摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
符号说明 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
·稻米贮藏蛋白与营养品质及其遗传改良现状概述 | 第10-19页 |
·稻米谷蛋白与营养品质 | 第10-11页 |
·水稻谷蛋白的特征、种类及其结构 | 第11-14页 |
·谷蛋白突变体的研究进展 | 第14-16页 |
·稻米营养品质改良的难度 | 第16-17页 |
·基因工程技术改良稻米营养品质研究进展 | 第17-18页 |
·生物安全研究评价 | 第18-19页 |
·本研究的目的及其研究内容 | 第19-21页 |
第二章 水稻谷蛋白基因Gt1在转基因水稻中表达的研究 | 第21-38页 |
·前言 | 第21页 |
·材料与方法 | 第21-28页 |
·植物材料 | 第21页 |
·质粒与细菌菌株 | 第21-22页 |
·化学试剂 | 第22页 |
·PCR引物 | 第22-23页 |
·质粒DNA的提取、酶切、连接与转化 | 第23页 |
·载体的设计策略 | 第23-24页 |
·根癌农杆菌介导培育转基因水稻 | 第24-26页 |
·水稻叶片潮霉素抗性的离体鉴定 | 第26页 |
·水稻总DNA的PCR分析 | 第26页 |
·水稻总RNA的半定量RT-PCR分析 | 第26-27页 |
·水稻种子蛋白的提取 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-33页 |
·载体的构建及其鉴定 | 第28页 |
·转基因水稻植株的获得及其鉴定 | 第28-31页 |
·不同Gt1嵌合基因在转基因水稻植株中的转录 | 第31-32页 |
·谷蛋白在转基因水稻植株中的积累 | 第32-33页 |
·小结与讨论 | 第33-38页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
·不同启动子指导Gt1表达的作用 | 第34页 |
·信号肽序列与蛋白积累 | 第34-35页 |
·提高谷蛋白品质的可能途径 | 第35-37页 |
·无抗性选择标记转基因水稻的筛选与生物安全性 | 第37-38页 |
第三章 两个高赖氨酸转基因水稻新品系的表达与分子特征分析 | 第38-57页 |
·前言 | 第38页 |
·材料与方法 | 第38-42页 |
·植物材料 | 第38-39页 |
·化学试剂 | 第39页 |
·培育转基因水稻HL1与HL5所用的载体 | 第39页 |
·水稻总DNA和总RNA的提取 | 第39页 |
·转基因水稻总RNA的RT-PCR分析 | 第39-40页 |
·水稻种子蛋白的提取 | 第40页 |
·水稻种子蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第40页 |
·水稻种子蛋白的Western杂交分析 | 第40页 |
·地高辛标记DNA探针的制备 | 第40-41页 |
·Southern杂交分析 | 第41页 |
·Inverse PCR分析 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-53页 |
·Gt1-LRP嵌合基因在转基因水稻种子中的转录 | 第42-43页 |
·目标蛋白在转基因水稻种子中的表达与积累 | 第43-44页 |
·转基因水稻新品系HL1的Southern blot分析 | 第44-45页 |
·转基因水稻新品系HL5的插入拷贝数分析 | 第45-46页 |
·转基因水稻新品系HL1与HL5的T-DNA的插入位点分析 | 第46-53页 |
·小结与讨论 | 第53-57页 |
·本章主要研究结果 | 第53-54页 |
·目的蛋白在转基因水稻种子中的表达 | 第54-55页 |
·LRP插入Gt1对融合蛋白的翻译及其翻译后加工的影响 | 第55页 |
·融合蛋白途径改良稻米营养品质的效果 | 第55-56页 |
·T-DNA在水稻染色体上的整合 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |