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麦冬(Ophiopogon japonicus)甜菜碱合成酶基因的克隆与表达研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
引言第7-8页
第一章 文献综述第8-21页
 1 植物在逆境下的渗透调节的研究现状第8-10页
 2 甜菜碱的研究现状第10-15页
   ·BADH 的研究现状第13-14页
   ·CMO 的研究现状第14-15页
 3 植物基因分离策略第15-20页
   ·同源序列克隆基因第16页
   ·表型基因克隆法第16-17页
   ·转座子标签技术第17页
   ·差异显示法第17-18页
   ·功能克隆第18页
   ·PCR 扩增克隆第18页
   ·芯片技术第18-19页
   ·定位克隆技术第19页
   ·减法杂交技术第19页
   ·人工合成并克隆基因第19-20页
 4 麦冬研究现状第20页
 5 研究的目的与意义第20-21页
第二章 甜菜碱合成酶基因的克隆第21-43页
 1 材料与实验方法第21-30页
   ·麦冬总RNA 的提取第21页
     ·植物材料及试剂第21页
     ·总RNA 的提取第21页
     ·RNA 完整性及纯度检测第21页
   ·甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因的克隆第21-29页
     ·材料试剂第21-22页
     ·反转录合成cDNA第22页
     ·获得部分编码区片段第22-25页
     ·5’RACE第25-26页
     ·3’RACE第26-27页
     ·BADH 全长序列的获得第27-28页
     ·BADH 编码区的获得第28-29页
   ·胆碱单加氧酶(CMO)基因的克隆第29-30页
     ·材料试剂第29页
     ·获得cDNA第29页
     ·获得部分编码区片段第29页
     ·5’RACE第29页
     ·3’RACE第29页
     ·CMO cDNA 全长序列的获得第29-30页
     ·CMO 编码区的获得第30页
 2 结果第30-42页
   ·总RNA 的提取效果与纯度第30-31页
   ·甜菜碱醛脱氢酶(BADH)第31-37页
   ·胆碱单氧化酶(CMO)第37-42页
 3 讨论第42-43页
第三章 麦冬甜菜碱合成酶基因的植物表达载体的构建第43-48页
 1 材料试剂第43页
   ·材料第43页
   ·试剂第43页
 2 实验方法第43-44页
   ·BADH 的植物表达载体的构建第43-44页
   ·CMO 的植物表达载体的构建第44页
 3 结果第44-47页
   ·BADH 的植物表达载体pCU1303-BADH第44-46页
   ·CMO 的植物表达载体pCU1303-CMO第46-47页
 4 讨论第47-48页
第四章 麦冬甜菜碱合成酶基因的表达第48-53页
 1、甜菜碱醛脱氢酶(BADH)的Northen 检测第48-51页
   ·材料及试剂第48页
   ·实验方法第48-50页
     ·总RNA 的提取第48页
     ·Northen 杂交分析第48-50页
   ·结果第50-51页
   ·讨论第51页
 2、胆碱单氧化酶(CMO)的Northen 检测第51-53页
   ·材料与试剂第51页
   ·实验方法第51页
   ·结果第51-52页
   ·讨论第52-53页
第五章 结论第53-55页
 1、主要结论第53-54页
 2、存在问题及有待进一步开展的工作第54-55页
参考文献第55-61页
附录第61-63页
个人简介第63-64页
导师简介第64-65页
致谢第65-66页
博硕士学位论文同意发表声明第66页

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