| 缩写词 | 第1-13页 |
| 摘要 | 第13-15页 |
| ABSTRACT | 第15-17页 |
| 前言 | 第17-21页 |
| 1 文献综述 | 第21-33页 |
| ·植物花粉发育过程中相关基因的研究 | 第21-24页 |
| ·与花粉发育起始相关的基因 | 第21-22页 |
| ·与减数分裂相关的基因 | 第22-24页 |
| ·减数分裂前期Ⅰ | 第22页 |
| ·减数分裂后期 | 第22-23页 |
| ·胞质分裂 | 第23页 |
| ·四分体阶段 | 第23页 |
| ·绒毡层 | 第23-24页 |
| ·与花粉有丝分裂Ⅰ相关的基因 | 第24页 |
| ·生殖细胞有丝分裂中的相关基因 | 第24页 |
| ·RNA干扰原理及其应用 | 第24-33页 |
| ·RNAi的发现 | 第25-26页 |
| ·RNAi作用机制 | 第26-29页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第29-31页 |
| ·细胞信号传递途经分析 | 第29页 |
| ·基因功能的检测 | 第29-31页 |
| ·基因治疗 | 第31页 |
| ·RNAi存在的问题和展望 | 第31-33页 |
| 2 BcMF10基因的序列分析 | 第33-39页 |
| ·材料与方法 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·基因序列 | 第33页 |
| ·核苷酸序列和氨基酸序列的分析 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·BcMF10基因核苷酸序列和氨基酸序列的分析 | 第34-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 3 BcMF10基因反义及RNAi表达载体的构建 | 第39-55页 |
| ·材料与方法 | 第39-46页 |
| ·菌株和质粒 | 第39页 |
| ·反义基因片段的获得 | 第39-41页 |
| ·CaMV35S组成型启动子的反义表达载体构建 | 第41-42页 |
| ·双元载体DBI121制备 | 第41页 |
| ·反义BcMF10基因片段的制备 | 第41页 |
| ·表达质粒的构建过程 | 第41-42页 |
| ·pBI35S-BcMF10A质粒直接转化农杆菌 | 第42页 |
| ·BcA9启动子组织特异型表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·BcA9启动子的获得 | 第42-43页 |
| ·双元载体pBI121制备 | 第43页 |
| ·反义基因片段的制备 | 第43页 |
| ·表达质粒的构建过程 | 第43页 |
| ·农杆菌的冻融法转化 | 第43页 |
| ·农杆菌中质粒的鉴定 | 第43页 |
| ·BcMF10基因RNAi表达载体的构建 | 第43-46页 |
| ·正义及反义片段的获得 | 第43-45页 |
| ·双元载体的制备 | 第45页 |
| ·BcMF10基因正义和反义基因片段的制备 | 第45页 |
| ·表达质粒的构建过程 | 第45-46页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制各 | 第46页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第46页 |
| ·农杆菌质粒的鉴定 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-54页 |
| ·反义BcMF10基因片段的获得 | 第46-48页 |
| ·CaMV35S组成型启动子的表达载体构建 | 第48-49页 |
| ·BcA9启动子绒毡层组织特异型表达载体的构建 | 第49-51页 |
| ·BcMF10基因RNAi表达载体的构建 | 第51-54页 |
| ·正义及反义片段的获得 | 第51页 |
| ·RNAi表达载体的构建 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| 4 BcMF10基因反义及RNAi表达载体转化菜心 | 第55-61页 |
| ·材料与方法 | 第55-57页 |
| ·植物材料、菌株及抗生素 | 第55页 |
| ·培养基 | 第55-56页 |
| ·无菌苗的培养 | 第56页 |
| ·预培养 | 第56页 |
| ·共培养 | 第56-57页 |
| ·分化培养 | 第57页 |
| ·转基因苗生根与移栽 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-61页 |
| 5 转基因植株的分子检测与形态学观察 | 第61-75页 |
| ·材料与方法 | 第61-67页 |
| ·植物材料及试剂 | 第61-62页 |
| ·植物基因组DNA和总RNA的提取 | 第62-64页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第64页 |
| ·转化植株的X-Gluc组织化学染色检测 | 第64页 |
| ·转化植株的Southern印迹杂交和Northern印迹杂交检测 | 第64-67页 |
| ·Southern印迹杂交检测 | 第64-66页 |
| ·Nouthern印迹杂交检测 | 第66-67页 |
| ·转基因植株的花粉萌发试验 | 第67页 |
| ·结果与分析 | 第67-72页 |
| ·植物基因组DNA和总RNA的提取 | 第67页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第67-69页 |
| ·转化植株的X-Gluc组织化学染色检测 | 第69-70页 |
| ·转化植株的Southern印迹杂交和Northern印迹杂交检测 | 第70-71页 |
| ·Southern印迹杂交检测 | 第70-71页 |
| ·Northern印迹杂交检测 | 第71页 |
| ·转基因植株花粉萌发试验 | 第71-72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| 结论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-82页 |
