| 论文独创性声明 | 第1页 |
| 关于论文使用授权的声明 | 第3-4页 |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-46页 |
| 第一章 生长素极性运输研究进展 | 第15-26页 |
| 1 生长素极性运输的生理特点 | 第16页 |
| 2 生长素极性运输的机制 | 第16-23页 |
| ·生长素极性运输的化学渗透偶联学说 | 第16-18页 |
| ·生长素极性运输的载体 | 第18-20页 |
| ·生长素内运载体AUX1 | 第18-19页 |
| ·生长素外运载体PIN1 | 第19-20页 |
| ·生长素极性运输的调控机制 | 第20-23页 |
| ·PIN1依赖于肌动蛋白(actin)的小泡进行循环运输 | 第20-21页 |
| ·NPA结合蛋白在外运载体的小泡循环中的作用 | 第21页 |
| ·生长素外运载体在膜上的靶位特异结构域 | 第21-23页 |
| 3 生长素极性运输与植物的生长发育 | 第23-25页 |
| ·生长素的极性运输与胚胎发育 | 第23-24页 |
| ·生长素的极性运输与侧根的发育 | 第24页 |
| ·生长素的极性运输与光形态建成 | 第24-25页 |
| 4 展望 | 第25-26页 |
| 第二章 桑树基因工程研究进展 | 第26-46页 |
| 1 植物基因工程 | 第26-31页 |
| ·外源基因的种类 | 第26-27页 |
| ·外源基因的载体 | 第27页 |
| ·植物遗传转化的方法 | 第27-30页 |
| ·间接导入法 | 第27-29页 |
| ·直接导入法 | 第29-30页 |
| ·转化体的筛选与转基因植物的鉴定 | 第30页 |
| ·转基因植物的田间释放及安全性评价 | 第30-31页 |
| 2 TDZ(噻重氮苯基脲)及其生物学效应 | 第31-37页 |
| ·TDZ的分子结构 | 第32页 |
| ·TDZ的细胞分裂素活性 | 第32-33页 |
| ·TDZ调节植物形态发生的作用机理 | 第33页 |
| ·TDZ在植物组织培养中的应用 | 第33-37页 |
| ·TDZ与芽的增殖与再生 | 第34-35页 |
| ·TDZ对愈伤组织的诱导 | 第35页 |
| ·TDZ与体细胞胚的发生 | 第35-36页 |
| ·TDZ与生根 | 第36-37页 |
| ·TDZ的应用前景 | 第37页 |
| 3 桑树基因工程 | 第37-46页 |
| ·桑树基因工程研究中的外源基因 | 第37-39页 |
| ·β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因 | 第37-38页 |
| ·抗菌肽基因 | 第38页 |
| ·大豆球蛋白基因 | 第38页 |
| ·几丁质酶基因 | 第38页 |
| ·水稻半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因 | 第38-39页 |
| ·桑树遗传转化方法 | 第39-42页 |
| ·叶盘转化法 | 第39-41页 |
| ·基因枪法 | 第41页 |
| ·茎尖转化法 | 第41页 |
| ·整株转化法 | 第41-42页 |
| ·桑树转基因研究进展 | 第42-43页 |
| ·桑树转基因技术存在的问题与对策 | 第43-45页 |
| ·提高遗传转化效率 | 第43-44页 |
| ·减少假转化体的发生 | 第44-45页 |
| ·分离和利用新的功能基因 | 第45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 第二部分 试验研究 | 第46-144页 |
| 第三章 毛白杨生长素内运载体基因(PtAUX1)的生物信息学分析 | 第46-59页 |
| 1 前言 | 第46-47页 |
| 2 材料与方法 | 第47-49页 |
| ·PtAUX1基因序列分析 | 第47页 |
| ·PtAUX1蛋白二级结构分析 | 第47页 |
| ·PtAUX1蛋白的跨膜结构分析 | 第47页 |
| ·PtAUX1蛋白的定位分析 | 第47-48页 |
| ·PtAUX1蛋白的同源性搜索及系统进化分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-57页 |
| ·毛白杨生长素内运载体基因(PtAUX1)的获得 | 第49页 |
| ·PtAUX1核苷酸序列及推导氨基酸序列 | 第49页 |
| ·PtAUX1推导氨基酸序列统计分析 | 第49-51页 |
| ·PtAUX1蛋白二级结构预测 | 第51-53页 |
| ·PtAUX1蛋白的跨膜结构分析 | 第53-54页 |
| ·PtAUX1蛋白的定位分析 | 第54-55页 |
| ·PtAUX1蛋白的同源性搜索 | 第55页 |
| ·PtAUX1蛋白的系统进化分析 | 第55-57页 |
| 4 小结与讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 桑树高频再生体系的建立 | 第59-97页 |
| 1 前言 | 第59-60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-65页 |
| ·试验材料 | 第60页 |
| ·供试桑品种 | 第60页 |
| ·外植体 | 第60页 |
| ·仪器设备 | 第60页 |
| ·试验方法 | 第60-65页 |
| ·消毒与接种 | 第60-61页 |
| ·培养基与培养条件 | 第61-63页 |
| ·数据统计方法 | 第63-64页 |
| ·数据分析方法 | 第64-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-91页 |
| ·桑树无菌体系的建立 | 第65页 |
| ·TDZ对桑树不同外植体愈伤组织的诱导 | 第65-83页 |
| ·TDZ对桑树幼茎和叶柄愈伤组织的诱导 | 第65-76页 |
| ·TDZ对桑树花器愈伤组织的诱导 | 第76-78页 |
| ·TDZ对桑树子叶愈伤组织的诱导 | 第78-81页 |
| ·TDZ对桑树不同外植体愈伤组织生长量的影响 | 第81-83页 |
| ·桑树不同外植体愈伤组织的不定芽分化 | 第83-84页 |
| ·桑树叶片高效再生体系的建立 | 第84-91页 |
| ·桑树叶片愈伤组织的诱导 | 第84-86页 |
| ·影响桑树叶片愈伤组织不定芽分化的因素 | 第86-88页 |
| ·桑树叶片再生体系对抗生素的敏感性 | 第88-91页 |
| 4 讨论 | 第91-94页 |
| 5 本章小结 | 第94-97页 |
| 第五章 毛白杨生长素内运载体基因(PtAUX1)转化桑树研究 | 第97-131页 |
| 1 前言 | 第97-98页 |
| 2 材料与方法 | 第98-112页 |
| ·试验材料 | 第98-99页 |
| ·植物材料 | 第98页 |
| ·质粒和菌株 | 第98页 |
| ·培养基 | 第98-99页 |
| ·试剂与仪器设备 | 第99页 |
| ·试验方法 | 第99-112页 |
| ·毛白杨生长素内运载体基因表达载体pBI121-PtAUX1的构建 | 第99-100页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第100-101页 |
| ·质粒DNA的提取与酶切 | 第101-102页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备与pBI121-PtAUX1的转化 | 第102-103页 |
| ·桑树叶盘遗传转化方法 | 第103-104页 |
| ·影响桑树遗传转化效率的因素 | 第104-105页 |
| ·转基因苗的检测 | 第105-112页 |
| 3 结果与分析 | 第112-126页 |
| ·PtAUX1表达载体pBI121-PtAUX1质粒的构建 | 第112页 |
| ·浸染农杆菌GV3101的转化与生长特性 | 第112-114页 |
| ·浸染农杆菌GV3101的转化 | 第112-113页 |
| ·浸染农杆菌GV3101的生长曲线 | 第113-114页 |
| ·影响桑树叶盘遗传转化效率的因素 | 第114-122页 |
| ·浸染菌液浓度与浸染时间对桑树遗传转化的影响 | 第114-117页 |
| ·共培养时间对桑树遗传转化的影响 | 第117-119页 |
| ·共培养基pH对桑树遗传转化的影响 | 第119-121页 |
| ·共培养基中AS浓度对桑树遗传转化的影响 | 第121-122页 |
| ·桑树叶盘遗传转化的最适条件 | 第122页 |
| ·桑树转PtAUX1基因Km抗性苗的获得 | 第122-123页 |
| ·转化处理 | 第122页 |
| ·抗性芽的筛选 | 第122-123页 |
| ·抗性苗的生根培养 | 第123页 |
| ·转基因苗的分子生物学检测 | 第123-126页 |
| ·PCR检测 | 第123-124页 |
| ·Southern blotting鉴定 | 第124-125页 |
| ·Northern blotting鉴定 | 第125-126页 |
| 4 讨论 | 第126-128页 |
| 5 本章小结 | 第128-131页 |
| 第六章 毛白杨生长素内运载体基因PtAUX1的原核表达及转基因植株的Western检测 | 第131-144页 |
| 1 前言 | 第131页 |
| 2 材料与方法 | 第131-140页 |
| ·试验材料 | 第131-132页 |
| ·植物材料 | 第132页 |
| ·宿主菌、载体与工具酶 | 第132页 |
| ·主要仪器设备与试剂 | 第132页 |
| ·试验方法 | 第132-140页 |
| ·PtAUX1基因原核表达载体的构建 | 第132-135页 |
| ·PtAUX1蛋白的诱导表达 | 第135-136页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析 | 第136-137页 |
| ·PtAUX1蛋白多克隆抗体的制备 | 第137页 |
| ·多克隆抗体效价测定(ELISA法) | 第137-138页 |
| ·多克隆抗体对PtAUX1蛋白的检测 | 第138页 |
| ·SDS-PAGE与Western印迹分析 | 第138-140页 |
| 3 结果与分析 | 第140-143页 |
| ·PtAUX1基因原核表达载体的鉴定 | 第140-141页 |
| ·PtAUX1融合蛋白的获得 | 第141页 |
| ·PtAUX1蛋白的纯化 | 第141页 |
| ·PtAUX1蛋白多克隆抗体的制备与效价测定 | 第141页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第141-142页 |
| ·转基因桑树中PtAUX1基因在蛋白质水平的表达 | 第142-143页 |
| 4 讨论 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-151页 |
| 附录A：所用主要化学及分子生物学试剂和仪器设备 | 第151-152页 |
| 附录B：缓冲液及培养基的配制 | 第152-157页 |
| 附录C：所用缩写词及中文对照 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 博士期间发表的主要学术论文及获奖成果目录 | 第159页 |
