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鸡SIgA检测方法建立及禽流感—新城疫重组二联活疫苗诱导局部黏膜免疫的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-21页
   ·禽类黏膜免疫第13-18页
     ·家禽黏膜系统的组成第13-14页
     ·家禽黏膜免疫系统的特点第14-15页
     ·家禽黏膜免疫系统的功能第15页
     ·家禽黏膜免疫反应第15-16页
     ·家禽黏膜免疫在抗感染中的作用第16-17页
     ·疫苗与黏膜免疫的关系第17页
     ·早期黏膜免疫对免疫器官的激活和启动作用第17页
     ·母源抗体与黏膜免疫第17-18页
   ·新城疫概况第18页
   ·禽流感概况第18-19页
   ·禽流感、新城疫重组二联活疫苗第19页
   ·论文主要研究内容及目的意义第19-21页
第二章 研究内容第21-55页
   ·材料和方法第21-30页
     ·质粒、菌种与细胞第21页
     ·主要试剂与材料第21页
     ·实验动物及免疫用疫苗第21页
     ·原核表达质粒pET-32a-Ch-SIgAα重链的构建第21-22页
     ·原核表达重组Ch-SIgAα重链蛋白第22页
     ·重组Ch-SIgAα重链蛋白的纯化第22-23页
     ·鸡胆汁中SIgA的提取与鉴定第23-24页
     ·动物免疫第24-25页
     ·Ch-SIgAα重链单克隆抗体的制备第25-27页
     ·单克隆抗体腹水制备第27页
     ·单克隆抗体的鉴定第27-28页
     ·抗鸡SIgAα重链单抗腹水中IgG抗体的提取第28页
     ·生物素标记单克隆抗体第28页
     ·ELISA检测方法的建立及反应条件的优化第28-29页
     ·动物免疫试验第29-30页
   ·结果第30-49页
     ·原核表达重组质粒pET-32a-Ch-SIgAα重链酶切鉴定结果第30页
     ·原核重组Ch-SIgAα重链蛋白的表达第30-31页
     ·胆汁中SIgA分离纯化、SDS—PAGE和Western-blotting鉴定第31-33页
     ·间接ELISA测定鼠抗Ch-SIgAα重链特异性多克隆抗体效价第33-34页
     ·抗原包被最佳浓度与阴、阳性血清最佳稀释度的确定第34页
     ·阳性杂交瘤细胞株的筛选第34页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第34-35页
     ·单抗细胞上清及腹水效价测定第35-36页
     ·单克隆抗体亚型鉴定第36页
     ·单抗腹水中IgG的纯化结果第36-37页
     ·生物素标记抗体工作浓度的确定第37页
     ·标记抗体的交叉反应试验第37-38页
     ·包被抗原的最适浓度确定第38-39页
     ·血清样本最佳稀释度的确定第39页
     ·rL-H5重组病毒初次免疫SPF雏鸡的系统体液免疫和局部黏膜免疫第39-44页
     ·rL-H5重组病毒二次免疫SPF育成鸡的系统体液免疫和局部黏膜免疫第44-49页
   ·讨论第49-55页
     ·关于鸡SIgA的提取第49页
     ·关于免疫用抗原的制备第49页
     ·关于单克隆抗体的制备第49-50页
     ·关于单克隆抗体纯化技术第50页
     ·关于生物素标记抗体技术第50-51页
     ·关于间接ELISA检测方法第51页
     ·关于rL-H5疫苗株诱导的黏膜免疫第51-55页
第三章 全文结论第55-56页
参考文献第56-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页
发表文章第60页

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