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农杆菌介导草坪植物抗除草剂基因的遗传转化研究

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表第12-14页
第一部分 前言第14-34页
 1 课题的提出第14-15页
 2 草坪植物转基因育种的研究进展第15-32页
  2.1 草坪植物的育种实践与应用第15-17页
  2.2 草坪植物组织培养的研究进展第17-19页
  2.3 植物的遗传转化方法第19-23页
   2.3.1 基因枪法第19-20页
   2.3.2 农杆菌介导法第20页
   2.3.3 PEG法第20-21页
   2.3.4 电激法第21页
   2.3.5 碳化硅纤维介导转化法第21页
   2.3.6 花粉管通道法第21-22页
   2.3.7 子房注射法第22页
   2.3.8 其它方法第22-23页
  2.4 植物遗传转化中存在的问题及对策第23-26页
   2.4.1 转基因沉默及其对策第23-25页
   2.4.2 转基因的效率问题第25页
   2.4.3 转基因植物的安全性问题第25-26页
  2.5 草坪植物遗传转化的研究进展第26-32页
   2.5.1 表达载体的构建第27页
   2.5.2 草坪植物转基因中常用的标记基因第27-28页
   2.5.3 抗除草剂基因工程第28-31页
   2.5.4 抗病基因工程第31-32页
   2.5.5 抗非生物胁迫基因工程第32页
 3 研究目的及意义第32-34页
第二部分 高羊茅组织培养与植株高频再生第34-44页
 1 材料与方法第34-36页
  1.1 材料第34页
  1.2 方法第34-36页
   1.2.1 高羊茅种子的处理第34页
   1.2.2 愈伤组织诱导第34-35页
   1.2.3 愈伤组织分化第35页
   1.2.4 数据统计第35页
   1.2.5 均匀设计试验与统计分析第35-36页
 2 结果与分析第36-40页
  2.1 愈伤组织诱导的结果观测第36-37页
  2.2 数据处理与分析第37-39页
  2.3 愈伤组织诱导的影响因素第39页
  2.4 试验验证第39页
  2.5 愈伤组织分化与植株再生第39-40页
 3 讨论第40-44页
  3.1 均匀设计应用于植物组织培养研究的可行性第40-41页
  3.2 外植体消毒处理方法对愈伤组织诱导的影响第41-42页
  3.3 影响高羊茅愈伤组织诱导及分化的因素第42-44页
第三部分 马蹄金组织培养植株再生体系的优化第44-56页
 1 材料与方法第44-46页
  1.1 材料第44页
  1.2 方法第44-46页
   1.2.1 马蹄金无菌苗的培养第44页
   1.2.2 愈伤组织诱导第44页
   1.2.3 愈伤组织分化第44-45页
   1.2.4 再生植株的生根培养第45页
   1.2.5 数据统计第45页
   1.2.6 正交设计试验与统计分析第45-46页
 2 结果与分析第46-54页
  2.1 愈伤组织诱导的结果观测第46-47页
  2.2 不同生长调节剂对马蹄金子叶愈伤组织诱导的影响第47-48页
  2.3 不同生长调节剂对马蹄金叶片愈伤组织诱导的影响第48-49页
  2.4 不同生长调节剂对马蹄金叶柄愈伤组织诱导的影响第49-50页
  2.5 不同生长调节剂对马蹄金下胚轴愈伤组织诱导的影响第50-51页
  2.6 愈伤组织分化第51-53页
   2.6.1 数据处理与分析第51-52页
   2.6.2 马蹄金愈伤组织分化的影响因素第52-53页
   2.6.3 试验验证第53页
  2.7 愈伤组织的诱导、分化及再生过程第53-54页
 3 讨论第54-56页
  3.1 正交设计应用于植物组织培养研究的可行性第54页
  3.2 不同生长调节剂对马蹄金愈伤组织诱导的作用与调控第54-56页
第四部分 外源基因的转化与鉴定第56-72页
 1 材料与方法第56-64页
  1.1 植物材料第56页
  1.2 菌株和质粒第56-57页
  1.3 Bar基因第57页
  1.4 主要仪器及试剂来源第57页
  1.5 方法第57-64页
   1.5.1 愈伤组织对 PPT和抗生素的敏感性试验第57-58页
   1.5.2 植物 DNA提取方法第58-60页
   1.5.3 质粒 DNA的小量提取第60-61页
   1.5.4 农杆菌的转化第61-63页
   1.5.5 抗性愈伤组织的分化与再生第63页
   1.5.6 转 Bar基因植株的PCR检测第63-64页
   1.5.7 转化植株的除草剂抗性鉴定第64页
 2 结果与分析第64-69页
  2.1 愈伤组织对 PPT和抗生素的敏感性第64-65页
  2.2 不同转化方式对农杆菌转化效果的影响第65-66页
  2.3 优化的农杆菌转化实验路线第66-67页
  2.4 植物总 DNA提取第67页
  2.5 转Bar基因植株的 PCR检测第67-68页
  2.6 转化植株的除草剂抗性鉴定第68-69页
 3 讨论第69-72页
  3.1 PPT和抗生素对愈伤组织的预筛选第69页
  3.2 影响农杆菌转化的内在因素第69-70页
  3.3 正交设计用于农杆菌浸染条件优化的可行性第70-71页
  3.4 转化体系的进一步完善第71-72页
参考文献第72-81页
致谢第81页

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