| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 第一章 胰蛋白酶研究进展 | 第12-39页 |
| 1. 胰蛋白酶的分布、酶原活化及结构 | 第12-15页 |
| ·分布 | 第12-13页 |
| ·酶原活化 | 第13-14页 |
| ·结构 | 第14-15页 |
| 2 甲壳动物胰蛋白酶研究 | 第15-29页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶分子性质 | 第15-17页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶酶学性质 | 第17-19页 |
| ·温度、pH 值对甲壳动物胰蛋白酶活性的影响 | 第17-18页 |
| ·激活剂、抑制剂对甲壳动物胰蛋白酶活性的影响 | 第18-19页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶底物动力学研究 | 第19页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶消化生理 | 第19-23页 |
| ·甲壳动物发育过程中胰蛋白酶活性变化的内部因素 | 第20-21页 |
| ·甲壳动物发育过程中胰蛋白酶活性变化的外部因素 | 第21-23页 |
| ·现代蛋白质分离鉴定技术及其应用前景 | 第23-29页 |
| ·双向电泳 | 第24-25页 |
| ·生物质谱 | 第25-27页 |
| ·蛋白质鉴定与生物信息学 | 第27-28页 |
| ·应用前景 | 第28-29页 |
| 3 胰蛋白酶基因的研究 | 第29-33页 |
| ·真菌 | 第29-30页 |
| ·脊椎动物 | 第30-31页 |
| ·昆虫 | 第31页 |
| ·甲壳动物 | 第31-33页 |
| 4 胰蛋白酶的应用价值 | 第33-37页 |
| ·胰蛋白酶在医药方面的应用 | 第33-34页 |
| ·胰蛋白酶在轻工业方面的应用 | 第34-35页 |
| ·胰蛋白酶及其基因的科研价值 | 第35-37页 |
| ·胰蛋白酶作为科研工作的工具酶 | 第35页 |
| ·胰蛋白酶作为蛋白质工程模型 | 第35-36页 |
| ·胰蛋白酶基因的研究价值 | 第36-37页 |
| 5 太平洋磷虾研究现状及其胰蛋白酶样酶研究意义 | 第37-39页 |
| 第二章 太平洋磷虾胰蛋白酶样酶分离纯化及鉴定 | 第39-63页 |
| 1 实验材料与方法 | 第39-52页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·实验仪器 | 第40页 |
| ·实验药品 | 第40-41页 |
| ·胰蛋白酶样酶纯化鉴定路线 | 第41页 |
| ·粗酶液制备 | 第41-42页 |
| ·粗酶液中胰蛋白酶样酶分离鉴定 | 第42-49页 |
| ·试剂配制 | 第42-44页 |
| ·样品制备 | 第44-45页 |
| ·双向电泳 | 第45-48页 |
| ·液相-质谱联用 | 第48-49页 |
| ·胰蛋白酶样酶纯化与鉴定 | 第49-51页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第49页 |
| ·DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第49页 |
| ·Sephadex G100 凝胶过滤层析 | 第49-50页 |
| ·Benzamidine Sepharose4B 亲和层析 | 第50-51页 |
| ·生物质谱鉴定 | 第51页 |
| ·可溶性蛋白质浓度测定 | 第51页 |
| ·酶活性测定方法 | 第51页 |
| ·SDS-PAGE | 第51-52页 |
| 2 实验结果及讨论 | 第52-62页 |
| ·粗酶液中胰蛋白酶样酶分离鉴定 | 第52-58页 |
| ·实验结果 | 第52-55页 |
| ·双向电泳方法讨论 | 第55-58页 |
| ·胰蛋白酶样酶纯化与鉴定 | 第58-62页 |
| 3 小结 | 第62-63页 |
| 第三章 太平洋磷虾胰蛋白酶样酶酶学性质研究 | 第63-84页 |
| 1 实验材料与方法 | 第63-69页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·实验仪器 | 第63-64页 |
| ·实验药品 | 第64页 |
| ·pH 对酶促反应速率的影响 | 第64页 |
| ·温度对酶促反应速率的影响 | 第64-65页 |
| ·温度对酶热稳定性的影响 | 第65页 |
| ·几种金属离子对酶促反应速率的影响 | 第65页 |
| ·几种有机溶剂对酶促反应速率的影响 | 第65-66页 |
| ·几种抑制剂对酶促反应速率的影响 | 第66页 |
| ·BApNA 酶促反应底物动力学 | 第66页 |
| ·Benzamidine 酶促反应抑制动力学 | 第66-67页 |
| ·胰蛋白酶样酶活性功能基团的研究 | 第67-69页 |
| ·巯基与酶活性的关系 | 第67页 |
| ·组氨酸残基与酶活性的关系 | 第67-68页 |
| ·精氨酸残基与酶活性的关系 | 第68页 |
| ·色氨酸残基与酶活性的关系 | 第68页 |
| ·氨基与酶活性的关系 | 第68页 |
| ·羧基与酶活性的关系 | 第68-69页 |
| 2 结果与讨论 | 第69-82页 |
| ·pH 对酶促反应速率的影响 | 第69-70页 |
| ·温度对酶促反应速率的影响 | 第70-71页 |
| ·温度对酶热稳定性的影响 | 第71页 |
| ·几种金属离子对酶促反应速率的影响 | 第71-73页 |
| ·几种有机溶剂对酶促反应速率的影响 | 第73-74页 |
| ·几种抑制剂对酶促反应速率的影响 | 第74-75页 |
| ·BApNA 酶促反应底物动力学 | 第75-77页 |
| ·Benzamidine 酶促反应抑制动力学 | 第77页 |
| ·胰蛋白酶样酶活性功能基团的研究 | 第77-82页 |
| ·巯基与酶活性的关系 | 第78页 |
| ·组氨酸残基与酶活性的关系 | 第78-79页 |
| ·色氨酸残基与酶活性的关系 | 第79-80页 |
| ·精氨酸残基与酶活性的关系 | 第80-81页 |
| ·氨基与酶活性的关系 | 第81-82页 |
| ·羧基与酶活性的关系 | 第82页 |
| 3 小结 | 第82-84页 |
| 第四章 几种甲壳动物胰蛋白酶基因片段克隆与序列分析 | 第84-142页 |
| 1 实验材料与方法 | 第84-95页 |
| ·实验材料 | 第84-88页 |
| ·实验仪器 | 第88页 |
| ·药品 | 第88-89页 |
| ·试剂配制 | 第89-90页 |
| ·DNA 提取 | 第90-91页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶基因保守片段的扩增 | 第91-93页 |
| ·简并性 PCR 引物的设计 | 第91-92页 |
| ·PCR 扩增 | 第92页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第92-93页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶基因保守片段的克隆及测序 | 第93-95页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第93页 |
| ·连接反应 | 第93-94页 |
| ·转化 | 第94页 |
| ·蓝/白斑筛选阳性克隆 | 第94页 |
| ·克隆结果 PCR 检测及测序 | 第94-95页 |
| ·序列分析 | 第95页 |
| 2 结果与讨论 | 第95-141页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第95-96页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶基因的扩增 | 第96页 |
| ·胰蛋白酶基因片段克隆、测序及序列分析 | 第96-128页 |
| ·太平洋磷虾 | 第96-100页 |
| ·南极大磷虾 | 第100-103页 |
| ·中国毛虾 | 第103-107页 |
| ·中国明对虾 | 第107-110页 |
| ·刀额新对虾 | 第110-114页 |
| ·脊尾白虾 | 第114-117页 |
| ·日本蟳 | 第117-121页 |
| ·三疣梭子蟹 | 第121-124页 |
| ·中华绒螯蟹 | 第124-127页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶基因片段结构分析 | 第127-128页 |
| ·胰蛋白酶序列相似性及差异分析 | 第128-141页 |
| ·甲壳动物胰蛋白酶序列保守性 | 第135页 |
| ·系统进化分析 | 第135-136页 |
| ·氨基酸组成分析 | 第136-141页 |
| 3 小结 | 第141-142页 |
| 结论 | 第142-144页 |
| 参考文献 | 第144-163页 |
| 致谢 | 第163-164页 |
| 已完成和发表的文章 | 第164页 |
