| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1 斑点叉尾鮰病毒的基本特性及斑点叉尾鮰病毒性疾病的特点 | 第11-12页 |
| 2 鱼类核酸疫苗研究进展 | 第12-21页 |
| ·疫苗种类 | 第12-15页 |
| ·死疫苗 | 第12页 |
| ·活疫苗 | 第12-13页 |
| ·亚单位疫苗 | 第13页 |
| ·基因工程疫苗 | 第13-14页 |
| ·DNA疫苗 | 第14-15页 |
| ·鱼类DNA疫苗的接种方式 | 第15-16页 |
| ·注射免疫 | 第15页 |
| ·口服免疫 | 第15页 |
| ·浸泡免疫 | 第15-16页 |
| ·鱼类疫苗免疫效果评价 | 第16-20页 |
| ·鱼类的免疫基础 | 第16页 |
| ·鱼类的免疫器官 | 第16-17页 |
| ·鱼类的免疫细胞 | 第17-18页 |
| ·鱼类的体液免疫因子 | 第18页 |
| ·特异性免疫水平的检测 | 第18-19页 |
| ·非特异性免疫水平的检测 | 第19-20页 |
| ·免疫保护率(RPS)和免疫保护指数(PI) | 第20页 |
| ·鱼用疫苗的研究概况 | 第20-21页 |
| 3 鱼用疫苗发展存在的问题及其前景 | 第21-22页 |
| ·鱼用疫苗的免疫效果 | 第21页 |
| ·有效的接种方式 | 第21-22页 |
| ·鱼用疫苗发展的前景 | 第22页 |
| 4 "自杀性"DNA疫苗国内外研究进展现状 | 第22-25页 |
| 5 目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 斑点叉尾鮰病毒(CCV)"自杀性"DNA疫苗表达质粒的构建及体外表达检测 | 第26-39页 |
| 1 材料和方法 | 第26-34页 |
| ·实验材料 | 第26-29页 |
| ·菌株和细胞 | 第26页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第26页 |
| ·质粒与载体 | 第26-27页 |
| ·主要药品及试剂 | 第27-28页 |
| ·主要培养基、抗生素及溶液配制 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·主要耗材 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-34页 |
| ·CCV ORF6的扩增 | 第29页 |
| ·PCR产物的检测与回收 | 第29-30页 |
| ·CCV ORF6与质粒的酶切、回收 | 第30-31页 |
| ·载体去磷酸化 | 第31页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·挑菌鉴定 | 第31-33页 |
| ·质粒的大量提取(无内毒素质粒大提试剂盒) | 第33-34页 |
| ·脂质体介导转化法(Lipfectin2000,Invitrogen Corp.) | 第34页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA)检测目的蛋白在细胞中表达 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-38页 |
| ·CCV ORF6的扩增 | 第34-35页 |
| ·菌体PCR鉴定重组质粒 | 第35-36页 |
| ·ps-ORF6构建的进一步鉴定 | 第36页 |
| ·测序 | 第36-37页 |
| ·间接免疫荧光检测重组质粒真核细胞中的表达 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 第三章 斑点叉尾鮰病毒(CCV)"自杀性"DNA疫苗免疫效果研究 | 第39-52页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·试验材料与主要仪器 | 第39页 |
| ·疫苗与斑点叉尾鮰病毒(CCV) | 第39页 |
| ·实验鱼 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器 | 第39页 |
| ·斑点叉尾鮰疫苗的安全性检验 | 第39页 |
| ·免疫方案 | 第39-40页 |
| ·分组 | 第39-40页 |
| ·免疫和采血 | 第40页 |
| ·免疫指标的测定 | 第40-42页 |
| ·血液白细胞吞噬活性的测定 | 第40-41页 |
| ·血清溶菌酶含量的测定 | 第41-42页 |
| ·血清总蛋白含量的测定 | 第42页 |
| ·抗血清中和效价测定 | 第42-43页 |
| ·统计学分析 | 第43页 |
| 2 实验结果与分析 | 第43-48页 |
| ·白细胞吞噬活性测定 | 第43-44页 |
| ·血清溶菌酶含量测定 | 第44-45页 |
| ·血清蛋白含量测定 | 第45-46页 |
| ·抗血清中和效价测定 | 第46-48页 |
| ·试验鱼生长状况 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| ·斑点叉尾鮰病毒(CCV)"自杀性"DNA疫苗对斑点叉尾鮰白细胞吞噬活性的影响 | 第48-49页 |
| ·斑点叉尾鮰病毒(CCV)"自杀性"DNA疫苗对斑点叉尾鮰血清溶菌酶含量的影响 | 第49-50页 |
| ·斑点叉尾鮰病毒(CCV)"自杀性"DNA疫苗对斑点叉尾鮰血清蛋白含量的影响 | 第50-51页 |
| ·斑点叉尾鮰病毒(CCV)"自杀性"DNA疫苗对斑点叉尾鮰生长的影响 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历 | 第62页 |
