摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-19页 |
·植物液泡加工酶(VPE)研究进展 | 第13-14页 |
·植物 metacaspase 研究进展 | 第14-16页 |
·假单性结实型葡萄无核机理研究进展 | 第16-17页 |
·本研究的目的意义 | 第17-19页 |
第二章 葡萄βVPE 基因的克隆与序列分析 | 第19-25页 |
·材料与方法 | 第19-20页 |
·试验材料 | 第19页 |
·试验方法 | 第19-20页 |
·结果与分析 | 第20-22页 |
·黑比诺葡萄βVPE 基因克隆、染色体定位及基因结构分析 | 第20页 |
·黑比诺葡萄βVPE 基因多序列比对与进化树分析 | 第20-22页 |
·不同葡萄品种中的βVPE 基因的克隆与序列分析 | 第22页 |
·讨论 | 第22-25页 |
第三章 葡萄 VvβVPE 基因的原核表达、纯化与多克隆抗体制备 | 第25-33页 |
·材料与方法 | 第25-27页 |
·试验材料 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-27页 |
·结果与分析 | 第27-32页 |
·RT-PCR 扩增获得 VvβVPE 基因开放阅读框 | 第27-28页 |
·葡萄胚发育相关基因 VvβVPE 原核表达载体的构建 | 第28页 |
·GST- VvβVPE 融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第28-29页 |
·GST- VvβVPE 融合蛋白表达形式的确定及其表达条件的优化 | 第29-30页 |
·GST- VvβVPE 融合蛋白的纯化 | 第30-31页 |
·GST- VvβVPE 多克隆抗血清的 western blot 检测 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
第四章 葡萄βVPE 基因的表达分析 | 第33-42页 |
·材料与方法 | 第33-34页 |
·试验材料 | 第33页 |
·试验方法 | 第33-34页 |
·结果与分析 | 第34-40页 |
·葡萄βVPE 基因在不同葡萄种类中的组织特异性表达分析 | 第34页 |
·葡萄βVPE 基因在不同品种胚珠各个生长发育阶段的 qPCR 表达分析 | 第34-35页 |
·不同品种葡萄βVPE 基因在胚珠不同发育阶段蛋白水平的表达分析 | 第35-38页 |
·葡萄βVPE 基因在不同品种盛花后 30d,60d 胚珠中的表达分析 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
第五章 葡萄胚珠特异表达βVPE 基因的功能验证 | 第42-49页 |
·材料与方法 | 第42-43页 |
·试验材料 | 第42页 |
·试验方法 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-48页 |
·PCR 获得βVPE 基因的开放阅读框(ORF)序列 | 第43-44页 |
·葡萄βVPE 基因植物表达载体的构建及转化 GV3101 菌液 PCR 鉴定 | 第44-45页 |
·葡萄βVPE 转基因拟南芥 T3 代的 PCR 检测 | 第45页 |
·葡萄βVPE 转基因拟南芥 T3 代种子总蛋白、粗酶液 SDS-PAGE 表型鉴定及其 western bolt 分析 | 第45-46页 |
·葡萄βVPE 转基因拟南芥种子的 VPE 酶活性分析 | 第46-47页 |
·葡萄βVPE 转基因拟南芥种子发芽速度的差异分析 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
第六章 Metacaspase 基因家族在葡萄中的克隆及分析 | 第49-62页 |
·材料与方法 | 第49-50页 |
·试验材料 | 第49-50页 |
·试验方法 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-60页 |
·黑比诺葡萄 metacaspase 家族成员的分离与鉴定 | 第50-51页 |
·黑比诺葡萄 metacaspase 基因家族在染色体的定位与基因结构分析 | 第51-53页 |
·黑比诺葡萄 metacaspase 多序列比对及系统发育树分析 | 第53-55页 |
·黑比诺葡萄 metacaspase 家族基因启动子序列的顺式作用元件分析 | 第55-57页 |
·葡萄 metacaspase 家族基因的 QRT-PCR 表达分析 | 第57-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
第七章 结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |