摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-7页 |
引言 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-21页 |
1 植物在逆境下的渗透调节的研究现状 | 第8-10页 |
2 甜菜碱的研究现状 | 第10-15页 |
·BADH 的研究现状 | 第13-14页 |
·CMO 的研究现状 | 第14-15页 |
3 植物基因分离策略 | 第15-20页 |
·同源序列克隆基因 | 第16页 |
·表型基因克隆法 | 第16-17页 |
·转座子标签技术 | 第17页 |
·差异显示法 | 第17-18页 |
·功能克隆 | 第18页 |
·PCR 扩增克隆 | 第18页 |
·芯片技术 | 第18-19页 |
·定位克隆技术 | 第19页 |
·减法杂交技术 | 第19页 |
·人工合成并克隆基因 | 第19-20页 |
4 麦冬研究现状 | 第20页 |
5 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 甜菜碱合成酶基因的克隆 | 第21-43页 |
1 材料与实验方法 | 第21-30页 |
·麦冬总RNA 的提取 | 第21页 |
·植物材料及试剂 | 第21页 |
·总RNA 的提取 | 第21页 |
·RNA 完整性及纯度检测 | 第21页 |
·甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的克隆 | 第21-29页 |
·材料试剂 | 第21-22页 |
·反转录合成cDNA | 第22页 |
·获得部分编码区片段 | 第22-25页 |
·5’RACE | 第25-26页 |
·3’RACE | 第26-27页 |
·BADH 全长序列的获得 | 第27-28页 |
·BADH 编码区的获得 | 第28-29页 |
·胆碱单加氧酶(CMO)基因的克隆 | 第29-30页 |
·材料试剂 | 第29页 |
·获得cDNA | 第29页 |
·获得部分编码区片段 | 第29页 |
·5’RACE | 第29页 |
·3’RACE | 第29页 |
·CMO cDNA 全长序列的获得 | 第29-30页 |
·CMO 编码区的获得 | 第30页 |
2 结果 | 第30-42页 |
·总RNA 的提取效果与纯度 | 第30-31页 |
·甜菜碱醛脱氢酶(BADH) | 第31-37页 |
·胆碱单氧化酶(CMO) | 第37-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
第三章 麦冬甜菜碱合成酶基因的植物表达载体的构建 | 第43-48页 |
1 材料试剂 | 第43页 |
·材料 | 第43页 |
·试剂 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-44页 |
·BADH 的植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
·CMO 的植物表达载体的构建 | 第44页 |
3 结果 | 第44-47页 |
·BADH 的植物表达载体pCU1303-BADH | 第44-46页 |
·CMO 的植物表达载体pCU1303-CMO | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
第四章 麦冬甜菜碱合成酶基因的表达 | 第48-53页 |
1、甜菜碱醛脱氢酶(BADH)的Northen 检测 | 第48-51页 |
·材料及试剂 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-50页 |
·总RNA 的提取 | 第48页 |
·Northen 杂交分析 | 第48-50页 |
·结果 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51页 |
2、胆碱单氧化酶(CMO)的Northen 检测 | 第51-53页 |
·材料与试剂 | 第51页 |
·实验方法 | 第51页 |
·结果 | 第51-52页 |
·讨论 | 第52-53页 |
第五章 结论 | 第53-55页 |
1、主要结论 | 第53-54页 |
2、存在问题及有待进一步开展的工作 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录 | 第61-63页 |
个人简介 | 第63-64页 |
导师简介 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
博硕士学位论文同意发表声明 | 第66页 |