| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 禽传染性支气管炎概述 | 第15-16页 |
| 前期工作基础 | 第16-17页 |
| 存在的问题 | 第17页 |
| 本研究的意义 | 第17-18页 |
| 第一章 IBV肾型分离株SAIBk株全基因组序列测定与分析 | 第18-38页 |
| 摘要 | 第18页 |
| 1. 引言 | 第18-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-29页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·IBV肾型分离株和鸡胚 | 第19页 |
| ·宿主菌、质粒和分子生物学试剂 | 第19页 |
| ·生化试剂 | 第19-20页 |
| ·器皿及试剂处理 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-29页 |
| ·病毒培养及致鸡胚病变观察 | 第20页 |
| ·病毒的纯化及电镜观察 | 第20页 |
| ·病毒RNA提取 | 第20-21页 |
| ·SAIBk株基因组的RT-PCR分段扩增 | 第21-22页 |
| ·3′-RACE获取基因组3′末端片断 | 第22-24页 |
| ·5′-RACE获取基因组5′末端片断 | 第24-27页 |
| ·RT-PCR产物的克隆 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第28-29页 |
| ·基因组全序列的生物信息学分析 | 第29页 |
| 3. 结果 | 第29-35页 |
| ·SAIBk株的致鸡胚病变 | 第29页 |
| ·病毒的纯化及电镜观察 | 第29-30页 |
| ·SAIBk株基因组RT-PCR分段扩增结果 | 第30页 |
| ·3′-RACE和5′-RACE获取病毒基因组末端片断结果 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR产物的克隆和序列测定结果 | 第31页 |
| ·基因组全序列的生物信息学分析结果 | 第31-35页 |
| 4. 讨论 | 第35-37页 |
| ·病毒的电镜观察 | 第35页 |
| ·SAIBk株基因组的分段扩增 | 第35-36页 |
| ·SAIBk株基因组的生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 5. 小结 | 第37-38页 |
| 第二章 11株IBV分离株3′非编码区序列的测定与分析 | 第38-52页 |
| 摘要 | 第38页 |
| 1. 引言 | 第38-39页 |
| 2. 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·种毒和鸡胚 | 第39页 |
| ·宿主菌、质粒和分子生物学试剂 | 第39页 |
| ·生化试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·方法 | 第40-43页 |
| ·病毒的增殖 | 第40页 |
| ·病毒RNA提取 | 第40页 |
| ·引物的设计与合成 | 第40页 |
| ·3′非编码区的RT-PCR扩增 | 第40-41页 |
| ·3′非编码区产物的克隆 | 第41-42页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第42页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第42页 |
| ·3′非编码区的序列分析 | 第42-43页 |
| 3. 结果 | 第43-49页 |
| ·3′非编码区序列的RT-PCR扩增结果 | 第43页 |
| ·3′非编码区的序列测定和基本特性分析 | 第43-44页 |
| ·3′非编码区序列的同源性分析 | 第44-49页 |
| ·3′非编码区核苷酸序列的进化树分析 | 第49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| ·IBV 3′非编码区的特征 | 第49-50页 |
| ·3′非编码区的序列分析 | 第50-51页 |
| 5. 小结 | 第51-52页 |
| 第三章 S1、M、N基因荧光融合表达质粒的构建及表达研究 | 第52-70页 |
| 摘要 | 第52页 |
| 1. 引言 | 第52-53页 |
| 2. 材料与方法 | 第53-58页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·病毒、细胞株、质粒和宿主菌 | 第53-54页 |
| ·工具酶及试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器设备 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-58页 |
| ·病毒RNA提取 | 第54页 |
| ·S1、M、N基因的RT-PCR扩增 | 第54-55页 |
| ·S1、M、N基因荧光融合表达质粒的构建与鉴定 | 第55-57页 |
| ·S1、M、N蛋白的定位序列分析 | 第57-58页 |
| ·荧光融合表达质粒的转染和表达检测 | 第58页 |
| 3. 结果 | 第58-66页 |
| ·S1、M、N基因的RT-PCR扩增结果 | 第58-59页 |
| ·S1、M、N基因融合表达质粒的酶切鉴定 | 第59-60页 |
| ·S1、M、N基因融合表达质粒的测序鉴定 | 第60页 |
| ·S1、M、N蛋白的定位序列分析结果 | 第60-61页 |
| ·荧光融合表达质粒在细胞中的表达结果 | 第61-66页 |
| 4. 讨论 | 第66-69页 |
| ·报告基因的选择 | 第66页 |
| ·核定位信号分析 | 第66-67页 |
| ·S1、M、N基因在细胞中的表达 | 第67-69页 |
| 5. 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 SAIBk株S1、M、N基因真核表达质粒的构建 | 第70-83页 |
| 摘要 | 第70页 |
| 1. 引言 | 第70-71页 |
| 2. 材料与方法 | 第71-76页 |
| ·材料 | 第71-72页 |
| ·质粒、宿主菌和细胞株 | 第71页 |
| ·工具酶及试剂 | 第71页 |
| ·主要仪器设备 | 第71-72页 |
| ·方法 | 第72-76页 |
| ·S1、M、N基因的PCR扩增 | 第72页 |
| ·S1、M、N基因真核表达质粒的构建 | 第72-74页 |
| ·S1、M、N基因真核表达质粒的鉴定 | 第74页 |
| ·真核表达质粒的表达检测 | 第74-76页 |
| 3. 结果 | 第76-79页 |
| ·S1、M、N基因的PCR扩增结果 | 第76页 |
| ·S1、M、N基因真核表达质粒的鉴定 | 第76-77页 |
| ·真核表达质粒的表达检测结果 | 第77-79页 |
| 4. 讨论 | 第79-81页 |
| ·目的基因的选择 | 第79-80页 |
| ·载体的选择 | 第80页 |
| ·真核表达质粒的转染 | 第80-81页 |
| ·真核表达质粒表达产物的检测 | 第81页 |
| 5. 小结 | 第81-83页 |
| 第五章 SAIBk株S1、M、N基因DNA疫苗的制备和免疫原性研究 | 第83-99页 |
| 摘要 | 第83页 |
| 1. 引言 | 第83-84页 |
| 2. 材料与方法 | 第84-88页 |
| ·材料 | 第84-85页 |
| ·质粒、实验动物和攻毒用毒株 | 第84页 |
| ·主要试剂 | 第84页 |
| ·主要仪器 | 第84-85页 |
| ·方法 | 第85-88页 |
| ·质粒的制备与纯化 | 第85-86页 |
| ·脂质体的制备 | 第86页 |
| ·疫苗的配制 | 第86页 |
| ·S1、M、N基因DNA疫苗的免疫原性比较研究 | 第86-87页 |
| ·脂质体包裹的三基因混合DNA疫苗的免疫原性研究 | 第87-88页 |
| 3. 结果 | 第88-95页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第88-89页 |
| ·脂质体及疫苗的制备结果 | 第89页 |
| ·S1、M、N基因DNA疫苗的免疫原性比较结果 | 第89-92页 |
| ·脂质体包裹的三基因混合DNA疫苗的免疫原性比较结果 | 第92-95页 |
| 4. 讨论 | 第95-98页 |
| ·S1、M、N单基因DNA疫苗的免疫原性 | 第95-96页 |
| ·三基因混合DNA疫苗的免疫原性 | 第96页 |
| ·脂质体包裹的三基因混合DNA疫苗的免疫原性 | 第96-97页 |
| ·DNA疫苗的免疫反应与攻毒保护 | 第97-98页 |
| 5. 小结 | 第98-99页 |
| 结论 | 第99-100页 |
| 文献综述 | 第100-118页 |
| (一) IB的概述 | 第100-101页 |
| (二) IBV的分子生物学研究进展 | 第101-107页 |
| (三) IB的疫苗及佐剂研究 | 第107-111页 |
| (四) DNA疫苗的研究进展 | 第111-118页 |
| 参考文献 | 第118-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 附录 | 第132-141页 |
| 附录1. 英汉缩略名词对照表 | 第132-133页 |
| 附录2. SAIBk株的全基因序列 | 第133-141页 |
| 在读期间发表的论文、论著及获奖情况 | 第141页 |
