| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| ·猪瘟和猪瘟病毒概述 | 第12-18页 |
| ·猪瘟 | 第12页 |
| ·猪瘟病毒及其基因组结构 | 第12-13页 |
| ·猪瘟病毒的编码蛋白及其功能 | 第13-16页 |
| ·猪瘟病毒的遗传分型 | 第16-17页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗 | 第17-18页 |
| ·荧光定量 PCR | 第18-20页 |
| ·荧光定量 PCR技术的原理 | 第18页 |
| ·荧光定量 PCR技术的两种定量形式 | 第18-19页 |
| ·荧光定量 PCR技术的种类 | 第19-20页 |
| ·荧光定量 PCR技术在动物疾病检测中的应用 | 第20页 |
| ·猪瘟诊断方法研究现状 | 第20-26页 |
| ·病原学检测 | 第20-21页 |
| ·血清学检测 | 第21-22页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第22页 |
| ·间接血凝试验 | 第22-23页 |
| ·分子诊断 | 第23-25页 |
| ·鉴别诊断 | 第25-26页 |
| ·本研究的背景与目的 | 第26-27页 |
| 第二章 鉴别猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株的复合荧光定量RT-PCR 方法的建立 | 第27-43页 |
| ·材料与方法 | 第28-34页 |
| ·毒株、细胞与质粒 | 第28页 |
| ·主要实验仪器及试剂 | 第28-29页 |
| ·引物和探针 | 第29页 |
| ·病毒 RNA提取和cDNA合成 | 第29-31页 |
| ·复合荧光定量 RT-PCR阳性标准品 | 第31页 |
| ·常规 PCR | 第31页 |
| ·复合荧光定量 RT-PCR反应条件的优化 | 第31-32页 |
| ·特异性试验 | 第32页 |
| ·敏感性试验 | 第32-33页 |
| ·重复性试验 | 第33页 |
| ·复合荧光定量 RT-PCR与复合 RT-nPCR的符合率试验 | 第33页 |
| ·病毒分离试验 | 第33页 |
| ·复合荧光定量 RT-PCR对现地样品的检测和种系发生分析 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-41页 |
| ·PCR退火温度的确定 | 第34页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR反应参数的优化结果及标准曲线的建立 | 第34-37页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR的特异性 | 第37页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR的敏感性 | 第37页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR的重复性 | 第37-38页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR与复合 RT-nPCR的符合率 | 第38页 |
| ·野毒阳性样品的病毒分离验证 | 第38-39页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR对现地样品的检测和种系发生分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 复合荧光定量 RT-PCR对猪瘟病毒人工感染猪的检测 | 第43-49页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·实验动物及病毒 | 第44页 |
| ·仪器和试剂 | 第44页 |
| ·实验动物的人工感染 | 第44页 |
| ·全血中病毒RNA的提取和cDNA的合成 | 第44页 |
| ·人工感染猪全血中猪瘟病毒的检测 | 第44页 |
| ·感染猪各组织中猪瘟病毒的检测 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·人工感染猪临床表现和体温检测 | 第45页 |
| ·人工感染猪全血中猪瘟病毒的检测 | 第45-46页 |
| ·猪瘟病毒在感染猪体内的复制动态 | 第46-47页 |
| ·猪瘟病毒在感染猪各组织中的分布 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 应用复合荧光定量 RT-PCR估测猪瘟兔化弱毒疫苗的效价 | 第49-54页 |
| ·材料与方法 | 第50页 |
| ·疫苗与实验动物 | 第50页 |
| ·试剂和仪器 | 第50页 |
| ·兔体定型热法测定疫苗效价 | 第50页 |
| ·病毒RNA的提取与cDNA的合成 | 第50页 |
| ·猪瘟兔化弱毒疫苗病毒RNA浓度的检测 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·猪瘟细胞苗的兔体热反应结果 | 第50-51页 |
| ·复合荧光定量RT-PCR定量检测结果 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |
