第102-103页
全文总结与展望第103-105页
参考文献第105-117页
在读期间已发表和录用的论文第117-118页
致谢第118-119页
学位论文评阅及答辩情况表第119页

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