| 英文缩略语对照表 | 第1-19页 |
| 中文摘要 | 第19-23页 |
| 英文摘要 | 第23-27页 |
| 第一部分 Dermol和Twist在人类卵巢癌、乳腺癌、胃癌中的表达及功能分析 | 第27-106页 |
| 第一章 前言 | 第27-42页 |
| ·Dermol基因的发现 | 第28-29页 |
| ·Dermol基因的结构 | 第29-32页 |
| ·Dermol与twist基因的结构比较 | 第29-31页 |
| ·Dermol基因的蛋白结构及与Twist的同源性 | 第31-32页 |
| ·Dermol、twist基因及蛋白的表达 | 第32-34页 |
| ·基因表达系列分析研究 | 第32页 |
| ·胚胎形成过程Dermol和Twist的表达、定位分析 | 第32-33页 |
| ·小鼠胚胎dermol和/或twist表达谱 | 第32-33页 |
| ·人类胚胎Dermol和/或Twist表达谱 | 第33页 |
| ·人类成年组织Dermol和Twist的表达 | 第33-34页 |
| ·诱导表达 | 第34页 |
| ·Dermol和Twist的功能研究 | 第34-37页 |
| ·在分化、发育中的作用 | 第34-35页 |
| ·抗细胞凋亡作用 | 第35页 |
| ·在肿瘤中的作用 | 第35-37页 |
| ·卵巢癌、乳腺癌、胃癌研究概述 | 第37-39页 |
| ·本课题研究的目标、内容和意义 | 第39-42页 |
| ·研究目标和内容 | 第39-40页 |
| ·研究意义 | 第40-42页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第42-63页 |
| ·实验材料 | 第42-49页 |
| ·质粒、菌株、细胞株、裸鼠、人类肿瘤及正常组织标本 | 第42页 |
| ·工具酶 | 第42页 |
| ·抗体 | 第42-43页 |
| ·主要化学试剂和耗材 | 第43-44页 |
| ·哺乳动物细胞培养试剂 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·主要溶液配置 | 第45-49页 |
| ·实验方法 | 第49-63页 |
| ·石蜡切片与免疫组织化学染色 | 第49-51页 |
| ·组织细胞苏木精、伊红染色 | 第51页 |
| ·质粒小量提取 | 第51-52页 |
| ·PCR扩增目的DNA片段 | 第52-53页 |
| ·DNA限制性内切酶酶切 | 第53页 |
| ·胶回收DNA片段 | 第53-54页 |
| ·DNA连接 | 第54页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第55页 |
| ·质粒大量提取 | 第55-56页 |
| ·细胞培养 | 第56页 |
| ·细胞转染及稳定转染细胞株的建立 | 第56-57页 |
| ·细胞裂解及蛋白质浓度测定 | 第57页 |
| ·Western blot | 第57-58页 |
| ·免疫细胞化学染色 | 第58页 |
| ·细胞台盼蓝染色 | 第58页 |
| ·Hoechst 33258染色 | 第58页 |
| ·细胞的存活率测定(MTT法) | 第58-59页 |
| ·细胞周期变化的检测 | 第59页 |
| ·软琼脂集落形成实验 | 第59-60页 |
| ·细胞迁移能力分析—划痕实验 | 第60页 |
| ·细胞侵袭能力分析—Transwell~(?)细胞侵袭实验 | 第60-61页 |
| ·细胞粘附能力分析 | 第61页 |
| ·裸鼠皮下成瘤和转移实验 | 第61-63页 |
| 第三章 Dermol和Twist在人类卵巢癌、乳腺癌、胃癌组织中的差异性表达 | 第63-75页 |
| ·结果与分析 | 第63-70页 |
| ·Dermol和Twist在人卵巢癌组织中的表达及定位分析 | 第63-65页 |
| ·Dermol和Twist在人乳腺癌组织中的表达及定位分析 | 第65-67页 |
| ·Dermol和Twist在人胃癌组织中的表达及定位分析 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第四章 人卵巢癌细胞HO-8910中Dermol过表达所致的表型变化 | 第75-85页 |
| ·结果与分析 | 第75-83页 |
| ·Dermol/pFlag-CMV2表达载体的构建,稳定转染HO-8910细胞株筛选与鉴定 | 第75-77页 |
| ·Dermol在肿瘤细胞HO-8910和Hela中的亚细胞定位分布 | 第77-78页 |
| ·稳定高表达Dermol的细胞形态观察和生长状况 | 第78-81页 |
| ·稳定高表达Dermol细胞株的筛选、western blot鉴定 | 第78-79页 |
| ·Dermol对HO-8910细胞形态的影响 | 第79页 |
| ·Dermol对HO-8910细胞生长曲线的影响 | 第79-80页 |
| ·Dermol对卵巢癌细胞HO-8910细胞周期分布的影响 | 第80-81页 |
| ·Dermol对卵巢癌细胞HO-8910裸鼠体内致瘤、转移能力的影响 | 第81-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第五章 Dermol激活PI3-K/Akt通路抗缺氧诱导的卵巢癌细胞凋亡 | 第85-94页 |
| ·结果与分析 | 第85-90页 |
| ·DFO模拟缺氧对卵巢癌HO-8910细胞生长的影响 | 第85-87页 |
| ·Dermol抗缺氧诱导的卵巢癌细胞凋亡 | 第87-89页 |
| ·Dermol激活Akt通路抗缺氧诱导的卵巢癌细胞凋亡 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-93页 |
| ·小结 | 第93-94页 |
| 第六章 Dermol通过EMT转变促进卵巢癌细胞侵袭转移 | 第94-105页 |
| ·结果与分析 | 第94-100页 |
| ·Dermol对HO-8910细胞集落形成率的影响 | 第94-95页 |
| ·Dermol对卵巢癌HO-8910细胞迁移、侵袭能力的影响 | 第95-96页 |
| ·Dermol对卵巢癌HO-8910细胞粘附能力的影响 | 第96-97页 |
| ·Dermol对卵巢癌细胞HO-8910裸鼠皮下移植瘤相关蛋白的影响 | 第97-100页 |
| ·讨论 | 第100-104页 |
| ·小结 | 第104-105页 |
| 第一部分 结论 | 第105-106页 |
| 第二部分 肿瘤细胞中dermol、twist基因的甲基化调控 | 第106-137页 |
| 第七章 前言 | 第106-112页 |
| ·DNA甲基化 | 第106-108页 |
| ·Dermol和twist甲基化研究现状 | 第108-109页 |
| ·本部分的研究目标、内容和意义 | 第109-112页 |
| ·研究目标和内容 | 第109-110页 |
| ·研究意义 | 第110-112页 |
| 第八章 材料和方法 | 第112-118页 |
| ·实验材料 | 第112-114页 |
| ·细胞株 | 第112页 |
| ·工具酶及有关试剂盒 | 第112页 |
| ·主要化学试剂和耗材 | 第112页 |
| ·哺乳动物细胞培养试剂 | 第112-113页 |
| ·主要仪器 | 第113页 |
| ·主要溶液配置 | 第113-114页 |
| ·实验方法 | 第114-118页 |
| ·细胞培养和样品处理 | 第114页 |
| ·RNA抽提 | 第114页 |
| ·DNA抽提 | 第114-115页 |
| ·重亚硫酸盐修饰DNA | 第115页 |
| ·引物设计,重亚硫酸盐测序PCR,联合重亚硫酸盐甲基化敏感位点酶切分析 | 第115-116页 |
| ·序列分析和甲基化特异性PCR(MSP) | 第116页 |
| ·RT-PCR检测 | 第116-118页 |
| 第九章 结果与分析 | 第118-132页 |
| ·Dermol基因启动子的序列分析 | 第118页 |
| ·引物设计结果 | 第118-121页 |
| ·BS-PCR结果 | 第121-122页 |
| ·联合重亚硫酸盐甲基化敏感位点酶切分析 | 第122-123页 |
| ·Dermol基因启动子在5株细胞中的甲基化状态 | 第123-124页 |
| ·Dermol基因MSP的U/M引物设计以及测序验证 | 第124-126页 |
| ·Dermol基因的甲基化特异性PCR(MSP) | 第126-127页 |
| ·Dermol基因在不同肿瘤细胞株中的表达水平 | 第127页 |
| ·Oermol基因甲基化与基因表达之间的可能关系 | 第127-129页 |
| ·Twist基因在不同肿瘤细胞株中的表达水平 | 第129页 |
| ·Twist基因在不同肿瘤细胞株中的甲基化状态 | 第129-130页 |
| ·Twist基因甲基化与基因表达之间的可能关系 | 第130-132页 |
| 第十章 讨论 | 第132-136页 |
| 第二部分 结论 | 第136-137页 |
| 参考文献 | 第137-144页 |
| 附录 综述 DNA甲基化及其研究方法 | 第144-166页 |
| 致谢 | 第166-167页 |
| 个人简历 | 第167页 |
