| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-16页 |
| 第一章 腺病毒及其载体应用研究进展 | 第16-31页 |
| ·腺病毒的一般生物学特性 | 第16-18页 |
| ·腺病毒的感染周期 | 第16-17页 |
| ·腺病毒基因的转录与复制 | 第17-18页 |
| ·腺病毒载体的构建 | 第18-27页 |
| ·第一代腺病毒载体构建 | 第19-23页 |
| ·第二代腺病毒载体构建 | 第23-25页 |
| ·第三代腺病毒载体构建 | 第25-27页 |
| ·腺病毒载体的优点 | 第27-28页 |
| ·宿主范围广, 对人致病性低 | 第27-28页 |
| ·在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因 | 第28页 |
| ·能有效进行增殖，滴度高 | 第28页 |
| ·与人类基因同源 | 第28页 |
| ·不整合到染色体中，无插入致突变性 | 第28页 |
| ·能在悬浮培养液中扩增 | 第28页 |
| ·能同时表达多个基因 | 第28页 |
| ·腺病毒载体的应用 | 第28-31页 |
| ·癌症的基因治疗 | 第29页 |
| ·遗传疾病的基因治疗 | 第29页 |
| ·其他疗法 | 第29-30页 |
| ·其他用途 | 第30-31页 |
| 第二章 人乳铁蛋白转基因研究现状 | 第31-48页 |
| ·人乳铁蛋白的结构与生物学功能 | 第31-33页 |
| ·人乳铁蛋白的结构及性质 | 第31-32页 |
| ·人乳铁蛋白的生物学功能 | 第32-33页 |
| ·人乳铁蛋白转基因研究 | 第33-36页 |
| ·利用动物乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白现状 | 第36-45页 |
| ·表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·乳清酸蛋白基因调控序列 | 第38-39页 |
| ·酪蛋白基因调控序列 | 第39页 |
| ·β—乳球蛋白基因调控序列 | 第39-40页 |
| ·影响外源基因表达效率的因素及提高措施 | 第40页 |
| ·位置效应 | 第40-41页 |
| ·内含子对转基因动物基因表达效率的影响 | 第41-42页 |
| ·基质结合区影响转基因动物基因表达 | 第42-43页 |
| ·真核m RNA 5′和3′非翻译区对基因表达的影响 | 第43-44页 |
| ·外源基因结构的影响 | 第44-45页 |
| ·对重组人乳铁蛋白主要理化性质和生物活性的分析 | 第45-48页 |
| 第三章 人乳铁蛋白cDNA 序列的克隆及真核表达载体的构建 | 第48-64页 |
| ·材料与方法 | 第48-56页 |
| ·材料 | 第48-50页 |
| ·方法 | 第50-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-62页 |
| ·hLTF 全长cDNA 的扩增与序列分析 | 第56-59页 |
| ·hLTF 表达载体的构建 | 第59-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·人乳铁蛋白基因序列的分离、克隆 | 第62页 |
| ·人乳铁蛋白表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第四章 人乳铁蛋白cDNA 的细胞表达 | 第64-74页 |
| ·材料与方法 | 第64-67页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·方法 | 第65-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-71页 |
| ·CHO 细胞对 Geneticin 的抗性实验 | 第67-68页 |
| ·转染 C057、293、CHO 细胞结果 | 第68-69页 |
| ·转染 C057、293、CHO 细胞mRNA 检测 | 第69-70页 |
| ·Western blotting 检测结果 | 第70页 |
| ·重组人乳铁蛋白生物活性检测结果 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| ·关于表达载体的线性化 | 第71页 |
| ·关于双标记筛选表达载体 | 第71-72页 |
| ·关于外源基因导入方法 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第五章 细菌内高效制备重组人乳铁蛋白腺病毒载体的研究 | 第74-82页 |
| ·材料和方法 | 第74-76页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·重组穿梭载体的构建 | 第75页 |
| ·重组hLTF 腺病毒载体的构建 | 第75页 |
| ·293 细胞中包装获得重组hLTF 腺病毒 | 第75页 |
| ·腺病毒滴度测定 | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-79页 |
| ·腺病毒载体的构建 | 第76-78页 |
| ·腺病毒生产中细胞变化 | 第78页 |
| ·腺病毒滴度及 PCR 鉴定结果 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| ·细菌内同源重组构建重组腺病毒方法 | 第79-80页 |
| ·关于大质粒转化 | 第80页 |
| ·关于腺病毒及其载体 | 第80-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 第六章 细胞内高效制备重组人乳铁蛋白腺病毒载体的研究 | 第82-87页 |
| ·材料和方法 | 第82-83页 |
| ·材料 | 第82页 |
| ·穿梭载体的构建 | 第82页 |
| ·重组腺病毒载体的生产 | 第82-83页 |
| ·腺病毒滴度测定 | 第83页 |
| ·腺病毒鉴定 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-84页 |
| ·重组腺病毒载体的构建 | 第83-84页 |
| ·293 转染后细胞病理变化 | 第84页 |
| ·重组腺病毒hLTF 的鉴定结果 | 第84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第七章 重组腺病毒在兔和羊乳腺中高效表达的研究 | 第87-92页 |
| ·材料和方法 | 第87-88页 |
| ·材料 | 第87页 |
| ·方法 | 第87-88页 |
| ·结果与分析 | 第88-90页 |
| ·乳腺上皮细胞体外感染实验 | 第88-89页 |
| ·重组腺病毒导入乳腺实验 | 第89-90页 |
| ·讨论 | 第90-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 附录 | 第101-108页 |
| 附录 1 人乳铁蛋白cDNA 序列 | 第101-102页 |
| 附录 2 人乳铁蛋白基因测序报告 | 第102-108页 |
| 缩略词和中英文对照表 | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简介 | 第111页 |
