| 第一部分 综述 | 第1-23页 |
| 1．1 前言 | 第10页 |
| 1．2 耐利福平分子机制的研究现状 | 第10-11页 |
| 1．3 分子生物学技术在耐利福平TB检测方面的研究进展 | 第11-15页 |
| 1．3．1 DNA测序法 | 第11-12页 |
| 1．3．2 基于聚合酶链反应和电泳分离技术的检测方法 | 第12-14页 |
| 1．3．2．1 聚合酶链反应-单链构象多态性分析 | 第12-13页 |
| 1．3．2．2 聚合酶链反应-双脱氧指纹图分析 | 第13页 |
| 1．3．2．3 聚合酶链反应-剪切酶片段长度多态性分析 | 第13页 |
| 1．3．2．4 聚合酶链反应-异源双链形成分析 | 第13-14页 |
| 1．3．3 基于同源杂交的检测方法 | 第14-15页 |
| 1．4 荧光微球技术 | 第15-23页 |
| 1．4．1 技术背景 | 第15-18页 |
| 1．4．1．1 技术简介 | 第15-16页 |
| 1．4．1．2 技术优势 | 第16-18页 |
| 1．4．2 荧光微球核酸检测技术的应用现状 | 第18-22页 |
| 1．4．2．1 人类白细胞抗原分型 | 第18-19页 |
| 1．4．2．2 单核苷酸多态性基因分型 | 第19-20页 |
| 1．4．2．3 疾病筛查与诊断 | 第20-21页 |
| 1．4．2．4 病毒载量的检测 | 第21页 |
| 1．4．2．5 在环境微生物检测和其他研究领域的应用 | 第21-22页 |
| 1．4．3 小结 | 第22-23页 |
| 第二部分 实验材料与仪器 | 第23-27页 |
| 2．1 所需材料及试剂 | 第23-26页 |
| 2．1．1 结核杆菌标准株及结核病患者标本 | 第23页 |
| 2．1．2 培养基 | 第23页 |
| 2．1．3 抗结核病药物 | 第23页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第23-24页 |
| 2．1．5 寡聚核苷酸探针及探针互补序列 | 第24-25页 |
| 2．1．6 荧光微球 | 第25页 |
| 2．1．7 常用生化试剂 | 第25-26页 |
| 2．1．8 缓冲液系统 | 第26页 |
| 2．2 所需仪器 | 第26-27页 |
| 第三部分 实验方法 | 第27-33页 |
| 3．1 结核杆菌的培养 | 第27页 |
| 3．1．1 标本预处理 | 第27页 |
| 3．1．2 结核杆菌的药敏实验 | 第27页 |
| 3．2 结核杆菌rpoB基因高频突变区的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3．2．1 PCR模板的制备 | 第27页 |
| 3．2．2 结核杆菌rpoB基因高频突变区的PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3．3 荧光微球技术对结核杆菌rpoB基因突变的多重检测 | 第28-31页 |
| 3．3．1 寡聚核苷酸探针与荧光微球的偶联 | 第28-30页 |
| 3．3．2 rpoB基因高频突变区PCR扩增产物的纯化 | 第30页 |
| 3．3．3 荧光微球技术对rpoB基因突变位点的多重检测 | 第30-31页 |
| 3．3．4 微球表面寡聚核苷酸探针与PCR产物的杂交动力学实验 | 第31页 |
| 3．4 其他分子生物学方法的对照实验 | 第31-33页 |
| 3．4．1 直接测序法分析 | 第31页 |
| 3．4．2 PCR-SSCP分析 | 第31-33页 |
| 第四部分 实验结果 | 第33-43页 |
| 4．1 结核杆菌临床分离株的药敏实验 | 第33-34页 |
| 4．2 结核杆菌rpoB基因高频突变区PCR扩增结果 | 第34-35页 |
| 4．3 荧光微球技术对结核杆菌rpoB基因突变位点的检测结果 | 第35-37页 |
| 4．3．1 荧光微球技术对五种结核杆菌rpoB基因的分型 | 第35-36页 |
| 4．3．2 微球表面寡核苷酸探针与PCR产物的杂交动力学实验 | 第36-37页 |
| 4．4 其他耐利福平TB分子生物学检测方法的对照结果 | 第37-43页 |
| 4．4．1 DNA测序结果 | 第37-41页 |
| 4．4．2 PCR-SSCP的检测结果 | 第41-43页 |
| 第五部分 讨论 | 第43-46页 |
| 小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
