摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-31页 |
·水稻条纹病毒的生物学 | 第13-18页 |
·水稻条纹病毒的分类地位及病毒粒体形态 | 第13页 |
·水稻条纹叶枯病的分布与危害 | 第13-15页 |
·RSV的基因组结构 | 第15-18页 |
·有关抗RSV的水稻研究 | 第18-19页 |
·抗RSV水稻基因资源的利用 | 第18页 |
·RSV病害控制的分子生物学策略 | 第18-19页 |
·RNAI的发现及其在水稻抗病毒基因工程中的重要性 | 第19-23页 |
·RNAi的发现及其特点 | 第19-21页 |
·RNAi的可能机制 | 第21-23页 |
·植物病毒外壳蛋白介导的抗性及RNAI在水稻抗病毒中的重要性 | 第23-26页 |
·利用病毒外壳蛋白进行的抗病毒研究 | 第23-24页 |
·转基因植物研究中存在的问题 | 第24-25页 |
·RNAi在水稻抗病毒基因工程中的应用前景 | 第25-26页 |
·农杆菌介导的水稻转化技术研究 | 第26-30页 |
·农杆菌介导的遗传转化(Agrobacterium-mediated transformation) | 第26-27页 |
·根癌农杆菌介导转化水稻等单子叶植物的尝试 | 第27页 |
·影响根癌农杆菌介导转化水稻的因素 | 第27-28页 |
·转化过程中的选择标记基因 | 第28页 |
·转化过程中的基因沉默及其对策 | 第28-29页 |
·根癌农杆菌介导转化植物的优点 | 第29-30页 |
·本研究的目的意义 | 第30-31页 |
第二章 适合农杆菌介导的水稻转化干涉载体的构建 | 第31-43页 |
·RSV CP基因的克隆测序 | 第31-35页 |
·材料和试剂 | 第31页 |
·实验方法 | 第31-34页 |
·结果与分析 | 第34-35页 |
·适合农杆菌介导水稻转化的干涉载体的构建 | 第35-41页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第三章 农杆菌介导的两种干涉载体的水稻转化 | 第43-53页 |
·材料与方法 | 第43-45页 |
·材料 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-45页 |
·结果与分析 | 第45-51页 |
·农杆菌转化子的鉴定 | 第45-46页 |
·水稻成熟胚愈伤组织的培养 | 第46-47页 |
·愈伤组织与农杆菌的共培养 | 第47页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第47-51页 |
·转化效率分析 | 第51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第四章 转基因水稻的分子鉴定及其抗病性研究 | 第53-70页 |
·材料与方法 | 第53-60页 |
·转基因水稻品种 | 第53页 |
·转基因水稻所转化的载体 | 第53页 |
·水稻叶片DNA的小量提取 | 第53-54页 |
·PCR检测 | 第54页 |
·利用设计的特异性引物对转基因水稻进行构造检测 | 第54页 |
·酶联免疫吸附法—间接ELISA | 第54-56页 |
·种子的潮霉素平板抗性筛选 | 第56页 |
·水稻叶片总RNA的提取 | 第56页 |
·RT-PCR分析 | 第56页 |
·Southern杂交分析 | 第56-58页 |
·转基因水稻抗病性鉴定 | 第58-60页 |
·结果与分析 | 第60-68页 |
·爱知旭为受体得到的转基因水稻 | 第60-63页 |
·皖粳97受体所得转基因水稻的鉴定与分析 | 第63-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
第五章 转RSV CP基因水稻的插入位点解析 | 第70-83页 |
·材料与方法 | 第70-73页 |
·水稻材料 | 第70页 |
·干涉载体的物理图谱 | 第70-71页 |
·T-DNA的载体构造 | 第71页 |
·根据T-DNA载体所设计的引物 | 第71-72页 |
·TAIL-PCR方法 | 第72-73页 |
·长链PCR(long distance PCR,LD-PCR) | 第73页 |
·序列测定和分析 | 第73页 |
·结果与分析 | 第73-81页 |
·转基因水稻DNA的提取 | 第73-74页 |
·转基因水稻左右边界的检测 | 第74-75页 |
·T0代转基因水稻0—1结构基因检测及其旁侧序列分析 | 第75-80页 |
·皖粳97受体所得转基因水稻结构基因的检测及其旁侧序列分析 | 第80-81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
第六章 全文结论 | 第83-85页 |
·载体的构建 | 第83页 |
·农杆菌介导的水稻转化 | 第83页 |
·转基因水稻的初步检测 | 第83页 |
·转基因水稻的抗病性分析 | 第83-84页 |
·对转基因水稻进行初步的插入结构分析 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-95页 |
附录 | 第95-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
作者简介 | 第104页 |