中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
目录 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-18页 |
·鸡球虫病概述 | 第10-11页 |
·鸡球虫的分类 | 第10-11页 |
·鸡球虫的发育 | 第11页 |
·鸡球虫病的病理变化 | 第11页 |
·国内外球虫病研究现状及发展动向 | 第11-13页 |
·国外关于鸡球虫病的研究现状 | 第11-12页 |
·球虫病抗性指标的QTL定位及有关抗性基因的研究 | 第12-13页 |
·斑联蛋白基因概述 | 第13-15页 |
·RNAi研究现状 | 第15-16页 |
·RNAi的发现 | 第15页 |
·RNAi的作用机制 | 第15-16页 |
·RNAi的特征 | 第16页 |
·RNAi在探索基因功能中的应用 | 第16页 |
·组织块培养概述 | 第16-17页 |
·论文研究的目的意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-27页 |
·zyxin基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达 | 第18-20页 |
·试验所用的仪器和试剂 | 第18页 |
·试验方法 | 第18-20页 |
·引物设计 | 第18页 |
·用PCR方法得到zyxin基因的序列片段 | 第18-19页 |
·真核表达载体Pex-6-zyxin的构建 | 第19页 |
·连接产物感受态大肠杆菌的转染及鉴定 | 第19页 |
·重组质粒测序验证及大量抽提 | 第19-20页 |
·Pex-6-zyxin真核表达载体293T细胞的转染及real time PCR方法表达量的检测 | 第20页 |
·zyxin基因慢病毒干扰载体的构建及有效干扰靶点的筛选 | 第20-25页 |
·试验所用的仪器和试剂 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-25页 |
·zyxin基因干扰片段的设计与合成 | 第21-22页 |
·zyxin基因Lv3-shDNA模板的退火 | 第22页 |
·zyxin基因Lv3载体的线性化 | 第22-23页 |
·Lv3-shRNA载体的构建并转化到感受态大肠杆菌中 | 第23页 |
·zyxin基因病毒的包装和滴度测定 | 第23-24页 |
·Pex-6-zyxin过表达293T细胞后的有效干扰片段的慢病毒筛选 | 第24-25页 |
·鸡盲肠的组织块培养及zyxin基因mRNA水平表达检测 | 第25-27页 |
·试验所用的仪器和试剂 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-27页 |
3 结果 | 第27-49页 |
·zyxin基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达 | 第27-31页 |
·PCR法扩增zyxin基因 | 第27页 |
·重组质粒Pex-6-zyxin双酶切鉴定 | 第27-29页 |
·细胞转染结果 | 第29-30页 |
·zyxin基因在293T细胞中表达量检测结果 | 第30-31页 |
·zyxin基因慢病毒干扰载体的构建及有效干扰靶点的筛选 | 第31-45页 |
·Lv3载体酶切结果 | 第31-32页 |
·Lv3-shRNA重组质粒以及其单酶切电泳结果 | 第32-34页 |
·慢病毒滴度检测结果 | 第34-36页 |
·慢病毒感染及真核表达载体转染的效果 | 第36-43页 |
·real time PCR有效靶点筛选 | 第43-44页 |
·Western blot过表达效果的检测结果 | 第44-45页 |
·盲肠组织块培养及Real time-PCR结果 | 第45-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
·zyxin基因真核表达载体的构建及其与球虫病抗性研究之间的关系 | 第49-50页 |
·zyxin基因慢病毒干扰载体的构建对研究zyxin基因功能必要性的探讨 | 第50-51页 |
·鸡盲肠组织块培养与zyxin基因在鸡盲肠细胞中的表达 | 第51-53页 |
5 全文总结 | 第53-54页 |
6 存在的问题及今后尚需进一步完善的研究工作 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
研究生学习期间发表的论文(著) | 第60-61页 |