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四吡咯光受体设计与色氨酸光受体动态结构研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
缩略词表第13-14页
1 序言第14-35页
   ·蓝细菌中的简单光受体第14-21页
     ·藻胆体第14-16页
     ·藻胆蛋白第16-20页
     ·核膜连接蛋白(L_(CM))第20-21页
     ·藻胆体中的能量传递第21页
   ·信号光受体第21-33页
     ·UV-B光受体第22-23页
     ·光-氧-电压(LOV)传感器第23-27页
     ·BLUF光受体第27-28页
     ·隐花色素第28-30页
     ·光敏色素第30-33页
   ·光受体的应用前景第33页
   ·本文研究目的与意义第33-35页
2 多发色团光合作用模拟系统的研究第35-93页
   ·引言第35-37页
   ·材料与方法第37-52页
     ·实验材料、试剂和仪器第37-40页
     ·实验方法第40-52页
   ·核膜连接蛋白溶解性优化第52-58页
     ·ApcE(1-240)蛋白序列分析第52-53页
     ·缺失体检测结果第53页
     ·重组蛋白产量的比较第53-55页
     ·重组蛋白的光谱特征第55-56页
     ·重组蛋白相关参数计算第56-58页
   ·融合质粒的DNA检测结果第58-59页
     ·pET-hp7∷apcE△的酶切检测结果第58页
     ·pET-apcE△∷hp的酶切检测结果第58-59页
     ·pET-hp7∷apcE△∷hp7的酶切检测结果第59页
   ·融合蛋白与藻胆色素的体内自催化重组表达第59-66页
     ·重组蛋白的SDS-PAGE和Zn电泳结果第59-60页
     ·改进纯化方法提高样品中色素蛋白比率第60-63页
     ·重组蛋白光谱分析第63-66页
   ·Heme、ZnMP、ZnBC与HP7结构域的结合第66-75页
     ·Heme与HP7结构域的结合第67-69页
     ·ZnMP与HP7结构域的结合第69-72页
     ·ZnBC与HP7结构域的结合第72-75页
     ·Heme、ZnMP、ZnBC不与ApcEA结构域结合第75页
   ·聚集状态分析第75-79页
     ·标准曲线的绘制第75-76页
     ·各种蛋白样品聚集状态分析第76-79页
   ·双色素融合蛋白分子内的能量传递第79-91页
     ·ZnMP与PCB间的能量传递第80-86页
     ·融合蛋白分子内PEB与ZnBC间的能量传递第86-89页
     ·能量传递效率分析第89-91页
   ·总结与讨论第91-93页
3 AtUVR8感光和信号传导机制研究第93-123页
   ·引言第93-94页
   ·材料与方法第94-102页
     ·实验材料、试剂和仪器第94-95页
     ·表达载体的构建第95-96页
     ·蛋白表达与纯化第96-97页
     ·结晶条件的筛选与优化第97-99页
     ·晶体衍射数据收集和处理第99-101页
     ·晶体结构数据处理第101页
     ·吸收光谱与荧光光谱测定第101-102页
     ·色氨酸荧光寿命的测定第102页
   ·结果分析与讨论第102-120页
     ·表达载体的DNA检测结果第102-103页
     ·AtUVR8蛋白表达纯化结果第103-104页
     ·蛋白结晶条件优化第104-106页
     ·AtUVR8静态结构分析第106-108页
     ·AtUVR8二聚体界面盐桥分析第108-110页
     ·AtUVR8中色氨酸结构分析第110-112页
     ·AtUVR8中色氨酸功能分析第112-117页
     ·AtUVR8动态结构分析第117-119页
     ·AtUVR8感光和信号传导机制第119-120页
   ·总结第120-123页
4 OsHAL3光化学和光信号的结构生物学研究第123-134页
   ·引言第123页
   ·材料与方法第123-126页
     ·实验材料、试剂和仪器第123-124页
     ·表达载体的构建第124-125页
     ·蛋白表达与纯化第125页
     ·结晶条件的筛选与优化第125页
     ·晶体衍射数据收集和处理第125页
     ·晶体结构解析和修正第125-126页
   ·结果分析与讨论第126-133页
     ·pET-hal3表达载体的DNA检测结果第126页
     ·OsHAL3蛋白表达纯化结果第126-127页
     ·蛋白结晶条件优化第127-128页
     ·衍射数据的收集及处理结果第128页
     ·OsHAL3晶体结构解析和修正结果第128-129页
     ·OsHAL3晶体结构分析第129-131页
     ·部分生理生化实验结果第131-132页
     ·OsHAL3光化学和光诱导信号机制第132-133页
   ·总结与讨论第133-134页
5 藻胆蛋白裂合酶CpcT及其复合物晶体结构的研究第134-144页
   ·引言第134-135页
   ·材料与方法第135-137页
     ·实验材料、试剂和仪器第135页
     ·硒代甲硫氨酸蛋白的制备第135-136页
     ·结晶条件的筛选与优化第136页
     ·晶体衍射数据收集和处理第136-137页
     ·晶体结构解析和修正第137页
   ·结果分析与讨论第137-143页
     ·CpcT硒代甲硫氨酸蛋白的表达纯化结果第137页
     ·蛋白结晶条件的筛选与优化第137-138页
     ·衍射数据的收集及处理结果第138页
     ·晶体结构解析和修正结果第138-139页
     ·CpcT蛋白晶体结构分析第139-141页
     ·CpcT-PCB复合体晶体结构分析第141-143页
   ·总结第143-144页
6 论文总结第144-147页
   ·论文总结第144-146页
     ·多发色团光合作用模拟系统部分论文总结第144-145页
     ·AtUVR8部分论文总结第145页
     ·论文中其他工作总结第145-146页
   ·结语第146-147页
参考文献第147-169页
附录1 攻读学位期间发表的学术论文第169-170页
会议论文和摘要第170-171页
致谢第171页

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