| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-36页 |
| 1.中药作用机理现代生物学研究的科学意义及其重要研究方向 | 第13-15页 |
| 2.肿瘤细胞诱导分化研究的理论与实践意义及发展方向 | 第15-20页 |
| 3.中药有效成分诱导肿瘤细胞分化研究 | 第20-24页 |
| 4.核基质与核基质蛋白的研究 | 第24-27页 |
| 5.细胞核基质异常与细胞癌变 | 第27-29页 |
| 6.人成骨肉瘤细胞的生物学特性与肿瘤细胞终末分化诱导研究 | 第29-33页 |
| 7.本论文具体研究工作及其科学意义 | 第33-36页 |
| 材料与方法 | 第36-45页 |
| 1.肿瘤细胞培养 | 第36页 |
| 2.诱导分化处理 | 第36-37页 |
| 3.光学显微镜样品的制备与观察 | 第37页 |
| 4.电子显微镜样品的制备与观察 | 第37页 |
| 5.生长曲线测定 | 第37页 |
| 6.细胞周期测定 | 第37-38页 |
| 7.骨结节形成观察样品制备 | 第38页 |
| 8.Ⅰ型胶原表达观察样品制备 | 第38页 |
| 9.骨钙蛋白(Osteocalcin)与骨粘素(Osteonectin)表达观察样品制备 | 第38-39页 |
| 10.人成骨肉瘤MG-63细胞癌基因c-fos、c-myc产物表达观察样品制备 | 第39页 |
| 11.人成骨肉瘤MG-63细胞抑癌基因Rb、p27产物表达观察样品制备 | 第39-40页 |
| 12.核基质-中间纤维系统观察样品制备 | 第40页 |
| 13.诱导分化前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质蛋白样品选择性抽提 | 第40-41页 |
| 14.核基质蛋白双向凝胶电泳分离与凝胶图像分析 | 第41-42页 |
| (1).2-DE | 第41页 |
| (2).凝胶染色 | 第41-42页 |
| (3).图像分析 | 第42页 |
| 15.诱导分化前后差异核基质蛋白的胶内酶解 | 第42-43页 |
| 16.诱导分化前后差异核基质蛋白的质谱鉴定 | 第43页 |
| 17.Western blotting分析 | 第43页 |
| 18.特异核基质蛋白的激光共聚焦显微镜样品制备与观察 | 第43-45页 |
| 实验结果 | 第45-71页 |
| 1.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合对人成骨肉瘤MG-63细胞终末分化的诱导作用结果 | 第45-52页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞增殖抑制作用 | 第45-47页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞生长影响 | 第45-46页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞周期的影响 | 第46-47页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞形态与超微结构的影响 | 第47-48页 |
| ·光学显微镜观察 | 第47-48页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第48页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞相关癌基因、抑癌基因表达的影响 | 第48-50页 |
| ·癌基因c-fos表达产物的变化 | 第48-49页 |
| ·癌基因c-myc表达产物的变化 | 第49页 |
| ·抑癌基因Rb表达产物的变化 | 第49-50页 |
| ·抑癌基因p27表达产物的变化 | 第50页 |
| ·终末分化指标的观察 | 第50-52页 |
| ·骨钙蛋白的表达观察 | 第50页 |
| ·骨粘素的表达观察 | 第50-51页 |
| ·骨结节形成观察 | 第51页 |
| ·钙化糖原颗粒的形成观察 | 第51-52页 |
| 2.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合对人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统构型的影响观察 | 第52-54页 |
| ·光学显微镜观察 | 第52页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第52-54页 |
| 3.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合诱导MG-63细胞分化过程中核基质蛋白表达的变化 | 第54-61页 |
| ·双向凝胶电泳与图像分析 | 第54-56页 |
| ·MALDI-TOF质谱分析与数据库检索结果 | 第56-61页 |
| 4.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合诱导MG-63细胞分化过程中差异表达核基质蛋白的确证 #.58 | 第61-64页 |
| ·差异表达核基质蛋白的Western blot验证结果 | 第61-62页 |
| ·荧光显微镜对差异核基质蛋白表达的定位与确认 | 第62-64页 |
| ·Actin在人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的定位和表达 | 第62-63页 |
| ·Vimentin在人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的定位和表达 | 第63页 |
| ·Prohibitin在MG-63细胞核基质-中间纤维系统的定位和表达 | 第63页 |
| ·NPM在MG-63细胞核基质-中间纤维系统的定位和表达 | 第63-64页 |
| ·HnRNP在MG-63细胞核基质-中间纤维系统的定位和表达 | 第64页 |
| 5.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合诱导MG-63细胞分化过程中特异核基质蛋白与相关癌基因、抑癌基因的的共定位观察。 | 第64-71页 |
| ·NPM和c-Fos在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第64-65页 |
| ·NPM和c-Myc在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第65-66页 |
| ·NPM和Rb在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第66-67页 |
| ·NPM和MTp53在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第67页 |
| ·Prohibitin和c-Fos在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第67-68页 |
| ·Prohibitin和c-Myc在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第68-69页 |
| ·Prohibitin和Rb在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第69-70页 |
| ·Prohibitin和mt p53在人成骨肉瘤MG-63细胞内的共定位观察 | 第70-71页 |
| 讨论 | 第71-108页 |
| 1.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合对人成骨肉瘤MG-63细胞终末分化的诱导效果 | 第71-76页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞增殖抑制作用与细胞周期调控效果 | 第71-72页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞形态与超微结构恶性表型特征的影响 | 第72-73页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞癌基因和抑癌基因表达的影响 | 第73-75页 |
| ·中药有效成分组合(RCT)对MG-63细胞终末分化指标的表达的影响 | 第75-76页 |
| 2.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中对核基质构型变化的影响 | 第76-78页 |
| 3.差异表达核基质蛋白与人参皂甙Rg1等中药有效成分组合诱导人成骨肉瘤MG-63细胞分化的关系 | 第78-103页 |
| ·人成骨肉瘤MG-63细胞分化过程中差异表达的核基质蛋白 | 第79-82页 |
| ·结构性核基质蛋白的差异表达与MG-63细胞诱导分化的关系 | 第82-85页 |
| ·Vimentin和Actin差异表达 | 第82-83页 |
| ·LaminA/C和LaminB | 第83-85页 |
| ·功能性蛋白的差异表达与MG-63细胞诱导分化的关系 | 第85-103页 |
| ·特异性核基质蛋白Prohibitin在RCT诱导MG-63细胞分化中的作用 | 第85-91页 |
| ·Prohibitin(PHB) | 第85-86页 |
| ·Prohibitin与原癌基因c-fos、c-myc | 第86-88页 |
| ·Prohibitin与抑癌基因p53 | 第88-89页 |
| ·Prohibitin与抑癌基因Rb | 第89-90页 |
| ·Prohibitin小结: | 第90-91页 |
| ·特异性核基质蛋白Nucleophosmin(NPM)在人成骨肉瘤MG-63细胞增殖分化中的作用 | 第91-96页 |
| ·Nucleophosmin(NPM) | 第91-92页 |
| ·Nucleophosmin与原癌基因c-fos、c-myc | 第92-93页 |
| ·Nucleophosmin与抑癌基因Rb | 第93-94页 |
| ·Nucleophosmin与抑癌基因p53 | 第94-95页 |
| ·Nucleophosmin小结 | 第95-96页 |
| ·MSH3(DNA错配修复蛋白) | 第96-97页 |
| ·AnnexinAl | 第97-98页 |
| ·Magonashi同源蛋白 | 第98-99页 |
| ·TRIP-1(TGF-βreceptor interacting protein) | 第99-100页 |
| ·hnRNP A2/B1 | 第100-101页 |
| ·Mitosin/CENP-F | 第101-102页 |
| ·其它的蛋白 | 第102-103页 |
| 4.人参皂甙Rg1等中药有效成分组合诱导人成骨肉瘤MG-63细胞终末分化的调控机制 | 第103-108页 |
| 结论 | 第108-109页 |
| 论文创新点 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-134页 |
| 图版及说明 | 第134-162页 |
| 缩略语 | 第162-163页 |
| 致谢 | 第163页 |
