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斑蝥素提取、特异性抗体的制备及其酶联免疫检测方法的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
1 绪论第12-27页
   ·引言第12页
   ·国内外研究现状第12-21页
     ·斑蝥素资源及其生物合成第12-13页
     ·药理毒理机制及应用第13-15页
     ·斑蝥素的提取第15页
     ·斑蝥素的鉴定第15页
     ·斑蝥素及其衍生物的人工合成第15-18页
     ·小分子物质人工完全抗原的制备第18-21页
     ·ELISA 技术在小分子物质检测上的应用第21页
   ·气相色谱及其应用第21-22页
   ·紫外吸收及其应用第22页
   ·质谱及其应用第22-23页
   ·核磁共振及其应用第23-24页
   ·亲和层析及其应用第24页
   ·研究目的及意义第24-25页
   ·研究内容和技术路线第25-26页
     ·研究内容第25页
     ·技术路线第25-26页
   ·本研究的创新点第26-27页
2 材料与方法第27-37页
   ·供试材料第27页
   ·主要仪器第27页
   ·试剂第27-29页
     ·斑蝥素的提取所需试剂第27页
     ·斑蝥素结构修饰所需试剂第27-28页
     ·斑蝥素完全抗原的制备所需试剂第28页
     ·斑蝥素特异性抗体制备所需试剂第28-29页
     ·斑蝥素的酶联免疫方法构建所需试剂第29页
   ·方法第29-37页
     ·斑蝥素的提取及检测第29-30页
     ·半抗原N-羧乙基斑蝥酰亚胺的合成及其鉴定第30-31页
     ·N-羧乙基斑蝥酰亚胺及斑蝥素对小白鼠胃毒毒力的比较第31页
     ·斑蝥素完全抗原的制备与鉴定第31-32页
     ·斑蝥素特异性抗体的制备与纯化第32-35页
     ·斑蝥素的酶联免疫方法构建第35-37页
3 结果与分析第37-53页
   ·斑蝥素的提取及检测第37-40页
     ·斑蝥素的提取第37-38页
     ·斑蝥素的鉴定第38-40页
   ·N-羧乙基斑蝥酰亚胺的鉴定第40-43页
     ·产物溶解性的鉴定第41页
     ·产物紫外波谱的鉴定第41页
     ·产物的TLC 鉴定第41页
     ·产物的MS 鉴定数据第41-42页
     ·产物的NMR 鉴定第42-43页
   ·影响缩合产物产率的主要因素第43-44页
     ·反应物的比例对产率的影响第43页
     ·不同媒介溶剂对产率的影响第43-44页
     ·脱水闭环反应的反应温度以及时间对产率的影响第44页
     ·催化剂 Et3N 用量对产率的影响第44页
   ·斑蝥素与N-羧乙基斑蝥酰亚胺毒性强弱比较第44-45页
   ·斑蝥素完全抗原的鉴定第45-46页
   ·兔抗血清效价鉴定第46-47页
   ·斑蝥素特异性抗体纯化结果第47-50页
     ·斑蝥素特异性抗体的亲和层析第47-48页
     ·斑蝥素特异性抗体纯化后的效价变化第48-49页
     ·纯化后的斑蝥素特异性抗体的纯度鉴定第49-50页
   ·斑蝥素的酶联免疫方法构建第50-53页
     ·斑蝥素酶免疫分析曲线及其检测极限第50-52页
     ·斑蝥素酶免疫分析方法可靠性分析第52-53页
4 讨论第53-57页
   ·影响斑蝥素提取纯及其产率的因素第53页
   ·斑蝥素的气相色谱测定的影响因素第53-54页
   ·斑蝥素衍生物的合成路线选择第54-55页
   ·斑蝥素与N-羧乙基斑蝥酰亚胺的毒性区别及其意义第55页
   ·斑蝥素完全抗原对抗体的影响第55页
   ·亲和层析纯化结果的讨论第55-56页
   ·斑蝥素酶联免疫测定方法的关键点第56-57页
5 结论与后续工作展望第57-59页
   ·主要结论第57页
   ·后续工作展望第57-59页
致谢第59-60页
参考文献第60-66页
附录第66-68页

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