摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
符号与缩略语说明 | 第10-11页 |
前言 | 第11-12页 |
文献综述 | 第12-28页 |
第一章 芳香烃类化合物的污染及其生物降解 | 第12-22页 |
1.芳香烃类化合物的污染 | 第12-14页 |
·芳香烃的来源 | 第12-13页 |
·芳香烃的危害 | 第13-14页 |
2.芳香烃生物降解 | 第14-22页 |
·芳香烃生物降解途径 | 第14-15页 |
·芳香烃降解中的氧化酶 | 第15-22页 |
第二章 联苯生物降解研究进展 | 第22-28页 |
1.联苯概述 | 第22页 |
2.联苯的微生物降解 | 第22-28页 |
·降解途径 | 第23页 |
·基因组织结构 | 第23-26页 |
·联苯2,3-双加氧酶(羟基化双加氧酶) | 第26-28页 |
实验部分 | 第28-82页 |
第三章 一株联苯降解菌的筛选、鉴定及其降解特性研究 | 第28-40页 |
1.材料与方法 | 第28-31页 |
·培养基与试剂 | 第28页 |
·联苯降解菌的分离 | 第28-29页 |
·降解菌株的培养特征及生理生化鉴定 | 第29页 |
·降解菌株的16S rDNA序列的测定和鉴定 | 第29-30页 |
·降解菌株系统发育地位的确定 | 第30页 |
·联苯含量的测定 | 第30-31页 |
2.结果与分析 | 第31-39页 |
·石油污染土壤中联苯降解菌株的分离 | 第31-32页 |
·降解菌株BP3的形态特征、生理生化特征及其鉴定 | 第32-34页 |
·菌株BP3对抗生素的耐受性 | 第34-35页 |
·菌株BP3的降解特性研究 | 第35-39页 |
3.小结 | 第39-40页 |
第四章 2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶基因的克隆及表达 | 第40-66页 |
1.材料与方法 | 第40-46页 |
·培养基与试剂 | 第40页 |
·菌株与质粒 | 第40-41页 |
·菌体基因组DNA的提取,质粒DNA的提取 | 第41页 |
·染色体DNA的部分酶切与酶切片段的回收 | 第41-42页 |
·酶连及酶连产物的转化 | 第42页 |
·阳性克隆的筛选 | 第42页 |
·核苷酸序列的测定与序列分析 | 第42-43页 |
·2,3-DHBP双加氧酶基因的PCR扩增及及高效表达载体的构建 | 第43-44页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第44-45页 |
·酶活分析 | 第45-46页 |
2.结果与分析 | 第46-65页 |
·菌株BP3的基因组DNA的部分酶切 | 第46页 |
·基因组文库的构建及文库质量的检验 | 第46-47页 |
·阳性克隆的筛选 | 第47-49页 |
·阳性克隆的功能验证 | 第49-50页 |
·序列测定及分析 | 第50-59页 |
·DHBPDO基因的扩增及其在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第59-63页 |
·菌株BP3中DHBPDO编码基因的比较分析 | 第63-65页 |
3.小结 | 第65-66页 |
第五章 联苯降解操纵子的克隆及联苯降解途径的推测 | 第66-82页 |
1.材料与方法 | 第66-69页 |
·培养基与试剂 | 第66页 |
·菌株与质粒 | 第66-67页 |
·菌体基因组DNA和质粒DNA的提取 | 第67页 |
·PCR扩增引物 | 第67-68页 |
·PCR产物的TA克隆 | 第68页 |
·序列分析 | 第68-69页 |
2.结果与分析 | 第69-79页 |
·bph及xyl基因簇序列分析 | 第69-78页 |
·菌株BP3联苯降解途径 | 第78-79页 |
3.小结 | 第79-82页 |
全文总结 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
附录一 文中所用培养基及试剂配方 | 第94-96页 |
附录二 攻读硕士学位期间发表或已录用的论文 | 第96-98页 |
致谢 | 第98页 |