| 目录 | 第1-8页 |
| CONTENTS | 第8-13页 |
| 符号说明及缩写词 | 第13-15页 |
| 摘要 | 第15-21页 |
| ABSTRACT | 第21-28页 |
| 第一章 文献综述 | 第28-54页 |
| ·多糖 | 第30-35页 |
| ·多糖的分类 | 第31-32页 |
| ·多糖的功能 | 第32页 |
| ·多糖的应用 | 第32-35页 |
| ·细菌的胞外多糖 | 第35-40页 |
| ·细菌胞外多糖组成与结构 | 第35-36页 |
| ·细菌胞外多糖的性质 | 第36-37页 |
| ·胞外多糖的功能 | 第37-38页 |
| ·几种重要的细菌胞外多糖 | 第38-40页 |
| ·生物活性多糖的构效关系 | 第40-45页 |
| ·生物活性多糖的结构层次 | 第40-42页 |
| ·生物活性多糖结构与其生物活性的关系 | 第42-45页 |
| ·细菌胞外多糖的生物合成及基因学研究 | 第45-48页 |
| ·细菌胞外多糖的生物合成 | 第45-47页 |
| ·细菌胞外多糖基因簇的研究 | 第47-48页 |
| ·深海环境细菌胞外多糖的研究 | 第48-52页 |
| ·本文工作开展思路及研究内容 | 第52-54页 |
| 第二章 深海适冷菌Pseudoalteromonas sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01的实验室规模发酵生产与分离纯化 | 第54-69页 |
| ·材料和方法 | 第55-60页 |
| ·实验菌株 | 第55页 |
| ·主要材料、试剂与药品 | 第55-56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·培养基 | 第56页 |
| ·DNS法还原糖标准曲线的制作 | 第56-57页 |
| ·样品中还原糖的测定 | 第57页 |
| ·苯酚-硫酸(Phenol-H_2SO_4)法总糖标准曲线的制作 | 第57-58页 |
| ·样品中总糖和多糖的测定 | 第58页 |
| ·培养温度和培养时间对P.sp.SM9913产EPS的影响 | 第58页 |
| ·海水浓度对P.sp.SM9913产糖的影响 | 第58页 |
| ·P.sp.SM9913胞外多糖的提取 | 第58-59页 |
| ·P.sp.SM9913胞外多糖的分离纯化 | 第59页 |
| ·胞外多糖的紫外-可见吸收光谱的测定 | 第59页 |
| ·胞外多糖纯度的高效液相色谱(HPLC)分析 | 第59页 |
| ·胞外多糖分子量的测定 | 第59-60页 |
| ·实验结果 | 第60-67页 |
| ·DNS法测定还原糖含量的标准曲线 | 第60页 |
| ·Phenol-H_2SO_4法测定总糖含量的标准曲线 | 第60-61页 |
| ·发酵温度和发酵时间对P.sp.SM9913产EPS的影响 | 第61-63页 |
| ·海水浓度对P.sp.SM9913产EPS的影响 | 第63页 |
| ·P.sp.SM9913产EPS的Sephadex G100层析分离 | 第63-64页 |
| ·P.sp.SM9913产EPS的DEAE-Sepharose FastFlow层析分离 | 第64-65页 |
| ·P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01紫外-可见吸收光谱 | 第65页 |
| ·P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01纯度的HPLC分析 | 第65-66页 |
| ·P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01的分子量测定 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第三章 深海适冷菌P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01的结构解析 | 第69-82页 |
| ·材料和方法 | 第70-71页 |
| ·样品 | 第70页 |
| ·试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| ·DS-EPS01的红外光谱(IR)的测定 | 第70页 |
| ·DS-EPS01的核磁共振(NMR)光谱的测定 | 第70-71页 |
| ·DS-EPS01的HRMS(high resolution mass spectrometry)和甲基化分析 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-79页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01的红外光谱特征分析 | 第71-72页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01的NMR特征分析 | 第72-76页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01的HRMS特征分析 | 第76-77页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01的甲基化特征分析 | 第77-78页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01的结构总结 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·本章小结 | 第80-82页 |
| 第四章 深海极端环境下P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01的生态学功能 | 第82-95页 |
| ·材料和方法 | 第83-86页 |
| ·样品 | 第83页 |
| ·试剂 | 第83页 |
| ·主要仪器 | 第83-84页 |
| ·蛋白酶活力测定 | 第84页 |
| ·蛋白质含量测定方法 | 第84页 |
| ·蛋白酶的分离纯化方法 | 第84-85页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01可显著提高适冷蛋白酶MCP-01热稳定性、有效阻止适冷蛋白酶MCP-01的自溶过程 | 第85页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01对金属离子的选择性鳌合作用 | 第85页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01对颗粒物的絮凝作用 | 第85-86页 |
| ·结果 | 第86-92页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01对适冷蛋白酶MCP-01的热稳定性保护 | 第86-87页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01对适冷蛋白酶MCP-01的自溶过程的阻止 | 第87-89页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01对金属离子鳌合作用 | 第89页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01对颗粒物的絮凝作用 | 第89-90页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01生态学功能分析与深海极端环境下P.sp.SM9913生态响应机制模型 | 第90-92页 |
| ·讨论 | 第92-93页 |
| ·本章小结 | 第93-95页 |
| 第五章 深海适冷菌P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01生物合成基因簇的克隆与功能分析 | 第95-114页 |
| ·材料 | 第96-99页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第96页 |
| ·主要试剂与药品 | 第96页 |
| ·培养基 | 第96-97页 |
| ·试剂盒 | 第97页 |
| ·工具酶 | 第97页 |
| ·主要仪器设备 | 第97页 |
| ·数据库及分析软件 | 第97-98页 |
| ·主要溶液 | 第98-99页 |
| ·主要方法 | 第99-104页 |
| ·深海适冷菌P.sp.SM9913基因组DNA的提取 | 第99页 |
| ·引物设计和寡核苷酸探针合成 | 第99-100页 |
| ·PCR反应和琼脂糖电泳分析 | 第100-101页 |
| ·DNA序列的测定 | 第101页 |
| ·琼脂糖凝胶上回收目的基因DNA片段 | 第101-102页 |
| ·质粒小量快速提取 | 第102-103页 |
| ·E Coli感受态细胞的制备 | 第103页 |
| ·化学转化 | 第103页 |
| ·阳性克隆子的鉴定和保存 | 第103页 |
| ·连接反应 | 第103-104页 |
| ·深海适冷菌P.sp.SM9913胞外多糖DS-EPS01合成分泌相关基因簇的克隆及分析方法 | 第104-106页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01合成分泌相关基因簇的克隆方法 | 第104-105页 |
| ·测序结果的比对,校正和定位分析及其装配拼接 | 第105页 |
| ·胞外多糖生物合成基因簇全序列注释分析与物理图谱的绘制 | 第105-106页 |
| ·胞外多糖DS-EPS01合成分泌相关基因簇的遗传分析方法 | 第106页 |
| ·结果与讨论 | 第106-112页 |
| ·深海适冷菌P.sp.SM9913胞外多糖生物合成基因簇的克隆 | 第106-107页 |
| ·深海适冷菌P.sp.SM9913胞外多糖生物合成基因簇的功能注释与分析 | 第107-109页 |
| ·深海适冷菌P.sp.SM9913胞外多糖生物合成机制分析 | 第109-111页 |
| ·胞外多糖在P.sp.SM9913适应深海极端环境中的遗传机制分析 | 第111-112页 |
| ·本章小结 | 第112-114页 |
| 总结与展望. | 第114-117页 |
| 附录 | 第117-135页 |
| 参考文献 | 第135-149页 |
| 外文论文 | 第149-181页 |
| 致谢 | 第181-182页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第182-183页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第183页 |
