| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-18页 |
| ·天然免疫及 Toll 样受体家族基因 | 第12-14页 |
| ·天然免疫与获得性免疫 | 第12页 |
| ·Toll 样受体家族 | 第12-14页 |
| ·家禽 TLRs 研究进展 | 第14-17页 |
| ·TLR1 亚科 | 第14-15页 |
| ·TLR2 亚科 | 第15页 |
| ·TLR3 | 第15-16页 |
| ·TLR4 | 第16页 |
| ·TLR5 | 第16-17页 |
| ·TLR7 | 第17页 |
| ·TLR9 | 第17页 |
| ·TLR15 | 第17页 |
| ·研究展望 | 第17-18页 |
| 2 鹅 TLR3 基因的克隆、生物信息学分析及组织表达谱研究 | 第18-37页 |
| ·材料与方法 | 第18-22页 |
| ·试验材料和仪器 | 第18-19页 |
| ·总 RNA 的提取及质量检测 | 第19页 |
| ·第一链的合成 | 第19-20页 |
| ·鹅 TLR3 基因全长的克隆 | 第20-21页 |
| ·鹅 TLR3 cDNA 全长序列的分析 | 第21-22页 |
| ·荧光定量 PCR 反应 | 第22页 |
| ·数据统计分析 | 第22页 |
| ·结果与分析 | 第22-34页 |
| ·RNA 样品的制备与鉴定 | 第22页 |
| ·鹅 TLR3 基因全长的克隆 | 第22-23页 |
| ·鹅 TLR3 同源性分析 | 第23-24页 |
| ·鹅 TLR3 基因生物信息学分析 | 第24-30页 |
| ·TLR3 的组织表达谱 | 第30-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 3 鹅 TLR5 基因的克隆、生物信息学分析及组织表达谱研究 | 第37-51页 |
| ·材料与方法 | 第37-38页 |
| ·试验材料 | 第37页 |
| ·总 RNA 的提取及质量检测 | 第37页 |
| ·第一条链的合成 | 第37页 |
| ·鹅 TLR5 基因全长的克隆 | 第37页 |
| ·鹅 TLR5 cDNA 全长序列的分析 | 第37页 |
| ·TLR5 的组织表达谱 | 第37-38页 |
| ·数据统计分析 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-49页 |
| ·RNA 样品的质量鉴定 | 第38页 |
| ·TLR5 基因全长的克隆 | 第38-39页 |
| ·TLR5 同源性分析 | 第39-40页 |
| ·TLR5 生物信息学分析 | 第40-45页 |
| ·TLR5 的组织表达谱 | 第45-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·小结 | 第50-51页 |
| 4 鹅 TLR3、TLR5 的功能研究 | 第51-58页 |
| ·材料与方法 | 第51-53页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第51页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·细胞培养 | 第52页 |
| ·瞬时转染 | 第52页 |
| ·重组蛋白的真核表达 | 第52-53页 |
| ·荧光素酶活性检测 | 第53页 |
| ·数据统计分析 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-56页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第53页 |
| ·鹅 TLR3、TLR5 在 HEK-293T 细胞中的真核表达 | 第53-54页 |
| ·鹅 TLR3、TLR5 的激活对 NF-κB 活性的影响 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 5 鹅 TLRs 在外周血单核淋巴细胞抗感染免疫中的作用研究 | 第58-68页 |
| ·材料与方法 | 第58-60页 |
| ·主要材料与仪器 | 第58页 |
| ·鹅外周血单核淋巴细胞的分离培养 | 第58页 |
| ·细菌培养 | 第58-59页 |
| ·试验设计 | 第59页 |
| ·总 RNA 提取及 cDNA 的合成 | 第59页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第59页 |
| ·统计学分析 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·外周血单核淋巴细胞总 RNA 的提取 | 第60页 |
| ·引物特异性和扩增效率的检测 | 第60-61页 |
| ·标准曲线 | 第61页 |
| ·目的基因的溶解溶解曲线 | 第61页 |
| ·禽流感感染对外周血单核细胞中 TLR3 及其下游炎性因子的影响 | 第61-62页 |
| ·Poly i:c 刺激对外周血单核细胞中 TLR3 及其下游炎性因子的影响 | 第62-63页 |
| ·沙门氏菌感染对外周血单核细胞中 TLR5 及其下游炎性因子的影响 | 第63-64页 |
| ·Flagellin 刺激对外周血单核细胞中 TLR5 及其下游炎性因子的影响 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 6 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78-79页 |
| 导师简介 | 第79页 |