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四川地区不同年龄健康人肠道菌群的比较研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1 引言第9-20页
   ·人体肠道微生物研究进展第9-16页
     ·人体肠道微生态概述第9页
     ·人体肠道内有重要生理学意义的微生物组成第9-12页
       ·双歧杆菌第9-10页
       ·乳杆菌第10-11页
       ·拟杆菌第11页
       ·梭菌第11页
       ·其他重要微生物类群第11-12页
     ·人体肠道菌群的主要功能第12-13页
       ·营养代谢功能第12页
       ·免疫功能第12-13页
       ·促进上皮细胞的生长与分化第13页
     ·肠道菌群与年龄的关联性研究进展第13-16页
       ·婴儿肠道菌群微生态学研究进展第13-14页
       ·成年人肠道菌群微生态学研究进展第14-15页
       ·老年人肠道菌群微生态学研究进展第15页
       ·不同年龄健康人肠道菌群的差异第15-16页
   ·肠道菌群的研究方法进展第16-19页
     ·实时荧光定量PCR技术在肠道菌群分析中的应用第16-17页
     ·变性梯度凝胶电泳技术在肠道菌群分析中的应用第17-19页
     ·其他用于肠道菌群研究的分子生物学新技术第19页
   ·本研究的目的和意义第19-20页
2 材料与方法第20-32页
   ·试验材料第20-24页
     ·样品来源第20页
     ·主要试剂及缓冲液第20-21页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·引物第22-24页
   ·试验方法第24-32页
     ·粪便样品采集及保存第24-25页
     ·粪便全基因组DNA的提取第25页
     ·粪便中短链脂肪酸的测定方法第25-26页
       ·粪便样品预处理第25页
       ·高效液相色谱用于短链脂肪酸的测定方法第25-26页
     ·粪便中总胆汁酸的测定方法第26-27页
       ·粪便样品预处理第26页
       ·酶联免疫分析(ELISA)用于总胆汁酸的测定方法第26-27页
     ·粪便菌群组成的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第27-30页
       ·16S rRNA基因V3区的PCR扩增及DGGE分析第27-30页
       ·乳杆菌属类群特异性PCR扩增及DGGE分析第30页
       ·双歧杆菌属类群特异性PCR扩增及DGGE分析第30页
     ·粪便优势菌属的定量分析第30-31页
       ·乳杆菌属和双歧杆菌属的定量第30-31页
       ·其余优势菌属的定量第31页
     ·乳杆菌属和双歧杆菌属内部分种的定性PCR第31-32页
     ·统计分析第32页
3 结果与讨论第32-53页
   ·基因组DNA检测结果第32页
   ·短链脂肪酸的测定结果第32-34页
     ·色谱条件的选择第32-33页
       ·缓冲液及浓度选择第32页
       ·缓冲液pH值的选择第32-33页
       ·甲醇与缓冲液比例的选择第33页
     ·粪便样品中短链脂肪酸的测定结果第33-34页
   ·总胆汁酸的测定结果第34-35页
   ·肠道菌群宏观分析第35-39页
   ·优势菌属的qPCR结果第39-45页
   ·乳杆菌属和双歧杆菌属分析第45-53页
     ·乳杆菌属内部分种的定性结果分析第45页
     ·双歧杆菌属内部分种的定性结果分析第45-46页
     ·乳杆菌属DGGE结果分析第46-49页
     ·双歧杆菌属DGGE结果分析第49-53页
4 结论第53-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-63页
作者简介第63页

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