| 中文摘要 | 第4-7页 |
| abstract | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-51页 |
| 1、丝胶蛋白概况 | 第15-27页 |
| 1.1 丝胶层状结构与化学组成 | 第15-17页 |
| 1.2 丝胶的抽提与回收 | 第17-20页 |
| 1.3 丝胶层活性物质 | 第20-22页 |
| 1.4 丝胶生物活性与药理作用 | 第22-27页 |
| 2、丝胶蛋白用于细胞培养与冻存的概况 | 第27-33页 |
| 2.1 血清替代物 | 第28-32页 |
| 2.2 冷冻保护剂 | 第32-33页 |
| 3、本论文的研究目的和研究内容 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-51页 |
| 第二章 丝胶酶水解物的制备及其血清替代效果的初步评估 | 第51-70页 |
| 1、前言 | 第51-52页 |
| 2、实验材料、试剂与主要仪器 | 第52-53页 |
| 2.1 主要材料 | 第52页 |
| 2.2 主要试剂 | 第52-53页 |
| 2.3 主要仪器 | 第53页 |
| 3、实验技术方法 | 第53-56页 |
| 3.1 丝胶蛋白的制备 | 第53-54页 |
| 3.2 蛋白酶降解 | 第54页 |
| 3.3 SDS-PAGE | 第54页 |
| 3.4 GP-HPLC | 第54页 |
| 3.5 细胞培养 | 第54-56页 |
| 3.6 显微观察方法 | 第56页 |
| 3.7 统计学处理方法 | 第56页 |
| 4、实验结果与分析 | 第56-65页 |
| 4.1 丝胶肽及其水解物的制备及其特性 | 第56-57页 |
| 4.2 L929细胞在FBS /丝胶酶水解物培养基中生长与增殖 | 第57-62页 |
| 4.3 肿瘤细胞在丝胶酶水解物培养基中的生长与增殖 | 第62-63页 |
| 4.4 杂交瘤细胞在丝胶酶水解物培养基中的生长与增殖 | 第63-65页 |
| 5、讨论 | 第65-66页 |
| 6、结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-70页 |
| 第三章 丝胶水解物对细胞的活力、周期及相关蛋白的影响 | 第70-96页 |
| 1、前言 | 第70-72页 |
| 2、实验材料、试剂和主要仪器 | 第72-73页 |
| 2.1 主要材料 | 第72页 |
| 2.2 主要试剂 | 第72页 |
| 2.3 主要仪器 | 第72-73页 |
| 3、实验技术与方法 | 第73-75页 |
| 3.1 丝胶碱水解物的制备 | 第73页 |
| 3.2 细胞培养 | 第73页 |
| 3.3 细胞的活力测试 | 第73-74页 |
| 3.4 细胞的周期分析 | 第74页 |
| 3.5 小鼠I、III型胶原 （COL I、COL III）的酶联免疫吸附（ELISA）试验 | 第74页 |
| 3.6 显微观察方法 | 第74-75页 |
| 3.7 统计学处理方法 | 第75页 |
| 4、实验结果与分析 | 第75-89页 |
| 4.1 L929细胞在血清/丝胶酶水解物的培养基中的长期生长 | 第75-78页 |
| 4.2 L929细胞在血清/丝胶碱水解物的培养基中的生长 | 第78-83页 |
| 4.3 L929细胞的活力 | 第83-86页 |
| 4.4 L929细胞的生长周期 | 第86-87页 |
| 4.5 L929细胞的胶原蛋白含量的测定 | 第87-89页 |
| 5、讨论 | 第89-90页 |
| 6、结论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-96页 |
| 第四章 丝胶碱水解物作为血清替代物对CHO及Hela细胞的系统性评估 | 第96-119页 |
| 1、前言 | 第96-98页 |
| 2、实验材料、试剂和主要仪器 | 第98-99页 |
| 2.1 主要材料 | 第98页 |
| 2.2 主要试剂 | 第98页 |
| 2.3 主要仪器 | 第98-99页 |
| 3、实验技术与方法 | 第99-101页 |
| 3.1 丝胶碱水解物的制备 | 第99页 |
| 3.2 细胞系的培养条件 | 第99页 |
| 3.3 细胞生长的评估 | 第99页 |
| 3.4 细胞增殖的评估 | 第99-101页 |
| 3.5 QRT-PCR | 第101页 |
| 3.6 统计学处理方法 | 第101页 |
| 4、实验结果与分析 | 第101-111页 |
| 4.1 细胞形态和总的存活率 | 第101-105页 |
| 4.2 细胞周期分布 | 第105-109页 |
| 4.3 相关基因表达的比较 | 第109-111页 |
| 5、讨论 | 第111-113页 |
| 6、结论 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-119页 |
| 第五章 丝胶酶水解物作为血清替代物在细胞冻存中效果的初步评估 | 第119-136页 |
| 1、前言 | 第119-121页 |
| 2、实验材料、试剂和主要仪器 | 第121-122页 |
| 2.1 主要材料 | 第121页 |
| 2.2 主要试剂 | 第121页 |
| 2.3 主要仪器 | 第121-122页 |
| 3、实验技术与方法 | 第122-124页 |
| 3.1 丝胶酶水解物的制备 | 第122页 |
| 3.2 细胞系的培养条件 | 第122页 |
| 3.3 细胞生长的评估 | 第122页 |
| 3.4 胰岛细胞的分离及培养 | 第122-123页 |
| 3.5 细胞的冻存及复苏 | 第123页 |
| 3.6 小鼠I型胶原 （COL I）的酶联免疫吸附（ELISA） 试验 | 第123-124页 |
| 3.7 大鼠胰岛素（INS）的酶联免疫吸附（ELISA）试验 | 第124页 |
| 3.8 显微观察方法 | 第124页 |
| 3.9 统计学处理方法 | 第124页 |
| 4、实验结果与分析 | 第124-131页 |
| 4.1 L929细胞细胞的冻存 | 第124-127页 |
| 4.2 大鼠胰岛细胞的冻存 | 第127-131页 |
| 5、讨论 | 第131-132页 |
| 6、结论 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-136页 |
| 攻读博士学位期间公开发表的论文 | 第136-137页 |
| 基金资助 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138-140页 |
