| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-11页 |
| 第二章 实验材料 | 第11-14页 |
| ·主要生化试剂 | 第11页 |
| ·主要仪器设备 | 第11页 |
| ·常用实验试剂和培养基 | 第11-14页 |
| 第三章 实验方法 | 第14-22页 |
| ·全基因组RNA提取 | 第14-15页 |
| ·模板DNA制备(cDNA) | 第15-16页 |
| ·融合蛋白pET30a(+)-PKM_2的构建 | 第16-19页 |
| ·引物设计 | 第16页 |
| ·PCR扩增PKM2基因 | 第16-17页 |
| ·构建表达质粒pET30a(+)-PKM_2 | 第17-19页 |
| ·目的蛋白的原核表达 | 第19-20页 |
| ·重组质粒转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3) | 第19页 |
| ·重组融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)的诱导表达 | 第19页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第19-20页 |
| ·重组融合蛋白表达形式的鉴定 | 第20页 |
| ·重组融合蛋白表达条件的优化 | 第20页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第20-22页 |
| ·细菌培养 | 第20页 |
| ·处理收集菌体 | 第20-21页 |
| ·层析纯化 | 第21页 |
| ·半透膜蛋白透析 | 第21-22页 |
| 第四章 实验结果 | 第22-28页 |
| ·目的基因的克隆和序列分析 | 第22-24页 |
| ·Hela细胞全基因组RNA琼脂糖凝胶电泳结果 | 第22-23页 |
| ·目的基因PCR扩增结果 | 第23-24页 |
| ·重组质粒双酶切验证 | 第24页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第24页 |
| ·人PKM2重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达形式及表达条件的优化 | 第24-26页 |
| ·融合蛋白的表达形式 | 第24-25页 |
| ·目的蛋白表达条件的优化 | 第25-26页 |
| ·含HIS标签的重组蛋白的纯化 | 第26-28页 |
| ·镍柱亲和层析纯化 | 第26-27页 |
| ·重组蛋白半透膜蛋白透析后结果 | 第27-28页 |
| 第五章 讨论 | 第28-31页 |
| ·目的基因片段的克隆和序列分析 | 第28-29页 |
| ·目的基因片段的原核表达 | 第29-30页 |
| ·表达产物纯化 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-34页 |
| 附录 | 第34-36页 |
| 综述 | 第36-43页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 在学期间的研究成果 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44页 |