| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-37页 |
| ·植物隐性核不育分子机理研究 | 第13-26页 |
| ·植物花药的结构及其发育进程 | 第13-14页 |
| ·植物花药发育的时期划分及其特征 | 第14-15页 |
| ·早期花药细胞的分化及相关基因 | 第15-16页 |
| ·绒毡层的发育及相关基因 | 第16-19页 |
| ·绒毡层的功能 | 第16-17页 |
| ·绒毡层的分化及相关基因 | 第17-18页 |
| ·绒毡层降解及相关基因 | 第18-19页 |
| ·小孢子的分离及相关基因 | 第19-21页 |
| ·胼胝质的合成与降解过程及相关基因 | 第19-20页 |
| ·花粉母细胞初生壁的降解及相关基因 | 第20-21页 |
| ·花粉壁的发育及相关的基因 | 第21-25页 |
| ·花粉壁的结构和组成成分 | 第21-23页 |
| ·花粉壁的形成过程 | 第23页 |
| ·花粉壁发育相关的基因 | 第23-25页 |
| ·花药发育调控网络 | 第25-26页 |
| ·油菜隐性雄性不育的发现及其研究概况 | 第26-32页 |
| ·甘蓝性油菜隐性雄性不育材料的来源 | 第26-27页 |
| ·甘蓝性油菜隐性雄性不育的研究进展 | 第27-32页 |
| ·双隐性核不育S45A相关基因的克隆 | 第28-29页 |
| ·三隐性核不育材料相关基因的定位和克隆 | 第29-32页 |
| ·植物差异表达基因的分离 | 第32-36页 |
| ·抑制性消减杂交 | 第32-34页 |
| ·基因芯片的分析方法 | 第34-35页 |
| ·基于二代测序的RNA-seq技术 | 第35-36页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
| 2 材料和方法 | 第37-48页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-48页 |
| ·花药半薄切片的制作 | 第37-38页 |
| ·相关试剂的准备 | 第37页 |
| ·操作步骤 | 第37-38页 |
| ·胼胝质检测实验 | 第38-39页 |
| ·相关试剂的准备 | 第38页 |
| ·实验操作步骤 | 第38-39页 |
| ·总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·SSH文库的构建和差异筛选 | 第40-41页 |
| ·反向Northern杂交 | 第41-42页 |
| ·点膜及后处理 | 第41页 |
| ·探针的制备与标记 | 第41-42页 |
| ·预杂交 | 第42页 |
| ·杂交 | 第42页 |
| ·洗膜 | 第42页 |
| ·Northern杂交 | 第42页 |
| ·EST测序和生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·EST的测序及分析 | 第42-43页 |
| ·基因进化树的构建 | 第43页 |
| ·Real-time PCR分析 | 第43页 |
| ·拟南芥T-DNA插入突变体分析 | 第43-44页 |
| ·拟南芥的种植方法 | 第43-44页 |
| ·拟南芥DNA的提取 | 第44页 |
| ·T-DNA插入突变的鉴定 | 第44页 |
| ·载体的构建 | 第44-45页 |
| ·启动子分析载体的构建 | 第44-45页 |
| ·拟南芥的转化 | 第45页 |
| ·GUS分析 | 第45-46页 |
| ·试剂的准备 | 第45页 |
| ·染色步骤 | 第45-46页 |
| ·原位杂交实验 | 第46-47页 |
| ·扫描电镜和透射电镜 | 第47-48页 |
| ·扫描电镜 | 第47页 |
| ·透射电镜 | 第47-48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-83页 |
| ·7365A的表型特征 | 第48-53页 |
| ·7365A的形态学观察 | 第48-49页 |
| ·7365A的细胞学观察 | 第49-51页 |
| ·7365A的胼胝质检测 | 第51-52页 |
| ·7365A绒毡层PCD延迟 | 第52-53页 |
| ·7365A中下调表达基因的分离 | 第53-65页 |
| ·SSH文库的构建 | 第53-55页 |
| ·利用macroarray筛选差异表达的基因 | 第55-56页 |
| ·Northen blot验证macroarray筛选的结果 | 第56-57页 |
| ·差异表达基因的功能分析 | 第57-62页 |
| ·Bnms3与拟南芥突变体中共下调基因的分析 | 第62-65页 |
| ·花药发育网络中重要基因在Bnms3中的表达分析 | 第65-76页 |
| ·与绒毡层发育和降解相关基因的表达分析 | 第65-69页 |
| ·Bnms3影响了与绒毡层细胞分化相关基因的表达 | 第65-67页 |
| ·Bnms3影响了与绒毡层细胞降解相关基因的表达 | 第67-69页 |
| ·与小孢子分离相关基因的表达分析 | 第69-73页 |
| ·Bnms3影响了与胼胝质壁降解有关基因的表达 | 第69-72页 |
| ·Bnms3影响了与花粉母细胞初生壁降解相关基因的表达 | 第72-73页 |
| ·与花粉外壁发育相关基因的表达分析 | 第73-76页 |
| ·Bnms3影响与孢粉素前体合成相关基因的表达 | 第73-75页 |
| ·Bnms3影响了与孢粉素前体运输有关基因的表达 | 第75-76页 |
| ·BnMSR02功能分析 | 第76-83页 |
| ·MSR02影响了花粉的发育 | 第76-78页 |
| ·MSR02序列和进化分析 | 第78-80页 |
| ·MSR02的表达模式 | 第80-81页 |
| ·MSR02仅参与了孢粉素前体向花粉外壁方向的跨膜运输过程 | 第81-83页 |
| 4 讨论 | 第83-89页 |
| ·SSH技术结合拟南芥的基因信息是研究油菜基因功能的有效策略 | 第83页 |
| ·BnMs3影响了绒毡层的分化和降解 | 第83-84页 |
| ·BnMs3是小孢子分离所必需的 | 第84-85页 |
| ·BnMs3影响了花粉外壁发育 | 第85-86页 |
| ·BnMs3在油菜花药发育中的作用模式 | 第86-88页 |
| ·后续工作的设想 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 附录1：本文中所使用的引物 | 第101-103页 |
| 附录2：作者简介及在读期间发表论文 | 第103页 |
