中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-22页 |
·猪12号染色体上基因的分离、定位现状 | 第11-14页 |
·四个候选基因的研究现状 | 第14-16页 |
·磷脂酰肌醇转移蛋白α基因(phosphatidylinositol transfer protein,alpha,PITPNA) | 第14页 |
·磷酸核糖焦磷酸合成酶连接蛋白1基因(phosphoribosylPyrophosp-hate synthetase-associated protein,PRPSAP1) | 第14-15页 |
·蛋白酶体激活亚单位3基因(Proteasome activator subunit,3,PSME3) | 第15-16页 |
·铁氧还蛋白还原酶基因(Ferredoxin reductase,FDXR) | 第16页 |
·杂种板技术用于猪的基因定位研究现状 | 第16-19页 |
·体细胞杂种板(SCHP)用于染色体区域定位 | 第17页 |
·辐射杂种板(RH)用于染色体精细定位 | 第17-19页 |
·生物信息学在猪基因组研究中的应用 | 第19-22页 |
·常用分子生物学数据库 | 第19页 |
·比较基因图谱在分离新基因中的应用 | 第19-20页 |
·表达序列标签(EST)在分离新基因中的应用 | 第20-21页 |
·基因的电子克隆策略在猪基因组研究中的应用 | 第21-22页 |
2 目的和意义 | 第22-23页 |
3 材料与方法 | 第23-33页 |
·材料 | 第23-25页 |
·样品 | 第23页 |
·猪群 | 第23-24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·主要试剂及配制 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要试剂配制 | 第24-25页 |
·主要分子生物学软件和统计软件 | 第25页 |
·方法 | 第25-33页 |
·猪候选基因的分离方法 | 第25-29页 |
·候选基因EST-重叠群的构建 | 第25页 |
·引物设计 | 第25-26页 |
·PCR扩增条件 | 第26页 |
·PCR产物的纯化、克隆和测序 | 第26-27页 |
·DNA序列同源性检索鉴定 | 第27-29页 |
·候选基因的物理定位 | 第29-30页 |
·引物设计 | 第29页 |
·PCR扩增分型方法 | 第29页 |
·数据分析方法 | 第29-30页 |
·新分离基因组织表达谱的研究方法 | 第30-31页 |
·总RNA的提取、检测、DNase-Ⅰ处理及纯化 | 第30-31页 |
·RNA的反转录(Reverse transcription RT) | 第31页 |
·PCR反应 | 第31页 |
·数据分析 | 第31页 |
·候选基因多态性检测 | 第31-33页 |
4 结果 | 第33-56页 |
·猪PITPNA和PRPSAP1基因的序列分析与氨基酸预测 | 第33-42页 |
·PITPNA基因特异引物的扩增结果 | 第33页 |
·PITPNA基因扩增产物的序列分析结果 | 第33-35页 |
·PRPSAP1基因扩增产物的序列分析结果 | 第35-37页 |
·PRPSAP1和PITPNA基因CDS的电子克隆及氨基酸预测 | 第37-42页 |
·猪PITPNA和PRPSAP1基因的染色体定位结果 | 第42-48页 |
·染色体区域定位结果 | 第43-46页 |
·精细定位结果 | 第46-48页 |
·猪PITPNA和PRPSAP1基因的组织表达谱结果 | 第48-51页 |
·总RNA的提取和检测结果 | 第48-49页 |
·RT-PCR扩增的结果 | 第49-51页 |
·猪PSME3和FDXR基因DNA多态性检测结果 | 第51-56页 |
·检测片段的PCR扩增 | 第51-52页 |
·SNP检测 | 第52页 |
·PSME3和FDXR基因与部分生产性状的关联分析结果 | 第52-56页 |
5 讨论 | 第56-60页 |
·关于猪12号染色体上候选基因的选取 | 第56页 |
·关于PITPNA和PRPSAP1基因的RH物理定位 | 第56-57页 |
·关于PITPNA和PRPSAP1基因的组织表达谱 | 第57-58页 |
·关于PSME3基因和FDXR基因的多态检测及性状的初步关联分析 | 第58-60页 |
6 小结 | 第60-61页 |
·本研究获得的结果 | 第60页 |
·本研究的创新点 | 第60页 |
·本研究的不足之处 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
附录 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |