| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| ·选题的目的和意义 | 第13-15页 |
| ·选题的目的 | 第13-15页 |
| ·选题的意义 | 第15页 |
| ·国内外研究现状 | 第15-22页 |
| ·人参及其功能概述 | 第15-16页 |
| ·人参皂苷的研究现状 | 第16-22页 |
| ·研究内容及技术路线 | 第22-25页 |
| ·主要研究内容 | 第22-23页 |
| ·技术路线 | 第23-25页 |
| 第2章 人参发根的诱导和继代培养体系的建立 | 第25-35页 |
| ·引言 | 第25页 |
| ·试验材料及溶液配制 | 第25-28页 |
| ·试验材料和试剂 | 第25页 |
| ·试验试剂 | 第25-28页 |
| ·试验方法 | 第28-29页 |
| ·发根农杆菌 A4 的活化 | 第28页 |
| ·人参发根的诱导 | 第28页 |
| ·人参发根继代培养体系的优化 | 第28-29页 |
| ·结果和分析 | 第29-33页 |
| ·人参发根的诱导 | 第29页 |
| ·人参发根继代培养体系的优化 | 第29-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第3章 人参 LAS、DS 和 CAS 基因核心片段的克隆 | 第35-49页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·试验材料与试剂配制 | 第35-36页 |
| ·试验材料与试剂 | 第35页 |
| ·试验试剂配制 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-41页 |
| ·人参发根总 RNA 的提取及 cDNA 第一条链的合成 | 第36-39页 |
| ·人参发根 LAS 基因同源编码区核心片段的克隆 | 第39页 |
| ·人参发根 DS 基因同源编码区核心片段的克隆 | 第39-40页 |
| ·人参发根 CAS 基因同源编码区核心片段的克隆 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-47页 |
| ·人参发根总 RNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·人参发根 LAS 基因核心片段的克隆 | 第42-44页 |
| ·人参发根 DS 基因核心片段的克隆 | 第44-45页 |
| ·人参发根 CAS 基因核心片段的克隆 | 第45-47页 |
| ·讨论 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 第4章 人参关键酶基因 RNAI 元件的合成及干扰载体的构建 | 第49-73页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·试验材料及试剂配制 | 第49-51页 |
| ·试验材料 | 第49-50页 |
| ·试验配制 | 第50-51页 |
| ·试验方法 | 第51-61页 |
| ·人参发根 LAS 基因 RNA 干扰元件的构建 | 第51-54页 |
| ·人参发根 DS 基因 RNA 干扰元件的构建 | 第54-56页 |
| ·人参发根 CAS 基因 RNA 干扰元件的构建 | 第56-58页 |
| ·RNA 干扰载体的构建 | 第58-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·人参发根 LAS 基因 RNA 干扰元件的构建 | 第61-64页 |
| ·人参发根 DS 基因 RNA 干扰元件的构建 | 第64-66页 |
| ·人参发根 CAS 基因 RNA 干扰元件的构建 | 第66-68页 |
| ·构建 RNA 干扰载体及 Hind III-ClaⅠ双酶切鉴定 | 第68-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第5章 人参 RNAI 载体的遗传转化鉴定分析 | 第73-91页 |
| ·引言 | 第73页 |
| ·试验材料及试剂配制 | 第73-74页 |
| ·试验材料 | 第73页 |
| ·试剂配制 | 第73-74页 |
| ·试验方法 | 第74-81页 |
| ·菌种的活化 | 第74页 |
| ·感受态发根农杆菌 A4 制备 | 第74-75页 |
| ·重组质粒的发根农杆菌 A4 转化 | 第75页 |
| ·发根农杆菌 A4 阳性克隆的鉴定 | 第75-78页 |
| ·转化用发根农杆菌 A4 菌液的制备 | 第78页 |
| ·RNA 干扰的人参发根诱导 | 第78-79页 |
| ·转化后人参发根的 RT-PCR 鉴定分析 | 第79-81页 |
| ·结果与分析 | 第81-89页 |
| ·阳性 RNAi 表达载体工程菌的鉴定 | 第81-85页 |
| ·RNA 干扰人参发根体系的建立 | 第85-87页 |
| ·RNAi 转化人参发根的 RT-PCR 鉴定分析 | 第87-89页 |
| ·讨论 | 第89-90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 第6章 2,3-氧化角鲨烯代谢途径中关键酶的功能分析与表达调控鉴定 | 第91-121页 |
| ·引言 | 第91页 |
| ·试验材料及试剂 | 第91-92页 |
| ·试验材料 | 第91页 |
| ·试验试剂配制 | 第91-92页 |
| ·试验方法 | 第92-99页 |
| ·RNAi 人参发根生长的测定 | 第92页 |
| ·RNAi 人参发根总皂苷含量的检测 | 第92-93页 |
| ·RNAi 人参发根总甾醇含量的检测 | 第93-94页 |
| ·RNAi 人参发根单体皂苷(Rg1、Re、Rb1)的含量测定 | 第94-95页 |
| ·RNAi 人参发根中羊毛甾醇的含量测定 | 第95-96页 |
| ·RNAi 人参发根中达玛烯二醇的含量测定 | 第96-98页 |
| ·RNAi 人参发根中环阿乔醇的含量测定 | 第98-99页 |
| ·试验结果 | 第99-117页 |
| ·RNAi 对人参发根生长的影响 | 第99-100页 |
| ·RNAi 干扰对人参发根总皂苷含量的影响 | 第100-102页 |
| ·RNAi 对人参发根总甾醇含量的影响 | 第102-103页 |
| ·RNAi 对人参单体皂苷(Rg1、Re、Rb1)含量的影响 | 第103-109页 |
| ·RNA 干扰对人参发根中羊毛甾醇含量的影响 | 第109-111页 |
| ·RNA 干扰对人参发根中达玛烯二醇含量的影响 | 第111-114页 |
| ·RNA 干扰对人参发根中环阿乔醇含量的影响 | 第114-117页 |
| ·讨论 | 第117-118页 |
| ·小结 | 第118-121页 |
| 第7章 结论与展望 | 第121-125页 |
| ·结论 | 第121-122页 |
| ·创新点 | 第122页 |
| ·展望 | 第122-125页 |
| 参考文献 | 第125-136页 |
| 英文缩写 | 第136-137页 |
| 科研成果 | 第137-139页 |
| 致谢 | 第139页 |