| 英文缩略词表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-23页 |
| 第一部分 8-oxodG与8-oxoG的LC-MS/MS检测体系的建立、SAMR1/SAMP8小鼠DNA和RNA氧化标志物的比对研究 | 第23-43页 |
| 前言 | 第23页 |
| 一、材料与方法 | 第23-33页 |
| 1. 材料 | 第23-25页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·动物 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| 2. 方法 | 第25-33页 |
| ·标本采集 | 第25页 |
| ·DNA中8-oxodG/dG的质谱检测 | 第25-28页 |
| ·RNA中8-oxoG/G的质谱检测 | 第28-30页 |
| ·血浆8-oxodG与8-oxoG的质谱检测 | 第30-31页 |
| ·尿液8-oxodG和8-oxoG的质谱检测 | 第31-32页 |
| ·尿液肌酐浓度的检测 | 第32-33页 |
| 二、结果 | 第33-40页 |
| 1. DNA浓度和纯度的鉴定 | 第33页 |
| 2. RNA浓度和纯度的鉴定 | 第33-34页 |
| 3. 各脏器DNA氧化水平的增龄性变化 | 第34-36页 |
| 4. 各脏器RNA氧化水平的增龄性变化 | 第36-37页 |
| 5. 血浆氧化核苷含量的增龄性变化 | 第37-38页 |
| 6. 尿液氧化核苷含量的增龄性变化 | 第38-40页 |
| 三、讨论 | 第40-41页 |
| 四、结论 | 第41-43页 |
| 第二部分 RNA氧化对β淀粉样蛋白(Ap)产生的影响 | 第43-92页 |
| 前言 | 第43-45页 |
| 一、材料与方法 | 第45-72页 |
| 1. 材料 | 第46-49页 |
| ·细胞株 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46-47页 |
| ·仪器 | 第47-48页 |
| ·引物 | 第48页 |
| ·常用试剂的配制 | 第48-49页 |
| 2. 方法 | 第49-72页 |
| ·APP695野生型(wt)以及瑞典突变(sw)高表达细胞株的构建 | 第49-65页 |
| ·pcDNA3.1_APP wt和sw质粒的构建 | 第49-59页 |
| ·转染APP wt和sw至CHO、PC12、HeLa细胞 | 第59-61页 |
| ·Western blot检测转染细胞中APP的表达量 | 第61-64页 |
| ·高表达APP细胞培养基中Aβ1-x、Aβ40和Aβ42的检测 | 第64-65页 |
| ·CHO_APP_iMTH1细胞株的构建 | 第65-68页 |
| ·针对CHO细胞MTH1基因最佳siRNA的筛选 | 第65-67页 |
| ·shMTH1慢病毒载体的构建 | 第67-68页 |
| ·shMTH1慢病毒侵染CHO_APP细胞,筛选CHO_APP_iMTHl单克隆 | 第68页 |
| ·RNA氧化对CHO_APP_iMTH1细胞产生Aβ的影响 | 第68-72页 |
| ·8-oxoGTP加压试验 | 第68-69页 |
| ·细胞加压后RNA氧化水平检测 | 第69页 |
| ·RNA氧化对APP蛋白表达的影响 | 第69页 |
| ·RNA氧化对Aβ1-x、Aβ40、Aβ42表达量的影响 | 第69页 |
| ·RNA氧化增加后Aβ指纹图谱的IP-MALDI-TOF检测 | 第69-72页 |
| ·RNA氧化增加后Aβ指纹图谱的LC-Q-TOF检测 | 第72页 |
| 二、结果 | 第72-88页 |
| 1. pcDNA3.1_APP wt和sw表达载体的构建 | 第72-73页 |
| ·APP wt和sw全长cDNA的PCR扩增 | 第72页 |
| ·pcDNA3.1_APP转化大肠杆菌后筛选阳性克隆 | 第72-73页 |
| ·APP_wt以及sw阳性克隆的测序验证 | 第73页 |
| 2. pcDNA3.1_APP转染条件的优化以及转染后单克隆的筛选 | 第73-79页 |
| ·APP转染条件的优化 | 第73-74页 |
| ·APP高表达细胞株单克隆的筛选 | 第74-75页 |
| ·APP高表达细胞株培养基中Aβ40和Aβ42的检测 | 第75-76页 |
| ·CHO_APP_iMTH1细胞株的构建 | 第76-79页 |
| ·CHO细胞最合适siRNA的筛选 | 第76-78页 |
| ·shMTH1慢病毒侵染CHO_APP细胞 | 第78-79页 |
| 3. 8-oxoGTP加压条件的优化 | 第79页 |
| 4. 加压后RNA氧化水平的检测 | 第79-80页 |
| 5. RNA氧化增加对APP蛋白表达的影响 | 第80页 |
| 6. ELISA检测RNA氧化增加对培养基中Aβ浓度的影响 | 第80-81页 |
| 7. RNA氧化增加对Aβ种类和量的影响 | 第81-88页 |
| 三、讨论 | 第88-91页 |
| 四、结论 | 第91-92页 |
| 第三部分 RNA氧化对SAM鼠学习记忆能力的影响 | 第92-106页 |
| 前言 | 第92页 |
| 一、材料与方法 | 第92-97页 |
| 1. 材料 | 第92-93页 |
| ·主要试剂 | 第92页 |
| ·仪器和耗材 | 第92-93页 |
| ·动物 | 第93页 |
| 2. 方法 | 第93-97页 |
| ·侧脑室注射 | 第93-94页 |
| ·尾静脉注射 | 第94页 |
| ·纳米粒包裹8-oxoGTP：用于侧脑室注射 | 第94页 |
| ·纳米粒包裹8-oxoGTP：用于尾静脉注射 | 第94页 |
| ·8-oxoGTP注射后大脑RNA氧化水平的检测 | 第94页 |
| ·8-oxoGTP注射后尿液代谢物8-oxoG浓度的检测 | 第94-95页 |
| ·最佳实验条件 | 第95页 |
| ·SAM鼠行为学的检测 | 第95-97页 |
| ·Morris水迷宫 | 第95-96页 |
| ·新物体识别实验 | 第96页 |
| ·旷场实验 | 第96-97页 |
| ·平衡杆实验 | 第97页 |
| 二、结果 | 第97-104页 |
| 1. 侧脑室注射位置准确性的确定 | 第97页 |
| 2. 注射纳米粒包裹的8-oxoGTP后小鼠大脑RNA氧化检测 | 第97-98页 |
| ·侧脑室注射纳米粒包裹的8-oxoGTP后小鼠大脑RNA氧化水平检测 | 第97-98页 |
| ·尾静脉注射纳米粒包裹的8-oxoGTP后小鼠大脑RNA氧化水平检测 | 第98页 |
| 3. 注射纳米粒包裹8-oxoGTP后小鼠尿液8-oxoG的代谢动力学 | 第98-99页 |
| ·侧脑室注射纳米粒包裹8-oxoGTP后小鼠尿液8-oxoG的代谢动力学 | 第98-99页 |
| ·尾静脉注射纳米粒包裹8-oxoGTP后小鼠尿液8-oxoG的代谢动力学 | 第99页 |
| 4. RNA氧化增加对SAM鼠行为学的影响 | 第99-104页 |
| ·旷场实验结果 | 第99-101页 |
| ·平衡杆实验结果 | 第101页 |
| ·新物体识别实验结果 | 第101-102页 |
| ·Morris水迷宫实验结果 | 第102-104页 |
| 三、讨论 | 第104-105页 |
| 四、结论 | 第105-106页 |
| 参考文献 | 第106-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 文献综述I | 第112-118页 |
| 参考文献 | 第115-118页 |
| 文献综述II | 第118-124页 |
| 参考文献 | 第121-124页 |
| 附录 | 第124-133页 |
| Ⅱ. 已发表文章和申请专利 | 第124页 |
| Ⅲ. 参加学术会议 | 第124-125页 |
| Ⅳ. 已发表文章和会议摘要首页 | 第125-132页 |
| Ⅴ. 个人简历 | 第132-133页 |
