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激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其特性研究

第一章 文献回顾第1-29页
 一、转化生长因子-β超家族及其信号传导通路第9-14页
  1.TGF-β超家族成员的受体第9-10页
  2.受体下游的信号分子—Smad第10-11页
  3.由Smad介导的细胞内信号传导通路第11-14页
 二、激活素及激活素受体相互作用蛋白第14-20页
  1.激活素及其受体第14-17页
  2.激活素生物学效应第17-18页
  3.激活素受体相互作用蛋白及其在激活素信号传导中的作用第18-20页
 三、激活素的生理功能及其临床意义第20-25页
  1.激活素在机体不同组织器官的作用第20-23页
  2.激活素与炎症和机体急性期反应的关系第23-24页
  3.激活素在病理创伤中的作用第24-25页
 四、本课题主要研究技术内容的国内外发展现状与趋势第25-29页
  1.本课题研究目的和具体内容第26-27页
  2.本项目的特色第27-29页
英文词表第29-30页
第二章 材料与方法第30-52页
 一、实验动物第30页
 二、主要试剂第30页
 三、试剂配制第30-33页
 四、主要仪器第33-34页
 五、主要方法第34-52页
  1.ActRIP3基因克隆第34页
  2.质粒构建第34-38页
  3.GST-ActRIP3融合蛋白表达及抗ActRIP3抗体制备第38-40页
  4.ActRIP3和激活素ⅡA型受体间的相互作用实验第40-43页
  5.ActRIP3的组织学分布第43-44页
  6.ActRIP3的细胞内表达格局及天然成熟蛋白的表达第44-46页
  7.ActRIP3促进激活素应答的基因转录分析第46页
  8.在巨噬细胞中过表达ActRIP3对NO及IL-1 β分泌的影响第46-49页
  9.小鼠腹腔巨噬细胞ActRIP3基因被沉默后对NO分泌的影响第49-50页
  10.流式细胞仪分析过表达ActRIP3对巨噬细胞表面ActRⅡA受体表达的影响第50-51页
  11.统计学处理:第51-52页
   采用t检验进行统计学分析。第51-52页
第三章 结果第52-67页
 一、ActRIP3基因克隆和序列分析第52-53页
 二、GST融合蛋白的诱导表达及纯化第53页
 三、抗GST-ActRIP3多克隆抗体的制备与纯化第53-55页
 四、ActRIP3与ActRⅡA的相互作用第55-57页
  1.哺乳动物细胞双杂交实验分析ActRIP3和ActRⅡA相互作用第55页
  2.PULL-DOWN实验分析ActRIP3和天然激活素ⅡA型受体间的相互作用第55-56页
  3.免疫沉淀分析ActRIP3与ActRⅡA的相互作用第56-57页
 五、ActRIP3在小鼠组织中的表达第57-60页
  1.ActRIP3 mRNA在小鼠组织中的表达第57-58页
  2.ActRIP3蛋白在小鼠组织中的表达第58-60页
 六、ActRIP3的细胞内表达格局及天然成熟蛋白的表达第60-62页
  1.ActRIP3的细胞内表达格局第60页
  2.Western杂交分析天然成熟的ActRIP3的表达及分子量第60-62页
 七、ActRIP3促进激活素应答的信号传导第62页
 八、过表达ActRIP3对小鼠巨噬细胞功能的影响第62-64页
 九、ActRIP3基因沉默对小鼠腹腔巨噬细胞NO分泌的影响第64-65页
 十、过表达ActRIP3促进巨噬细胞表面ActRⅡA受体表达第65-67页
讨论第67-81页
 一、激活素受体相互作用蛋白3(ActRIP3)的发现及其与ActRIP1,ActRIP3基因结构比较第67-68页
 二、ActRIP3的组织学分布及可能的生物学作用第68-69页
 三、ActRIPs在激活素信号传导中的意义第69-71页
 四、其他调节激活素信号传导的影响因子第71-73页
 五、激活素信号传导的研究对于激活素生物学作用的意义第73-74页
 六、蛋白质相互作用研究技术第74-77页
  1.双杂交系统第74页
  2.免疫共沉淀技术第74页
  3.Pull-down实验第74-77页
 七、蛋白相互作用图谱的绘制第77-81页
小结第81-82页
参考文献第82-91页
攻读博士期间主要学术成果第91-93页
中文摘要第93-98页
ABSTRACT第98-104页
致谢第104页

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