| 摘要 | 第1-9页 |
| 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 干扰素的研究进展 | 第9-13页 |
| ·干扰素的产生和分类 | 第9页 |
| ·IFN-α的分子结构 | 第9-10页 |
| ·IFN-α的生物学活性 | 第10-11页 |
| ·抗病毒活性 | 第10页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第10-11页 |
| ·免疫调节作用 | 第11页 |
| ·免疫佐剂作用 | 第11页 |
| ·IFN-α分子作用机制 | 第11-12页 |
| ·干扰素的应用 | 第12-13页 |
| ·IFN-α人医临床上的应用 | 第12-13页 |
| ·IFN-α兽医临床上的应用 | 第13页 |
| 2 免疫佐剂研究进展 | 第13-17页 |
| ·CpGDNA序列 | 第14页 |
| ·协同刺激分子佐剂 | 第14-15页 |
| ·细胞因子佐剂 | 第15页 |
| ·影响佐剂效果的因素 | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 实验一 pcDNA3.1(+)-(^/F7V-a 的构建 | 第18-37页 |
| 1 材料 | 第18-21页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要试剂的配制 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-28页 |
| ·提取鸡脾脏组织总RNA | 第21页 |
| ·反转录 | 第21-22页 |
| ·PCR扩增鸡IFN-α基因 | 第22-23页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第23-24页 |
| ·PCR产物电泳切胶 | 第23页 |
| ·DNA目的条带的回收 | 第23-24页 |
| ·ChIFN-α与克隆载体pMD-19T的连接 | 第24-25页 |
| ·ChIFN-α与克隆载体pMD-19T的连接 | 第24页 |
| ·pMD19-T-ChIFN-α的转化 | 第24-25页 |
| ·重组质粒pMD19-T-ChIFN-α的小量制备 | 第25页 |
| ·pMD19-T-ChIFN-α质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·pMD19-T-ChIFN-α质粒PCR鉴定 | 第26页 |
| ·pMD19-T-ChIFN-α质粒双酶切鉴定 | 第26页 |
| ·pMD19-T-ChIFN-α的序列测定 | 第26页 |
| ·真核质粒pcDNA3.1(+)-ChIFN-α的构建 | 第26-28页 |
| ·表达载体pcDNA3.1(+)和重组质粒pMD19-T-ChIFN-α的双酶切 | 第26-27页 |
| ·表达载体pcDNA3.1(+)与目的片段ChIFN-α的连接 | 第27页 |
| ·连接产物pcDNA3.1(+)-ChIFN-α的转化 | 第27页 |
| ·重组表达质粒pcDNA3.1(+)-ChIFN-α的鉴定 | 第27-28页 |
| ·SDS碱裂解法大量制备质粒pcDNA3.1(+)-ChIFN-α | 第28页 |
| ·聚乙二醇沉淀法纯化粗制质粒pcDNA3.1(+)-ChIFN-α | 第28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-35页 |
| ·pMD19-T-ChIFN-α的构建 | 第28-32页 |
| ·鸡脾脏总RNA的提取与检测结果 | 第28-29页 |
| ·PCR产物ChIFN-α的电泳图谱 | 第29页 |
| ·纯化回收PCR产物的电泳检测 | 第29-30页 |
| ·重组质粒pMD19-T-ChIFN-α的鉴定 | 第30-32页 |
| ·重组质粒pMD19-T-ChIFN-α的序列测定 | 第32页 |
| ·重组表达质粒pcDNA3.1(+)-ChIFN-α的鉴定 | 第32-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 实验二 pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对鸡免疫功能的影响 | 第37-49页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·主要试剂的配置 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-40页 |
| ·动物分组与处理 | 第38-39页 |
| ·鸡活性T、B淋巴细胞的百分率测定 | 第39页 |
| ·鸡新城疫抗体的测定-血凝抑制试验 | 第39-40页 |
| ·法氏囊琼脂免疫扩散试验 | 第40页 |
| ·鸡肾型传染性支气管炎抗体的检测 | 第40页 |
| ·免疫器官指数测定 | 第40页 |
| ·IBV感染鸡后病理学剖检观察及免疫保护率测定 | 第40页 |
| ·数据统计与处理 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-47页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对正常鸡外周血液中活性T、B淋巴细胞百分率的影响 | 第40-43页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对正鸡外周血液中活性T淋巴细胞百分率的影响 | 第40-42页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对正常鸡外周血液中活性B淋巴细胞百分率的影响 | 第42-43页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对ND-HI抗体效价的影响 | 第43-44页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对IBD抗体效价的影响 | 第44-45页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对IBV抗体浓度的动态变化 | 第45-46页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对鸡免疫器官指数的影响 | 第46-47页 |
| ·pcDNA3.1(+)-ChIFN-α对攻强毒NIBV(IBV-gray强毒株)雏鸡影响 | 第47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| Abstract | 第53-55页 |
| 附录 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
