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鸡斑联蛋白基因真核表达和慢病毒干扰载体的构建及鸡盲肠组织块培养的研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
目录第8-10页
1 文献综述第10-18页
   ·鸡球虫病概述第10-11页
     ·鸡球虫的分类第10-11页
     ·鸡球虫的发育第11页
     ·鸡球虫病的病理变化第11页
   ·国内外球虫病研究现状及发展动向第11-13页
     ·国外关于鸡球虫病的研究现状第11-12页
     ·球虫病抗性指标的QTL定位及有关抗性基因的研究第12-13页
   ·斑联蛋白基因概述第13-15页
   ·RNAi研究现状第15-16页
     ·RNAi的发现第15页
     ·RNAi的作用机制第15-16页
     ·RNAi的特征第16页
     ·RNAi在探索基因功能中的应用第16页
   ·组织块培养概述第16-17页
   ·论文研究的目的意义第17-18页
2 材料与方法第18-27页
   ·zyxin基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达第18-20页
     ·试验所用的仪器和试剂第18页
     ·试验方法第18-20页
       ·引物设计第18页
       ·用PCR方法得到zyxin基因的序列片段第18-19页
       ·真核表达载体Pex-6-zyxin的构建第19页
       ·连接产物感受态大肠杆菌的转染及鉴定第19页
       ·重组质粒测序验证及大量抽提第19-20页
       ·Pex-6-zyxin真核表达载体293T细胞的转染及real time PCR方法表达量的检测第20页
   ·zyxin基因慢病毒干扰载体的构建及有效干扰靶点的筛选第20-25页
     ·试验所用的仪器和试剂第20-21页
     ·试验方法第21-25页
       ·zyxin基因干扰片段的设计与合成第21-22页
       ·zyxin基因Lv3-shDNA模板的退火第22页
       ·zyxin基因Lv3载体的线性化第22-23页
       ·Lv3-shRNA载体的构建并转化到感受态大肠杆菌中第23页
       ·zyxin基因病毒的包装和滴度测定第23-24页
       ·Pex-6-zyxin过表达293T细胞后的有效干扰片段的慢病毒筛选第24-25页
   ·鸡盲肠的组织块培养及zyxin基因mRNA水平表达检测第25-27页
     ·试验所用的仪器和试剂第25页
     ·试验方法第25-27页
3 结果第27-49页
   ·zyxin基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达第27-31页
     ·PCR法扩增zyxin基因第27页
     ·重组质粒Pex-6-zyxin双酶切鉴定第27-29页
     ·细胞转染结果第29-30页
     ·zyxin基因在293T细胞中表达量检测结果第30-31页
   ·zyxin基因慢病毒干扰载体的构建及有效干扰靶点的筛选第31-45页
     ·Lv3载体酶切结果第31-32页
     ·Lv3-shRNA重组质粒以及其单酶切电泳结果第32-34页
     ·慢病毒滴度检测结果第34-36页
     ·慢病毒感染及真核表达载体转染的效果第36-43页
     ·real time PCR有效靶点筛选第43-44页
     ·Western blot过表达效果的检测结果第44-45页
   ·盲肠组织块培养及Real time-PCR结果第45-49页
4 讨论第49-53页
   ·zyxin基因真核表达载体的构建及其与球虫病抗性研究之间的关系第49-50页
   ·zyxin基因慢病毒干扰载体的构建对研究zyxin基因功能必要性的探讨第50-51页
   ·鸡盲肠组织块培养与zyxin基因在鸡盲肠细胞中的表达第51-53页
5 全文总结第53-54页
6 存在的问题及今后尚需进一步完善的研究工作第54-55页
参考文献第55-59页
致谢第59-60页
研究生学习期间发表的论文(著)第60-61页

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