摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
目录 | 第10-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-46页 |
第一章 植物对非生物胁迫的应答及其抗性机制 | 第14-37页 |
·不同逆境引发的植物生理生化变化 | 第14-16页 |
·高盐胁迫对植物的生理生化的影响 | 第15页 |
·低温胁迫对植物生理的影响 | 第15页 |
·干旱胁迫对植物的生长和代谢的影响 | 第15-16页 |
·重金属胁迫 | 第16页 |
·植物对不同逆境的耐受机制 | 第16-24页 |
·植物耐受高盐胁迫的分子机制 | 第16-19页 |
·植物对低温胁迫的耐受机制 | 第19-21页 |
·植物对干旱胁迫的耐受机制 | 第21-22页 |
·植物对重金属胁迫的耐受机制 | 第22-24页 |
·植物非生物逆境胁迫下诱导的基因表达及产物 | 第24-30页 |
·渗透调节因子 | 第24-27页 |
·胁迫诱导功能蛋白 | 第27-28页 |
·水通道蛋白或水孔蛋白(aquaporin, AQP) | 第28页 |
·毒性降解酶 | 第28-29页 |
·参与胁迫信号传导的蛋白激酶 | 第29-30页 |
·转录因子在植物逆境信号转导中的作用 | 第30-36页 |
·转录因子的概念及结构特征 | 第31页 |
·植物逆境相关转录因子 | 第31-34页 |
·转录因子在植物抗性改良中的应用 | 第34-36页 |
·植物转录因子与 ABA 介导的逆境信号转导途径的关系 | 第36-37页 |
第二章 Trihelix 转录因子家族研究进展 | 第37-45页 |
·Trihelix 转录因子家族 | 第37-40页 |
·Trihelix 结构域特点 | 第37-38页 |
·Trihelix 转录因子的结合元件 | 第38-39页 |
·Trihelix 转录因子的分类 | 第39-40页 |
·Trihelix 转录因子的生物学功能 | 第40-44页 |
·Trihelix 转录因子在生物胁迫中的作用 | 第41-42页 |
·Trihelix 转录因子对胚胎、种子发育中的影响 | 第42页 |
·Trihelix 转录因子在萼片、花瓣发育及开花时间调控的作用 | 第42-43页 |
·Trihelix 转录因子在表皮毛、气孔及叶形发育中的作用 | 第43-44页 |
·展望 | 第44-45页 |
论文选题的依据和目的 | 第45-46页 |
第二部分 论文正文 | 第46-137页 |
第一章 非生物胁迫应答的棉花 GhGTs 基因的表达和克隆 | 第46-74页 |
前言 | 第46-47页 |
第一节 实验材料与方法 | 第47-57页 |
·实验材料 | 第47-48页 |
·植物材料 | 第47页 |
·菌株和质粒 | 第47页 |
·工具酶、分子量标准和试剂盒 | 第47页 |
·主要化学试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47-48页 |
·核苷酸和蛋白序列分析软件 | 第48页 |
·基因来源 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-50页 |
·材料培养与处理 | 第48页 |
·植物总 RNA 的提取及质量检查 | 第48-49页 |
·植物总 RNA 的质量及浓度检测 | 第49页 |
·cDNA 的制备 | 第49-50页 |
·EST 序列分析和引物合成 | 第50页 |
·RT-PCR 和 Realtime-PCR 分析 | 第50-51页 |
·cDNA 末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA Ends,RACE) | 第51-54页 |
·3’-RACE | 第52页 |
·5’-RACE | 第52-53页 |
·5’-和 3’-RACE 中反转录和扩增所用的通用引物 | 第53页 |
·全长序列 cDNA 扩增 | 第53-54页 |
·PCR 产物的纯化和回收 | 第54-55页 |
·PCR 产物的 T 载体连接反应 | 第55页 |
·重组质粒的热击转化 | 第55页 |
·质粒 DNA 的提取(SDS-碱裂解法) | 第55-56页 |
·试剂 | 第55页 |
·质粒提取 | 第55-56页 |
·双酶切反应 | 第56页 |
·PCR 产物及酶切产物的凝胶电泳检测 | 第56页 |
·DNA 序列测序 | 第56-57页 |
第二节 结果与分析 | 第57-74页 |
·RNA 的提取和鉴定 | 第57页 |
·棉花 EST 序列分析 | 第57-58页 |
·Trihelix 基因在非生物胁迫下的表达谱分析 | 第58-64页 |
·高盐诱导 GT 基因表达分析 | 第58-59页 |
·干旱诱导 GT 基因表达分析 | 第59-60页 |
·低温诱导 GT 基因表达分析 | 第60-61页 |
·ABA 处理下 GT 基因的表达分析 | 第61-62页 |
·非生物胁迫基因表达谱分析小结 | 第62-64页 |
·候选基因的全长 cDNA 克隆 | 第64页 |
·5’-RACE 片断的克隆 | 第64页 |
·3’-RACE 片断的克隆 | 第64页 |
·全长基因的拼接与分析 | 第64-70页 |
·GhGT7 基因 | 第65页 |
·GhGT11 基因 | 第65-66页 |
·GhGT18 基因 | 第66-67页 |
·GhGT23 基因 | 第67-68页 |
·GhGT26 基因 | 第68页 |
·GhGT29 基因 | 第68-69页 |
·GhGT30 基因 | 第69-70页 |
·全长基因的系统进化和同源性分析 | 第70-72页 |
·全长基因的系统进化分析 | 第70-71页 |
·全长基因的同源性分析 | 第71-72页 |
·小结 | 第72-74页 |
第二章 棉花 trihelix 转录因子的组织表达特性 | 第74-77页 |
第一节 材料与方法 | 第74-75页 |
·植物材料 | 第74页 |
·方法 | 第74-75页 |
·植物材料播种和样品采集 | 第74页 |
·Realtime-PCR 分析 | 第74-75页 |
第二节 结果与分析 | 第75-77页 |
·GhGTs 基因的组织表达特异性 | 第75-76页 |
·小结 | 第76-77页 |
第三章 Trihelix 转录因子的功能分析 | 第77-93页 |
第一节 材料与方法 | 第77-84页 |
·实验材料 | 第77页 |
·实验方法 | 第77-84页 |
·原生质体转录激活活性分析 | 第77-79页 |
·原生质体转录抑制活性分析 | 第79页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的亚细胞定位分析 | 第79-80页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的 DNA 结合特性研究 | 第80-83页 |
·实验所用引物 | 第83-84页 |
第二节 结果与分析 | 第84-93页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的转录活性分析 | 第84-86页 |
·GhGTs 转录因子的转录激活活性分析 | 第84-85页 |
·GhGTs 转录因子的转录抑制活性分析 | 第85-86页 |
·GhGTs 转录因子的亚细胞定位分析 | 第86-88页 |
·GhGTs 转录因子的 DNA 结合特性分析 | 第88-91页 |
·小结 | 第91-93页 |
第四章 GhGTs 基因的生物学功能研究 | 第93-126页 |
第一节 材料与方法 | 第93-97页 |
·实验材料 | 第93页 |
·实验方法 | 第93-97页 |
·植物双元表达载体的构建 | 第93页 |
·植物表达载体的农杆菌转化 | 第93-94页 |
·农杆菌介导的拟南芥转化(花序浸泡法) | 第94页 |
·转基因拟南芥阳性植株的鉴定 | 第94-95页 |
·转基因拟南芥的表型分析 | 第95-96页 |
·数据统计分析 | 第96页 |
·可能的下游调控基因的分析 | 第96-97页 |
第二节 结果与分析 | 第97-126页 |
·GhGTs 转基因拟南芥植株的获得和表达量分析 | 第97-99页 |
·转基因拟南芥的表型分析 | 第99-123页 |
·GhGT11 过表达转基因拟南芥表型分析 | 第99-104页 |
·GhGT18 基因的转拟南芥表型分析 | 第104-112页 |
·GhGT23 基因的转拟南芥表型分析 | 第112-118页 |
·GhGT26 基因的转拟南芥表型分析 | 第118-123页 |
·GhGTs 调控的下游基因分析 | 第123-124页 |
·小结 | 第124-126页 |
第五章 讨论与主要结论 | 第126-137页 |
·讨论 | 第126-135页 |
·棉花 trihelix 基因的表达特征 | 第127-128页 |
·棉花 GhGT 基因的克隆 | 第128-129页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的组织特异性分析 | 第129-130页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的转录活性 | 第130页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的亚细胞定位 | 第130-131页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的 DNA 结合特异性 | 第131-132页 |
·棉花 GhGTs 转录因子的生物学功能 | 第132-133页 |
·棉花 GhGT23 转录因子可能调控的下游基因分析 | 第133-135页 |
·论文主要结果 | 第135-137页 |
参考文献 | 第137-152页 |
致谢 | 第152-153页 |
附录 | 第153-155页 |
作者简介 | 第155-156页 |
导师评阅表 | 第156页 |