| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 英文缩略表 | 第12-14页 |
| 第一章 弓形虫病概述 | 第14-18页 |
| ·弓形虫病原学 | 第14页 |
| ·弓形虫形态 | 第14页 |
| ·生活史 | 第14-15页 |
| ·弓形虫病诊断和弓形虫感染的分子诊断 | 第15-16页 |
| ·转基因弓形虫研究 | 第16-18页 |
| 第二章 带有双荧光基因质粒的构建 | 第18-36页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·材料和方法 | 第18-31页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·重组质粒 pET28a-RFP 的构建 | 第20-24页 |
| ·重组质粒 pET28a-RFP-GRA2t 的构建 | 第24-26页 |
| ·重组质粒 pET28a-SAG1p-EGFP 的构建 | 第26-27页 |
| ·重组质粒 pDMG-GRA2t-BAG1p-RFP-GRA2t 的构建 | 第27-29页 |
| ·重组质粒 pDMG-SAG1p-EGFP-GRA2t-BAG1p-RFP-GRA2t 的构建 | 第29-30页 |
| ·重组质粒全长测序 | 第30-31页 |
| ·实验结果 | 第31-34页 |
| ·重组质粒 pET28a-RFP-GRA2t 的鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒 pDMG-GRA2-BAG1-RFP-GRA2 的鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒 pDMG-SAG1-EGFP-GRA2-BAG1-RFP-GRA2 的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 弓形虫转基因技术和转化子的筛选 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料和方法 | 第36-42页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·HFF 细胞和弓形虫的体外培养 | 第37-38页 |
| ·弓形虫的电转化 | 第38-40页 |
| ·荧光弓形虫转化子的筛选与初步鉴定 | 第40-42页 |
| ·实验结果 | 第42-43页 |
| ·质粒浓度和电转化条件的确定 | 第42页 |
| ·PCR 反应检测 EGFP 和 RFP 基因结果 | 第42-43页 |
| ·经筛选后的转基因弓形虫荧光观察 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-46页 |
| 第四章 转基因弓形虫的鉴定和生物学特性分析 | 第46-69页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-61页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·试剂配制 | 第47-52页 |
| ·BAG1 蛋白抗血清的制备 | 第52-58页 |
| ·Western 鉴定转基因弓形虫期别 | 第58-60页 |
| ·转基因弓形虫生物学特性分析 | 第60-61页 |
| ·实验结果 | 第61-66页 |
| ·BAG1 基因的扩增和 pGEX-BAG1 重组质粒的鉴定 | 第61-63页 |
| ·BAG1 基因的原核表达和纯化 | 第63-64页 |
| ·Western Blot 鉴定转基因弓形虫期别 | 第64-66页 |
| ·转基因弓形虫对体外环境 pH 的敏感性验证 | 第66页 |
| ·转基因株与野生株对小鼠致死率的统计 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| 第五章 全文结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简介 | 第76页 |
