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阿特拉津和毒死蜱单一及联合暴露对鲤鱼脑组织自噬的影响

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-17页
   ·阿特拉津和毒死蜱神经毒理学研究进展第12-14页
     ·阿特拉津神经毒理学研究进展第12-13页
     ·毒死蜱神经毒理学研究进展第13-14页
   ·自噬在毒理学研究中的作用研究进展第14-16页
     ·自噬的检测方法第15-16页
     ·自噬在毒理学研究中的作用研究进展第16页
   ·目的与意义第16-17页
2 材料与方法第17-26页
   ·试验鱼的驯养及暴露环境第17页
   ·试验的总体设计第17页
     ·暴露试验第17页
     ·恢复试验第17页
   ·样品的采集与处理第17-18页
   ·主要仪器和试剂第18-19页
     ·试验毒物第18页
     ·主要仪器第18页
     ·主要试剂第18-19页
   ·鲤鱼 LC3 和 dynein 基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备第19-23页
     ·鲤鱼 LC3 和 dynein mRNA 基因序列的克隆与鉴定第19-21页
     ·鲤鱼 LC3 和 dynein 基因在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定第21-22页
     ·抗鲤鱼 LC3 和 dynein 多克隆抗体的制备第22-23页
   ·检测项目与方法第23-25页
     ·组织抗氧化功能相关指标的检测第23页
     ·组织超微结构的观察第23-24页
     ·脑自噬相关基因 mRNA 表达的检测第24-25页
     ·鲤鱼 iNOS、LC3 和 dynein 蛋白表达情况的检测第25页
   ·试验数据分析与统计第25-26页
3 结果与分析第26-36页
   ·鲤鱼 LC3 和 dynein 多克隆抗体的制备第26-29页
     ·鲤鱼脑组织中总 RNA 的提取与鉴定第26页
     ·鲤鱼 LC3 和 dynein 基因的 PCR 扩增结果第26-27页
     ·鲤鱼 LC3 和 dynein mRNA 基因序列的测序结果第27页
     ·重组表达载体的构建与鉴定第27-28页
     ·融合蛋白的表达、鉴定与纯化第28-29页
     ·多克隆抗体的制备和鉴定结果第29页
   ·鲤鱼脑组织抗氧化功能的检测结果第29-32页
     ·鲤鱼脑中一氧化氮水平的检测结果第29-30页
     ·鲤鱼脑中诱导型一氧化氮合酶活性的检测结果第30-31页
     ·鲤鱼脑中抗超氧阴离子活力的检测结果第31页
     ·鲤鱼脑中抗羟自由基活力的检测结果第31-32页
   ·鲤鱼脑组织超微结构观察结果第32页
   ·鲤鱼脑 iNOS、LC3、dynein 和 TOR mRNA 和蛋白表达的检测结果第32-36页
     ·实时 PCR 检测方法的建立第32-33页
     ·阿特拉津和毒死蜱亚慢性暴露对鲤鱼脑 iNOS mRNA 和蛋白表达影响的检测结果第33-34页
     ·阿特拉津和毒死蜱亚慢性暴露对鲤鱼脑 LC3 mRNA 和蛋白表达检测的结果第34页
     ·阿特拉津和毒死蜱亚慢性暴露对鲤鱼脑 dynein mRNA 和蛋白表达检测结果第34-35页
     ·阿特拉津和毒死蜱亚慢性暴露对鲤鱼脑 TOR mRNA 表达影响的检测结果第35-36页
4 讨论第36-42页
   ·鲤鱼 LC3 和 dynein 的克隆、表达及多克隆抗体的制备第36-37页
   ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露对鲤鱼脑组中抗氧化功能的影响第37-39页
     ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑中抗超氧阴离子和抗羟自由基活力的影响第37-38页
     ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑中对 NO 含量和 iNOS 活性的影响第38页
     ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑组中对 iNOS mRNA 和蛋白的表达的影响第38-39页
   ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑自噬相关基因的影响第39-42页
     ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑 LC3 表达的影响第39-40页
     ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑 dynein 表达的影响第40-41页
     ·阿特拉津和毒死蜱单一及联合亚慢性暴露后对鲤鱼脑 TOR 表达的影响第41-42页
5 结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-52页
附录第52-59页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第59页

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