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济南地区鸭源新城疫病毒的分离鉴定及F基因变异分析

符号说明第1-9页
中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
1 前言第13-33页
   ·鸭新城疫病毒的概述第14-23页
     ·病毒的分类、大小与形态特征第14页
     ·理化特性第14-15页
     ·培养特性第15-16页
     ·流行病学第16-18页
     ·临床症状及病理变化第18-19页
     ·病毒的致病机理第19页
     ·实验室诊断第19-23页
       ·血凝抑制(HI)试验第19-20页
       ·RT-PCR 技术第20-21页
       ·REAL-TIME PCR第21页
       ·酶联免疫吸附试验(ELISA)第21-22页
       ·琼脂扩散试验(AGP)第22页
       ·荧光抗体技术(IF)第22页
       ·核酸探针检测技术第22-23页
       ·单克隆抗体技术第23页
   ·NDV 的基因组与 F 蛋白的结构和功能第23-26页
     ·NDV 的基因组第23-24页
     ·F 蛋白的结构和功能第24-26页
   ·NDV 的毒力与致病性第26页
   ·鸭 NDV 的防制第26-31页
     ·鸭新城疫的预防第27-30页
       ·加强饲养管理和卫生消毒工作第27页
       ·做好疫苗免疫第27-30页
     ·鸭新城疫的治疗第30-31页
   ·本研究的目的和意义第31-33页
2 材料与方法第33-43页
   ·材料第33-34页
     ·病料与试验动物第33页
     ·主要仪器与试剂第33-34页
     ·引物设计第34页
   ·方法第34-43页
     ·病毒的分离传代第34-35页
     ·血凝性试验(HA)和血凝抑制(HI)试验第35-36页
       ·红细胞悬液的制备第35页
       ·HA 试验第35页
       ·四单位病毒的制备第35页
       ·HI 试验第35-36页
     ·鸡胚半数感染量(EID50)的测定第36页
     ·鸡胚平均致死时间(MDT)的测定第36页
     ·1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)的测定第36-37页
     ·动物致病性试验第37页
     ·RT-PCR 扩增 F 基因及序列分析第37-43页
       ·病毒总 RNA 的提取第37-38页
       ·RT-PCR 反应第38-39页
       ·琼脂糖凝胶电泳第39页
       ·PCR 产物的纯化回收第39-40页
       ·PCR 纯化回收产物与 PMD 18-T 载体的连接反应第40页
       ·DH5Α感受态细胞的制备第40页
       ·转化反应第40-41页
       ·质粒 DNA 的制备第41-42页
       ·阳性重组质粒的酶切鉴定第42页
       ·序列测定及分析第42-43页
3 结果与分析第43-47页
   ·病毒的分离与鉴定第43页
   ·ELD50、MDT 及 ICPI 的测定结果第43-44页
   ·致病性试验第44页
   ·F 基因 RT-PCR 扩增第44页
   ·重组质粒的酶切鉴定结果第44-45页
   ·测序结果及序列分析第45-47页
4 讨论第47-50页
5 结论第50-51页
6 创新点第51-52页
参考文献第52-61页
致谢第61-62页
攻读专业学位期间发表的文章第62页

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